ESCUELA DE PROFESIONAL CIENCIA FARMACEUTICA Y BIOQUIMICA

Tema 5: CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA.

IDENTIFICACIÓN DE COLORANTES (TARTRAZINA).

PRÁCTICAS DE PRIMER NIVEL “C” BROMATOLOGÍA

CATEDRÁTICA:
Q.F. QUISPE QUISPE, ESTHER NANCY
INTEGRANTES:
 Baldeón Carlos, Evelyn Dolores
 Breña Salazar, Yesila
 Ccanto Otañe, Luis Angel
 Damian Fernández, Gina Jhulisa
 Machado Buendia, Flavia
 Mejia Pulido, Zandra
 Objetivos

 Conseguir la comprensión de la teoría y la metodología de la

cromatografía en capa fina.

 Identificar la coloración de la Tartrazina.

 Reconocer productos que contengan el componente

denominado Tartrazina.
CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA
La cromatografía de capa fina pertenece a la misma
categoría de cromatografía que la cromatografía en
papel.
Sin embargo, se diferencia en que la fase estacionaria
se compone de materia pulverizada como la alúmina,
gel de sílice o celulosa y se encuentra sobre una
superficie, generalmente una placa de vidrio o de
aluminio.
La ventaja frente a la cromatografía de papel se
encuentra en su proceso, ya que es mucho más rápido.
 FASES
Fase estacionaria:

Ácido Acético Celulosa

Alúmina

Depositada sobre un soporte plano

Placa de vidrio
Fase móvil:
Lámina de plástico
Ácido Acético
Lámina de aluminio
Éter dietílico Benceno
Ácido Acético
Agua Metanol
CUAL ES LA FASE ESTACIONARIA
 En la cromatografía en capa fina (CCF) la fase estacionaria consiste en
una capa delgada de un adsorbente (como por ejemplo gel de sílice, alúmina o
celulosa) depositada sobre un soporte plano como una placa de vidrio, o una
lámina de aluminio o de plástico.
FASE MOVIL
La fase móvil, por lo tanto, es un momento o etapa que se usa para portar la
mezcla y que se lleva a cabo a través de una columna cromatografía y de la fase
estacionaria. De hecho, el estado físico de la fase móvil delimita, marca y determina
la primera división de los métodos cromatográficos.
 Factor de Retención
 El factor de retención (Rf) se utiliza para medir el movimiento de los compuestos a lo largo de la placa de
TLC. Su valor se encuentra siempre entre cero y uno.

Rf =

 En general, cuanto más fuerte se une un compuesto a la fase estacionaria adsorbente, más despacio migra
hacia arriba en la placa de la TLC. Como los adsorbentes de la TLC son normalmente polares, los
compuestos no polares tienden a subir más deprisa por la placa, lo que produce mayores valores de Rf,
mientras que los compuestos polares tienden a moverse más despacio e y tienen menores valores de Rf
 La FM es líquida y FE es un sólido. La
FE será un componente polar y el
Se basa en la preparación de una capa
eluyente será menos polar que la FE, y
uniforme de un absorbente mantenido
los componentes que se desplacen con
sobre una placa de vidrio u otro soporte
mayor velocidad serán los menos
polares.

El tiempo que se necesita para conseguir

las separaciones es menor y la separación
es mejor.
 Proceso de análisis por cromatografía fina
Preparacion del
material
Se disuelve la muestra para
dejarla en estado líquido y
prepara un tubo capilar se
prepara el mismo tiempo una
placa de celulosa absorbente y
se dibuja una línea de base a
un par de centímetros del
borde inferior.
Aplicación de la
Elución Separación Secado y analisis
muestra
Con el tubo capilar, y La muestra se introduce en una Las distintas moléculas tienen Se saca la placa de la cubeta
usando la línea base, se cubeta con un disolvente. Se distintas masas, por lo que se y se marca la altura que ha
aplica una gota de la espera que el disolvente mueven a velocidades llegado el disolvente, se deja
muestra en la placa de la ascienda por capilaridad hasta diferentes y alcanzan alturas secar la placa y se mide la
celulosa, procurando que unos 2 a 3 cms de la parte diferentes sobre la placa, distancia recorrida por los
se extienda lo menos superior, este arrastra la creando un patrón existe componentes de la muestra,
posible y que no dañe la muestra a su paso, separando patrones estándares para casi comparándola con los
capa. A continuación se sus componentes. todas las sustancias patrones establecidos.
deja secar habituales.
 Ventajas de la cromatografía en capa fina
 Uso de pequeñas cantidades de reactivos
 Identificación de diferentes compuestos en una misma corrida
 La detección de sustancias en condiciones severas de separación
sin riesgo de dañar o afectar algún tipo de instrumento (es decir,
permite el uso de reactivos nocivos o corrosivos que podrían
afectar equipos estandarizados)
 Fácil transporte a diferentes zonas donde se requiera hacer algún
tipo de análisis y se carezca de los recursos necesarios para la
adquisición de una técnica más sofisticada
 Análisis simultáneo de la muestra y el patrón de referencia
 Desventajas de la cromatografía en capa fina
 Tenemos la limitada especificidad y la baja sensibilidad en
comparación con otras técnicas analíticas.
 La existencia de sustancias que no son fluorescentes (por
ejemplo, los alcanos) o el hecho de que moléculas con
estructura o polaridad similar no pueden ser separadas o
detectadas de manera adecuada.
 Limitado control del flujo de solvente (fase móvil) en las
separaciones (la técnica carece de instrumentación que controle
la velocidad y el tiempo al cual se efectúa una separación
eficiente)
 La dificultad de cuantificación de los analitos (esta se debe
complementar con otras técnicas analíticas las cuales,
generalmente, no se llevan a cabo en tiempo real)
CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA EN LA INDUSTRIA FARMACÉUTICA
La cromatografía en capa fina también es frecuentemente utilizada
y ampliamente promovida por la Oficina de la Naciones Unidas
contra la Droga y el Delito (UNODOC) para la detección de
numerosos estupefacientes o drogas en general. Por otro lado, los
laboratorios móviles globales como el Mini laboratorio del Global
Pharma Health Fund (GPHF) utilizan este sencillo método para un
tamizaje rápido, tanto para productos que declaran la sustancia
activa como aquellos que no, o para determinar el perfil de
impureza similar al del producto farmacéutico estándar de origen
conocido y legal. Con ello se puede corroborar que la TLC y sus
complementos permiten análisis sencillos, pero de gran importancia,
en medicamentos así como en otros tipos de muestras que requieren
un proceso de seguimiento y cumplimiento de especificaciones de
calidad.
TÉCNICAS INSTRUMENTALES
1. Marcar la placa de sÍlica gel y Sembrar una gota.
2. Poner las placas la fase móvil (estándar)
3. Sacar las placas y medir los cálculos
 Colorantes
La primera sensación percibida en un alimento, que
incluso influye sobre el sabor y el olor, es el color. Así
que para hacerlos atractivos a los consumidores deben
colorearse artificialmente. Puede definirse entonces a
los colorantes como aditivos alimentarios que dan o
restituyen color a un alimento.
Para ello se pueden utilizar sustancias obtenidas de
fuentes naturales o preparadas por métodos físicos o
químicos. Pero no todas las sustancias colorantes son
adecuadas con fines alimentarios, ya que algunas
incluso pueden resultar perjudiciales para la salud.
Clasificación de colorantes
Colorantes naturales

Los colorantes naturales incluyen pigmentos derivados de

fuentes naturales tales como vegetales, minerales o
animales, y productos derivados de sustancias naturales.
Colorantes artificiales

Son elaborados por el hombre a través de procesos de síntesis química y que no existen por si mismos en la
naturaleza. Dentro de éste grupo se encuentran los llamados colorantes azoicos, los cuales pertenecen a una
familia de sustancias orgánicas que se caracterizan por la presencia de un grupo particular que contiene
nitrógeno unido a un anillo aromático.
 TARTRAZINA (E102)

• Es uno de los colorantes artificiales más

utilizados en la industria de alimentos.
• Conocido también como amarillo No.5.
• Se presenta en forma de polvo o gránulos de
color naranja claro, es soluble en agua e
insoluble en etanol.
• Es el colorante que produce más reacciones
alérgicas y es sospechoso de dejar residuos de
sustancias cancerígenas.
• Algunos alimentos que lo contienen son
refrescos en polvo, dulces, helados, aperitivos,
salsas, condimentos
COMO IDENTIFICAR LA
TARTRAZINA
Es del color amarillo intenso al naranja brillante. Se obtiene derivado del
petróleo. Pertenece al grupo de colorantes azoicos. Es frecuente su combinación con
otros colorantes como el Amarillo Ocaso FCF (E110), o su mezcla con Azul Brillante
FCF (E133) para fabricar colorante verde.
 Procedimiento de la identificación de la Tartrazina
Aplicar en línea con un capilar adecuado, 10 microlitros de la Solución Madre
solución obtenida anteriormente y 10 microlitros de las Pesar exactamente 0.025g de los colorantes artificiales
soluciones estándar de los colorantes de referencia en un trozo amarillo No.5 y amarillo No.6, disolver en agua
de papel filtro Whatman No.1 de 11x15cm, especial para destilada y transferir cuantitativamente a diferentes
cromatografía, dejando por lo menos 1 cm entre sí y a una balones aforados de 100 mL, llevar a volumen con el
distancia aproximada de 1 cm del borde inferior. Dejar secar el mismo solvente. La concentración final será de
0.025%.
papel filtro con las manchas al aire libre. Introducir el papel en
una cámara cromatográfica previamente saturada con la fase
móvil (etanol al 95% y agua destilada; en proporción 1:1) hasta
que el frente del solvente alcance 15 aproximadamente 10 cm.
Retirar la placa de la cámara y dejar secar a temperatura
ambiente. Comparar los valores de Rf (0.38 para el amarillo
No.5 y 0.60 para el amarillo No.6) (11) y el color de las
manchas obtenidas en las muestras con las de los estándares
(manchas color amarillo para el amarillo No.5 y color
anaranjado para el amarillo No.6), si son idénticos el resultado
será positivo.
¿Cómo se determina la tartrazina en
alimentos?
La determinación de tartrazina es posible mediante la aplicación de
espectrofotometría con detección UV-VIS y por cromatografía de líquidos con
detección UV.
 Conclusiones
 Se logró conseguir la comprensión de la teoría y la metodología de la
cromatografía en capa fina, ya que se aplica muy bien el dicho que
dice, “una imagen vale más que mil palabras”, y de eso se trata, que
por medio de una imagen se puede conocer la estructura del estrato
analizado de las porciones de muestras.

 Se identificó la coloración de la Tartrazina

 Se reconoció los productos que contienen tartrazinas, ya que estos

causan daños a la salud, específicamente al cerebro; tales como, las
gaseosas, refrescos, etc.
GRACIAS