Hematoxilina

¿ Que es la hematoxilina ?
Es un colorante natural que se extrae de un árbol.es un colorante básico y versátil , el cual puede ser soluble en agua,
alcoholes,etilenglicol y glicerol.

La hematoxilina en si no es un colorante ya que por medio de un proceso de oxidación genera la hemateina la cual le
otorga el color. La hematoxilina tiñe de violeta azulado intenso la estructuras ácidas de la células como los
ribosomas,el núcleo es cual contiene la cromatina y otras estructuras ácidas.
 ¿ Como se extrae ?
Se extrae del un árbol llamado haematoxylum o haematoxylon campechianum. Este nombre deriva de 2
palabras griegas haimatos: sangre y xylon: madera, que seria madera de sangre.

La hematoxilina se consigue al astillar el duramen de los arboles recién cortados .

Las astillas se hierven en agua. se obtiene una solución de color rojo anaranjado, luego se vuelve amarilla y
posteriormente negra o negruzca cuando se enfría. El agua se evapora dejando la hematoxilina “cruda” con
una pureza que oscila entre 0% y 10%, dependiendo de la línea genética que posee el árbol. es necesario
purificar posteriormente con eter, y volver a cristalizar en un ambiente acuoso para su preparación final
 Oxidación
La hematoxilina como tal no es un tinte ,por que tiene que oxidase antes de poder usarse. Este proceso se
denomina maduración y puede llevarse a cabo de dos formas:

-maduración natural
La maduración natural se logra poniendo la solución en un matraz de gran tamaño, para que pueda agitarse, con la
parte superior tapada sin apretar con una tela de algodón, permitiendo que entre el aire. Esto se deja en un lugar
cálido, luminoso y aireado para que se produzca la oxidación. La oxidación puede tardar varios meses entre 3 a 4
mese. Cuando la solución da una tinción satisfactoria, se transfiere a una botella marrón y se tapa herméticamente
para retardar la oxidación adicional.

-maduración química
La maduración química se realiza con agentes oxidantes químicos. El mas común es el yodato de sodio o oxido
de mercurio. Se puede provocar una oxidación mas rápida si se hierve la solución de hematoxilina con el
oxidante. No siempre es necesario hervir ya que la oxidación también puede darse a temperatura ambiente.
 hematoxilina vs hemateina
Como se menciono la hematoxilina no es realmente es el colorante sino la hemateina, la cual se consigue
mediante la oxidación.

La pregunta que surge es, si la hemateina es el colorante y si la hematoxilina necesita ser oxidada a hemateina
antes de poder teñir.

¿Por qué no usar hemateína en primer lugar?

La respuesta está en la dificultad de obtener una hemateína satisfactoria. Es bastante fácil obtener una buena
hematoxilina,Sin embargo, la hemateína es otra historia.Si se empieza con hemateína, la oxidación empezará
a disminuir la capacidad de tinción desde el principio, acortando la vida útil de la solución
 Mordiente
Los mordientes son indispensables en histología y para el método de tinción más común que es H&E. A
pesar de su importancia, a veces existe cierta confusión sobre qué son o no los mordientes. El término se
usa a menudo como un término general para describir todos y cada uno de los procedimientos que
facilitan la tinción.

Un mordiente es un metal con una valencia de al menos dos. Los metales más comunes utilizados son el
aluminio y el hierro férrico. Su unión a los colorantes es por un enlace covalente y coordinado. Esto
también se conoce como quelación.

Cuando el alumbre y la hemateína se combinan se forma un laca. Este es un compuesto químico

específico y es lo que hace la tinción de los núcleos.

En soluciones fuertes puede precipitar, o los productos derivados de ella, como un lodo oscuro, sobre
todo porque la hemateína sigue oxidándose a otros compuestos. En términos prácticos, esto significa que
las soluciones hemalum de deben filtrarse con frecuencia, y que hacerlo es más importante.
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 hematoxilina vs hemateina
La hematoxilina como tal no es un tinte ,por que tiene que oxidase antes de poder usarse. Este proceso se
denomina maduración y puede llevarse a cabo de dos formas:

-maduración natural
La maduración natural se logra poniendo la solución en un matraz de gran tamaño, para que pueda
agitarse, con la parte superior tapada sin apretar con una tela de algodón, permitiendo que entre el aire.
Esto se deja en un lugar cálido, luminoso y aireado para que se produzca la oxidación. La oxidación
puede tardar varios meses (entre 3 a 4 mese. Cuando la solución da una tinción satisfactoria, se transfiere
a una botella marrón y se tapa herméticamente para retardar la oxidación adicional.

-maduración química
La maduración química se realiza con agentes oxidantes químicos. El mas común es el yodato de sodio o
oxido de mercurio. Se puede provocar una oxidación mas rápida si se hierve la solución de hematoxilina
con el oxidante. No siempre es necesario hervir ya que la oxidación también puede darse a temperatura
ambiente.