Universidad Nacional Autónoma de Honduras en el Valle de Sula

Departamento de Química Industrial

Laboratorio de Introducción a la Química
LQI-111

Integrantes:
María Fernanda Montoya 20171002174

Sadira Marielos Melara Romero 20202000621

Nombre Instructor(a): Jean Marc Carcache

#2 Práctica: Técnicas Cromatográfícas

Sección y Día de Laboratorio: Jueves 1200

Fecha: 2 Noviembre 2023

Elementos del Reporte Valor Puntaje

Objetivos
Procedimiento Experimental
Análisis de Resultados
Gráficos/Cálculos
Conclusiones
Nota
 Objetivos
General

 Conocer las diferentes técnicas de cromatografía y manejar cada una de ellas mediante un análisis
en el laboratorio.
Específicos

 Conocer la versatilidad de las técnicas cromatográficas

 Comprender y aplicar la técnica de cromatografía de columna y cromatografía de capa fina, sus
respectivas características y los factores que intervienen en cada una.
 Reactivos y materiales

Reactivos
 Etanol
 Éter de petróleo
 Heptano
 Gel de sílice
 Arena

Equipo
 Recipiente de vidrio
 Matraz kitasato
 Beaker
 Soporte universal
 Pinza mariposa
 Pinza de dos brazos
 Tapón perforado
 Tapón de gotero
 Manguera
 Bomba de vacío
 Papel cromatografíco
 Estufa
 Procedimiento Experimental
Cromatografía en capa fina
1. Se obtuvo clorofila de una planta.
2. Se corto una tira de papel cromatográfico y se colocó una gota de clorofila.

3. Luego se tomó un recipiente de vidrio y se añadieron 10ML de etanol.

4. Se colocaron los puntos de origen de la muestra dejando espacio para la fase móvil.
5. Se tomo la tira de papel y se posiciono dentro del recipiente.
6. Luego se tapó el recipiente.
7. Se espero que la fase móvil llegara al punto más alto del papel.
8. Se calcularon los factores de retención pertinentes y se anotaron los cambios.

Resultados: se observó una coloración que avanzo hasta la parte superior.

Cromatografía en columna de gel

1. Se preparo el montaje para esta técnica con sus debidos materiales.
2. Se preparo un eluyente 5:1 de éter de petróleo y heptano logrando 120mL.
3. Se midieron 3g de gel de sílice y se vertieron 15Ml de eluyente.
4. Se sello la columna y se vertió dentro del gel.
5. Luego se acomodo la fase estacionaria con suaves golpes.
6. Después se esperó que la columna perdiera casi todo el eluyente, y luego se añadió una fina
capa de arena.
7. Se añadió una muestra de 2g de pasta disuelto en 7Ml de eluyente.
8. Luego se relleno contantemente la columna con fase móvil.
9. Se recolecto la fase móvil y se esperó obtener la primera gota coloreada.
 10. Al observar la primera gota coloreada se descarto todo lo recolectado y se detuvo la
cromatografía.

11. Luego endulzó el matraz Kitasato con eluyente.

12. Después de reconecto el sistema de cromatografía.
13. Luego se extrajo la fase coloreada y se anoto la masa de un beaker borosilicatado.
14. Después se añadió la fase coloreada en el beaker y se llevó a evaporación.
Resultados: se obtuvo una coloración amarilla cuando y cuando se llevó a evaporación se observo en
las paredes del beaker un residuo anaranjado llamado licopeno.
Análisis de resultados

La cromatografía de capa fina (TLC, por sus siglas en inglés) es una técnica de separación y
análisis que se utiliza para separar componentes de una mezcla basados en su movilidad relativa
a través de una fase estacionaria y una fase móvil. Esa vez es un análisis de clorofila utilizando
TLC, al usar etanol el capilar aspira el pigmento de clorofila a través del papel de difusión de
muestra (cualquier papel), dependiendo del color indicado en el papel de cromatografía, este
puede ser el caso: determinación de la presencia de clorofila A,B.
Es importante recordar que el análisis de clorofila por es una técnica cualitativa y también
puede ser cuantitativa. Los estándares de clorofila conocidos pueden ayudar en la identificación
y cuantificación de los pigmentos de clorofila en la muestra.
Cromatografía en columna de gel
El color que observamos en el objeto de nuestro entorno (pasta de tomate), la combinación con
las sustancias una gel de sílice y el eluyente, para separar estos pigmentos se recurre a la
cromatografía, puesto que, al hacer pasarla mezcla de pigmentos por una superficie porosa
llamada fase estacionaria, estos se separan en función de la velocidad con la que recorren y
salen de dicha fase, al ser arrastrados por un líquido o solvente que se denomina fase móvil,
esta velocidad depende de la afinidad que presentan los componentes de la mezcla con cada
una de las fases. Por ello la elección de la fase móvil y estacionaria es muy importante,
pues de esto depende que la separación de los componentes sea eficaz. La disolvente disputa
con el componente modelo por los sitios de unión. Estos componentes se mueven de forma
reversible y continua en la dirección del flujo de disolvente. Los compuestos disueltos en la
fase móvil abandonan gradualmente la fase móvil. Cromatografía en columna y recogida de
fracciones.
Se hace pasar un solvente (éter depetroleo con heptano) a través de la columna. Los compuestos
en la muestra se separan a medida que interactúan de manera diferente con el gel de sílice y el
eluyente. Los compuestos que tienen una mayor afinidad por el gel de sílice se retienen más en
la columna, lo que ralentiza su movimiento a través de la misma. Por lo tanto, los compuestos
se eluyen en el orden de su afinidad con el gel de sílice, lo que permite su separación. A medida
que los compuestos se eluyen de la columna, se recogen en fracciones. Cada fracción contiene
un compuesto o una mezcla de compuestos separados.

Esta técnica es útil para separar y purificar sustancias químicas, como proteínas, nucleótidos,
pigmentos y más. En este caso extrajimos pigmento de la pasta de tómame obteniendo el
pigmento rojizo llamado licopeno.
 Conclusiones
 Un tipo de cromatografía en capa fina implica aplicar un adsorbente eficaz, como gel
de sílice, a un portaobjetos para crear una capa fina y uniforme. Por lo tanto, en la
práctica desarrollada se puede observar que se escriben diferentes colores
dependiendo del patrón obtenido al mover las piezas. También debes recordar que la
velocidad del movimiento depende de la concentración.
 Un punto muy importante a tener en cuenta es que una fase estacionaria altamente
polar retiene los componentes más polares de la mezcla. Sin embargo, la menor
polaridad de la fase móvil aumenta la velocidad.
 En conclusión, con el estudio y conocimiento de la cromatografía y sus distintos tipos
de reacciones se pudo determinar que las sustancias pueden estar unidas en un factor
que mediante la cromatografía pueden separarse.
Bibliografía
Sgariglia. (2010). Repositorio Institucional COCINET. Obtenido de
https://ri.conicet.gov.ar/bitstream/handle/11336/75465/CONICET_Digital_Nro.3655a360-
b03b-44c8-8519-bc747d073f7c_A.pdf
SINCHEM EUROPE. (9 de Julio de 2017). Obtenido de Se hace pasar un solvente (éter depetroleo
con heptano) a través de la columna. Los compuestos en la muestra se separan a medida que
interactúan de manera diferente con el gel de sílice y el eluyente. Los compuestos que tienen
una mayor afinidad por el ge