Marco terico

Metabol i smo de l os l pi dos y enzi mas i nvol ucradas

La digestin y el transporte de los
Lpidos, representa un problema
nico para el organismo debido a
que son insolubles en agua,
mientras que las enzimas del
metabolismo de lpidos son
solubles o estn unidas a la
membrana plasmtica, en
contacto con el agua. Adems, los
Lpidos, y sus productos de
degradacin deben transportarse
a travs de compartimientos
acuosos dentro de la clula o en la sangre.
Durante la digestin, el problema se resuelve empleando los cidos y sales biliares;
estos compuestos son derivados anfipticos del Colesterol, que se forman en el Hgado
y se acumulan en la Vescula Biliar.
Durante la digestin se excretan al intestino donde emulsifican la grasa, aumentando
el rea de la interface lpido-agua, que es donde pueden actuar las enzimas que
hidrolizan los lpidos. Tambin mantienen en suspensin los productos de degradacin,
como el mono- y el diacilglicridos.
La degradacin de los triacilglicridos depende de la actividad de la Lipasa Pancretica
(Triacilglirido Hidrolasa,) enzima que se libera al intestino y cataliza la hidrlisis de
triacilglicridos en las posiciones 1 y 3, formado 2 monocilglicridos y cidos grasos
libres. La enzima, necesita de otra protena, llamada Colipasa, que le facilita la unin
en la interfase lpido-agua. Los cidos grasos y monoacilglicridos producidos por la
lipasa, y el Colesterol, son absorbidos por las clulas del epitelio intestinal, donde se
utilizan para volver a formar los triacilglicridos. Los inhibidores de la Lipasa
Pancretica, como el Orlistat (Xenical) se utilizan para el control de peso debido a que
evitan la degradacin de triacilglicridos y con ello disminuyen la absorcin de grasas
provenientes de alimentos.
El Pncreas tambin secreta otra enzima para la digestin de Lpidos, la Fosfolipasa A2,
que hidroliza el enlace ster del carbono 2 del glicerol, liberando un cido graso y
lisofosfolpidos, que poseen accin detergente y tambin participan en la
emulsificacin de las grasas. Junto con el Colesterol y los cidos y sales biliares, en la
bilis tambin se secretan algunos fosfolpidos como la Lecitina, que sirven como
sustrato de la Fosfolipasa A2, y ayudan en la emulsificacin de las grasas..
Dentro de las clulas del epitelio intestinal, y de otras ms, el Colesterol se esterifica
con cidos grasos para formar Esteres de Colesterol, por accin de la enzima Acil-CoA:
Colesterol Acil Transferasa (ACAT). Los steres de Colesterol se almacenan en diversos
tipos de clulas, y son empleados en el Hgado para formar lipoprotenas. En el
interior de las clulas intestinales, los cidos grasos libres, que son poco solubles y
tienen propiedades detergentes, se mantienen unidos a una protena citoplsmica, la I-
FABP (Intestinal Fatty Acid Binding Protein Protena Intestinal que Une cidos
Grasos). La estructura de esta protena se caracteriza por la presencia de una pinza
beta, que es una cavidad formada por dos placas , casi ortogonales, cada una con 5
segmentos de cadena antiparalelos. En la sangre, los cidos grasos se transportan
unidos a la Albmina srica que es secretada por el Hgado. Casi todos los lpidos
restantes se transportan en la sangre en los complejos supramoleculares llamados
lipoprotenas, que estudiamos en el captulo de Estructura de Lpidos.
Las esterasas son enzimas que catalizan reacciones de hidrlisis (fase I de la
biotransformacin) de steres carboxlicos (carboxiesterasas), amidas (amidasas),
steres de fosfato (fosfatasas).
Reaccin modelo de una carboxiesterasa:

Hay diversos tipos de enzimas esterasas y con muy diferente distribucin en tejidos y
organismos. Las Carboxiesterasas (esterasas tipo B): son un grupo de E en mamferos
que hidrolizan, adems de muchos compuestos endgenos, a xenobiticos con grupos
ster, amida, tioester, steres de fosfato (paration, paraoxon) y anhidridos de cido
(DIPFP = DFP). Las esterasas A contienen un residuo de CYS en el centro activo y las
esterasas B contienen un residuo de SER. En las esterasas A, los organofosforados
interaccionan con el grupo funcional -SH y forman un enlace P-S que es fcilmente
hidrolizado por H2O. En las esterasas B, la interaccin de los organofosforados con el -
OH de la SER, forma un enlace P-O que no es hidrolizado por H2O. Los
organofosforados que se unen estequiomtricamente a las esterasas B inhiben su
actividad enzimtica.






Pancreatina
Es una mezcla de las enzimas digestivas que se encuentran de forma natural en los
intestinos. Las enzimas digestivas son protenas complejas que participan en la
digestin y producen cambios qumicos en otras sustancias. Funcionan de manera
ptima a temperatura y pH especficos.

Las enzimas digestivas incluyen las enzimas pancreticas, las enzimas de origen vegetal
y las enzimas derivadas de hongos. Existen 3 clases de enzimas digestivas: enzimas
proteolticas, necesarias para digerir las protenas; lipasas, requeridas para digerir las
grasas, y amilasas, necesarias para digerir los carbohidratos.

Pancreatina............................................................ 150 y 300 mg
Actividad enzimtica por CPSULA:
Lipasa........................................................ 10 000 unidades USP
Amilasa..................................................... 33 200 unidades USP
Proteasa.................................................... 37 500 unidades USP
Identificacin de actividad enzimtica
La identificacin de la actividad de estas enzimas se realiza a travs de una titulacin cido-
base, ya que la accin de las lipasas sobre los lpidos saponificables libera cidos grasos que
pueden ser cuantificados por la valoracin del grupo funcional cido carboxlico que los
caracteriza.
La titulacin es un mtodo para determinar la cantidad de una sustancia presente en solucin.
Una solucin de concentracin conocida, llamada solucin valorada, se agrega con una bureta
a la solucin que se analiza. En el caso ideal, la adicin se detiene cuando se ha agregado la
cantidad de reactivo determinada en funcin de un cambio de coloracin en el caso de utilizar
un indicador interno, y especificada por la siguiente ecuacin de la titulacin: NA VA = NB VB
A este punto se le llama punto de equivalencia. En trminos generales la reaccin entre
cantidades equivalentes de cidos y bases se llama neutralizacin o reaccin de neutralizacin,
la caracterstica de una reaccin de neutralizacin es siempre la combinacin de hidrogeniones
que proceden del cido, con hidroxiliones procedentes de la base para dar molculas de agua
sin disociar, con liberacin de energa calorfica como calor de neutralizacin y formacin de
una sal.

Referencias

Velzquez Monroy Mara de la Luz. Metabolismo de los lpidos. Facultad de ciencias
pag. 4-6




Metodologa





numerar los matraces
con los nmeros del uno
al cinco y uno con el
nmero tres prima (3')
Medir con una pipeta
volumtrica, 5 mL de
leche homogenizada y
verterlos en cada uno de
los seis matraces
Adicionar a cada matraz
1.5 mL de extracto
neutro de Pancreatina al
1 %
Pipetear en el matraz
marcado tres prima (3'),
1.0 mL de la solucin de
sales biliares al 1 %
Colocar todos los matraces en un
bao Mara a 37
o
C
Despus de 15 minutos, retirar del
bao Mara el matraz identificado
con el numero 1 y adicionarle 12.5
mL de Etanol titulando enseguida
con la solucin de KOH 0.05N
usando Fenolftalena como
indicador.
Repetir el procedimiento anterior,
sacando el matraz 2 a los 30
minutos, el 3 y 3' a los 45, el 4 a los
60 y el 5 a los 75 minutos.
Preparar un testigo de la siguiente
manera. Aadir en un matraz de
125 mL, 5 mL de la leche
homogenizada y 1.5 mL de la
solucin de Pancreatina