FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

PROCESO DE DISEÑO CURRICULAR

INFORME DE LABORATORIO
Código: FCQ-P05-F06; Versión: 01; 15 de enero de 2017

Asignatura: Nota
Número de práctica:
Fecha de realización: Fecha de entrega:
Integrantes / Grupo Apellido y nombre
N°:

Cromatografía de columna
RESUMEN:

En esta práctica se realizó la separación y purificación de la solución azul de

metilo Para la separación se empaco la comuna en el soporte con las pinzas,
engrasamos ligeramente la llave e introducimos hasta el fondo un pequeño
pedazo de fibra de vidrio ayudándonos con la varilla de vidrio, después se colocó
una capa de arena de 1 cm de grosor, encima se colocó silica, por último se
colocó otra capa de fibra de vidrio y se añadió la mezcla a separar azul de metilo
sobre la superficie superior de la fase estacionaria quedando adsorbida en ella.
A continuación, se introdujo la fase móvil 10 ml de etanol y presionamos
suavemente la fibra de vidrio para que quede bien colocado y sin burbujas.
Durante el proceso cromatográfico de columna los componentes de la muestra
fueron arrastradas por la fase móvil a distintas velocidades efectuándose la
separación. Se obtuvieron dos colorantes aislados, el primero fue azul de metilo
y el segundo naranja de metilo. Finalmente se destilo cada fracción recogida
para recuperar el colorante.
Palabras Clave: fase estacionaria, fase móvil, cromatografía de columna, azul de
metilo, destilación.

OBJETIVOS:
General La cromatografía de columna se usa
para conseguir compuestos
1. Aprender la técnica de químicos completamente puros a
cromatografía de columna. partir de una mezcla de elementos
2. Separar compuestos en un nivel de microgramos hasta
mediante cromatografía de kilogramos usando grandes
columna abierta. columnas industriales. La columna
Específicos básica de cromatografía proviene es
un tubo de vidrio con un diámetro de
a) Reforzar y manejar la técnica de 5 a 50 mm y posee una altura de 50
cromatografía en capa fina. cm a 1 con una llave en la parte
b) Conocer el sustento de la inferior. La solución se prepara con
cromatografía en columna, su la fase permanente en polvo y luego
aplicación y su procedimiento se esparce cuidadosamente en la
correcto. columna. Se debe tener mucho
cuidado para impedir la producción
de las burbujas de aire. Una mezcla
del material orgánico revuelve sobre
FUNDAMENTO TEÓRICO la fase estacionaria. La capa

FCQ Página 1
 FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

PROCESO DE DISEÑO CURRICULAR

INFORME DE LABORATORIO
Código: FCQ-P05-F06; Versión: 01; 15 de enero de 2017

principal esta generalmente cubierta

con una pequeña capilla de arena, Se cerro la llave y se añadió
de algodón o las del mismo vidrio cuidadosamente el eluyente, por la
para resguardar la forma de esa parte superior, sin provocar
capa orgánica, luego se pasa turbulencia en el sólido, hasta que la
lentamente a través de su columna silica se humedeció completamente
para adelantar el material orgánico. y se obtuvo eluyente a 1 cm del
Los compuestos que se encuentran borde superior de la misma. A
disueltos en la fase móvil poco a continuación, se abrió la llave para
poco saldrán de la comuna provocar goteo, e ir añadiendo
cromatográfica, y se recogen en solvente, sin dejar secar la silica.
fracciones, las fracciones menos
polares, que son por lo general las Se añadió en la parte superior 1 ml
que se retienen poco o nada en el de muestra de colorantes. Se abrió la
adsorbente serán las primeras en llave y se dejo que se inicie el goteo,
salir de la columna. sin permitir que la silica de la parte
En cambio, las sustancias más superior se seque. Se hizo este
polares, quedan retenidas por más procedimiento hasta que los
tiempo en el absorbente, y a menudo compuestos separados caigan
es necesario el uso de diferentes individualmente por la llave de la
disolventes con la finalidad de columna y se recogió cada colorante
incrementar su polaridad para que en recipientes separados.
sean arrastradas por estos. (
Hernández, 2007) Se destilo cada fracción recogida
para recuperar los colorantes.
El tiempo que se necesita para hacer
fluir un compuesto por la columna, se
conoce con el nombre de tiempo de Tabla 1. Equipos, materiales y
retención. Este tiempo varía, siendo Reactivos
característico de cada compuesto en
unas condiciones cromatográficas EQUIPOS MATERIALES REACTIVOS
determinadas, que varían según el O MATERIAS
absorbente usado, el disolvente, la PRIMAS
presión, el diámetro que tenga la Estufa Columna Mezcla de
columna utilizada, etc. (Ávih Z, 2001) cromatográfica colorantes
(azul de
metilo)
PROCEDIMIENTO
Lana de virio Solventes para
En una columna de vidrio, con llave corrido
de teflón, se puso en la base lana de (etanol)
vidrio y sobre esta una capa de Equipo de
arena, procurando que quede destilación
completamente horizontal. Sobre los simple
materiales, se puso la silica, Vaso de
distribuida de manera que no existan precipitado
vacíos en la longitud de la columna. Arena

FCQ Página 2
 FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

PROCESO DE DISEÑO CURRICULAR

INFORME DE LABORATORIO
Código: FCQ-P05-F06; Versión: 01; 15 de enero de 2017

Núcleos de
ebullición
silica

Realizado por: Grupo 3 / Tamba. E.

CÁLCULOS Y RESULTADOS
Durante la cromatografía, el primer colorante en salir fue el azul de metilo,
seguido con el colorante naranja de metilo
DISCUSIONES

En la práctica realizada, se presenció diferentes cambios tanto en; color, y

formación de cristales, lo antes mencionados son características de los
hidrocarburos alifáticos, esto se debe a que, los alcanos y alquenos reaccionan
principalmente por adición y sustitución por radicales libres, la primera ocurre en
enlaces múltiples y la segunda en otros puntos de la cadena alifática esto en
presencia de un ácido (McMurry, 2012). Con respecto a la identificación de
hidrocarburos aromáticos en la formación del anillo coloreado, fue necesario
aplicar el Tés de “Le Rosen”, esto se debe a que, al ser una técnica, basada en
la sustitución electrofílica aromática, y al constar de la aplicación de Formalín
Sulfúrico (Ácido Sulfúrico más Formalina), la solución de Formalín, provoca la
formación del carbocatión Hidroximetilo que activa la reacción, por lo tanto, es el
que ataca al compuesto aromático produciendo quinonas, pigmentos orgánicos
que se caracterizan por ciertas semejanzas estructurales que proporcionan
colores brillantes. Cave recalcar que los hidrocarburos aromáticos se
caracterizan por su tendencia a sustitución eterolítica (Luz Amparo Lozano
Urbina, 2013 ).

CONCLUSIONES
General
Se lo logro identificar con éxito los hidrocarburos alifáticos y aromáticos
presentes en cada ensayo, gracias a los cambios característicos (color, textura
y formación de cristales), el desarrollo de la práctica se realizó con las medidas
de laboratorio adecuadas, y con la explicación, teórico practico por parte del
instructor de laboratorio.

Específicos

En base a la teoría se logró conocer los diferentes tipos de reacciones y

mecanismos que intervinieron en la formación y caracterización de productos
finales, como consecuencia, para los hidrocarburos alifáticos presentan
mecanismos de adición y sustitución y para a diferencia de los hidrocarburos
aromáticos que presentan tendencia a sustitución eterolítica.

FCQ Página 3
 FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

PROCESO DE DISEÑO CURRICULAR

INFORME DE LABORATORIO
Código: FCQ-P05-F06; Versión: 01; 15 de enero de 2017

BIBLIOGRAFÍA

Ávih Z. G. et a/. Química Orgánica. Experimentos con un enfoque ecológico, Dirección General
de Publicaciones y Fomento Editorial, UNAM, México, 2001.

Abbott D. Y Andews R. S., Introducción a la Cromatografía, 3" ed., Alhambra, Madrid. 1970.

Hernández Raúl, (2007) cromatografía. Textos científicos

https://www.textoscientificos.com/química/cromatografía (21/1172019)

ANEXOS:

Anexo1: columna cromatográfica con silica (fase estacionaria)

FCQ Página 4
 FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

PROCESO DE DISEÑO CURRICULAR

INFORME DE LABORATORIO
Código: FCQ-P05-F06; Versión: 01; 15 de enero de 2017

Anexo 2: estufa y equipo de destilación básico.

CUESTIONARIO
A. Cuál es la diferencia entre una fase estacionaria para TLC y una fase
estacionaria para columna.

Generalmente la silica empleados en la técnica de capa fina, son

generalmente mucho más finos (menor tamaño de partícula) que la silica
y aluminia correspondientes a la cromatografía en columna. La mayor
superficie de adsorbente de la clase correspondiente en capa fina,
produce generalmente una separación mucho mejor que la que se puede
obtener en cromatografía de columna, este adsorbente de grado fino no
se emplea en cromatografía de columna será más grueso (mayor tamaño
de partícula) esto debido a que entre más grueso sea el adsorbente, más
rápidamente pasará el disolvente a través de él.

B.
C. De qué forma variaría la cromatografía si se aplica presión o succión en
la comuna. Donde se debería aplicar presión y donde succión.

FCQ Página 5
 FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

PROCESO DE DISEÑO CURRICULAR

INFORME DE LABORATORIO
Código: FCQ-P05-F06; Versión: 01; 15 de enero de 2017

En la cromatografía de columna modificada al aplicar presión o succión hace

que las separaciones mejoren en resolución y se pueda disminuir el tiempo
de elución, por lo tanto, constituye un método de elección. Si se quiere
introducir presión a la cromatografía de columna se debe colocar la presión
en la superior de la columna y si se quiere introducir succión se debe colocar
en la parte inferior de la columna.

FCQ Página 6