5.

PRUEBAS CRUZADAS Las pruebas cruzadas pretransfusionales intentan detectar reacciones Ag-Ac potenciales antes de que la sangre sea transfundida. Cada unidad de sangre extraida debe ser examinada y clasificada de forma individual para descartar incompatibilidades entre el donante y el receptor, a fin de que la transfusin se realice con las mximas garantas. Las pruebas de compatibilidad se realizan antes de transfundir la sangre para asegurarse de que los hemates del donante son compatibles con el paciente. Comprende las siguientes determinaciones: 1. 2. 3. 4. 5. Tipaje de grupo ABO y Rh del receptor. Deteccin e identificacin de Acs en el suero del receptor. Tipaje correcto de grupo ABO y Rh del donante. Deteccin de Acs en el donante. Pruebas cruzadas (compatibilidad pretransfusional).

Las posibilidades de incompatibilidad se reducen mucho si el paciente y el donante, presentan pruebas negativas de screening de Ac. La prueba cruzada debe ser lo ms completa posible, a fin de proteger al paciente. Las pruebas cruzadas se denominan: Mayor y menor. 5.1. PRUEBA CRUZADA MAYOR Consiste en enfrentar suero del receptor con hemates del donante bajo condiciones ptimas para la actividad de los Ac en el laboratorio. Adems se realiza un escrutinio de anticuerpos irregulares en el receptor. Los hemates y el suero han de ser incubados el tiempo suficiente para que puedan reaccionar incluso los Ac muy poco potentes; por lo que es necesario aadir suero antiglobulina despus de la incubacin para detectar los Ac que recubren a los hemates pero que no llegan a aglutinarlos. La prueba debe comprobarse mediante controles. Para preparar la suspensin de hemates del donante se utiliza la sangre contenida en los segmentos de la bolsa (macarrones). Para realizar la prueba se rotulan dos tubos, en cada uno se coloca 1 gota de suspensin al 5% de hemates del donante en S.S, y 2 gotas de suero del receptor. - En el tubo "1": * Aadir 2 gotas de albmina al 22-30%. Mezclar. * Incubar a 37C /30-45 min. * Centrifugar y leer. * Lavar los hemates 3-4 veces con solucin salina. * Aadir dos gotas de antiglobulina. Agitar. HEMA 9/29

* Centrifugar y examinar los resultados. * Adicionar hemates de control de Coombs. - En el tubo "2": * Dejar en reposo a T ambiente de 3-5 min. * Centrifugar y observar. * Dejar de nuevo a T ambiente 15 min. * Centrifugar de nuevo y observar la presencia de aglutinacin. 5.1.1 INTERPRETACIN. A) PRUEBA POSITIVA: La aglutinacin indica incompatibilidad ya que significa que algn Ac del suero del receptor se ha unido a los hemates del donante. La valoracin se puede hacer con cruces, o bien se puede hacer una prueba cruzada titulada empleando diluciones dobles progresivas. Para diferenciar aloAc de los autoAc se debe disponer de un autocontrol, y cuando ste es negativo se sospecha la existencia de aloAc en una prueba cruzada incompatible. Los Ac se deben identificar antes de que el paciente reciba la transfusin. Si el autocontrol es positivo se sospecha la presencia de autoAc. Los aloAc producen reacciones transfusionales ms graves que los autoAc. B) PRUEBA NEGATIVA: La prueba cruzada es compatible si no hay aglutinacin, ya que indica que no existen aloAc eritrocitarios en el suero del receptor. No obstante hay que tener en cuenta que todas las pruebas de la antiglobulina negativas deben ser comprobadas para asegurar que la tcnica se ha realizado correctamente. Para ello, se aaden hemates sensibilizados y lavados (GR control) a todos los tubos que contienen resultado negativo. Si los resultados son correctos los hemates control deben ser aglutinados. En cambio si no se observa aglutinacin, la prueba no es vlida y debe repetirse. 5.2. PRUEBA CRUZADA MENOR En ella el suero del donante se enfrenta con hemates del paciente. (Se llama menor porque el plasma del donante sufre una dilucin rpida al entrar en el torrente sanguneo del receptor, lo que hace que los problemas debidos a los Ac transfundidos sean menores en el peor de los casos). Actualmente se utiliza poco, debido al uso generalizado de los concentrados de hemates y a la deteccin habitual de los Ac en la sangre del donante. Sin HEMA 9/30

embargo cuando se utilice un gran volumen de plasma si est aconsejada su realizacin. Esta prueba puede, tambien, poner de manifiesto la presencia de Ac del donante contra Ag de baja frecuencia. 5.3. ENVIO DE BOLSAS EN SITUACIONES URGENTES Cuando existe una situacin desesperada con respecto a la necesidad de sangre, el mdico debe sopesar el riesgo de transfundir sangre no cruzada contra el riesgo de esperar mientras se realizan las pruebas cruzadas. Cuando la sangre se enva antes de ser cruzada, en la ficha debe aparecer el nombre del mdico que hace la peticin, indicando que la peticin fue de extrema urgencia. No obstante, siempre se enviar sangre de un grupo y Rh compatible y correctamente etiquetada. En estas situaciones se debe actuar de la siguiente manera: 1. Mandar la sangre no cruzada e inmediatamente comenzar los test de compatibilidad. 2. La sangre que se envia debe ser ABO y Rh compatibles con el receptor. En caso de no haber tenido tiempo para determinar grupo y Rh del receptor, siempre se enviar sangre del grupo O , de baja titulacin y de Rh negativo. 3. Se indicar en la etiqueta que los test pretransfusionales no se han realizado. 4. Realizar pruebas cruzadas y "screening" de Ac tan pronto como sea posible, y si se detecta incompatibilidad en cualquier momento, se notifica, lo antes posible, al mdico del paciente y al hematlogo correspondiente. 5.4. TEST PRETRANSFUSIONALES: Tienen como finalidad seleccionar para cada receptor, componentes sanguneos, que cuando sean transfundidos , tengan una supervivencia aceptable y no causen la hemlisis de los hemates del receptor. En un test pretransfusional los pasos que se siguen son: 1. Identificacin del receptor y de la muestra de sangre del mismo. 2. Revisin de los registros de transfusin existentes en el Banco de sangre (ficha de transfusin). 3. Determinacin del grupo ABO y Rh de la sangre del receptor. 4. Deteccin de Ac en suero o en plasma del receptor. 5. Seleccionar los componentes sanguneos de los grupos ABO y Rh que son compatibles con el receptor. 6. Confirmar el grupo sanguneo del donante, o de la bolsa del donante. 7. Realizar pruebas cruzadas o test de aglutinacin enfrentando suero o plasma del receptor con hemates del donante. 8. Etiquetar los componentes con la informacin del receptor. Si los test pretransfusionales se realizan adecuadamente: HEMA 9/31

Aseguran que un paciente es transfundido con los componentes sanguneos adecuados. Verifica, en la mayoria de los casos , la compatibilidad ABO. Detecta la mayoria de los Ac clinicamente significativos.

La peticin de transfusin debe contener la informacin suficiente para identificar al receptor. En ella debe constar: Nombre completo Un N de identificacin que puede ser: El de la H clnica, o el de afiliacin a la S.S. Localizacin del paciente Nombre del facultativo que hace la peticin Razn de la transfusin Diagnstico Sexo Historia de transfusiones o embarazos previos (pueden ser de gran ayuda en los problemas serolgicos que pudieran surgir).

Una peticin de transfusin en la que falte la informacin requerida, o que est pero sea ilegible debe ser rechazada. La muestra de sangre extraida al receptor debe recogerse en tubos, con tapn, correctamente etiquetados. El ATS que realiza la extraccin , antes de extraer la sangre debe identificar al paciente, comprobando que los datos de peticin corresponden a ese paciente. Una vez extraida la sangre, y antes de retirarse de la cama del paciente, el ATS debe etiquetar el tubo con el nombre del paciente, la fecha de extraccin y su firma. Para realizar los test pretransfusionales se pueden utilizar muestras de suero o de plasma. Sim embargo es preferible el suero ya que con el plasma se pueden formar pequeos coagulos de fibrina que pueden ser confundidos con aglutinaciones. Por otra parte, los Ac que se demuestran solamente a travs de la activacin del complemento no pueden ser detectados si se utiliza plasma. Las muestras de sangre se deben recoger sobre EDTA o citrato, y no deben usarse muestras hemolizadas. Los test de compatibilidad deben ser realizados con muestras de sangre: Recogidas en las 48 horas anteriores a la transfusin. Cuando el paciente ha sido transfundido. Cuando la paciente ha estado embarazada en los tres meses precedentes. Cuando su historial transfusional no est disponible, para identificar una incompatibilidad con un Ac desarrollado como respuesta anamnsica.

De todas formas, para evitar posibles errores, el limite de 48 horas se utiliza para todas las transfusiones. Las muestras del receptor y del donante (macarron de la bolsa) deben mantenerse entre 1-6 C, al menos durante 48 horas despues de cada transfusin. HEMA 9/32

Esto hace posible la repeticin de los test pretransfusionales u otros test adicionales si el paciente experimenta una respuesta no adecuada a la transfusin sangunea. En los test pretransfusionales se debe buscar la existencia de la ficha de transfusin en donde figura la historia transfusional del paciente en dicho centro. Los resultados actuales deben ser comparados con los anteriormente registrados y deben ser concordantes. Cualquier discrepancia debe resolverse antes de enviar la sangre. La determinacin del grupo ABO (hematico y srico) y Rh se debe hacer a todo receptor de hemoderivados. Si van a recibir: Sangre total, concentrados de hemates, concentrado de leucocitos, o concentrado de plaquetas, conteniendo ms de 5 ml de hemates, debe investigarse la presencia de Ac irregulares en el suero del receptor, y debe confirmarse la compatibilidad con los hemates del donante. En los productos que contienen plasma, existe un riesgo de hemolisis de los hemates del receptor, por lo que estos hemates deben ser compatibles con el plasma del donante: AB--->A, AB--->B, AB--->O, A--->O, B--->O. Por componentes: Sangre total: Debe ser identica a la del receptor. Concentrado de hematies: Debe ser compatible con el plasma del receptor. Concentrado de leucocitos: Debe ser compatible con el plasma del receptor. Plasma fresco congelado: Debe ser compatible con los hemates del receptor. Concentrado de plaquetas: Todos los grupos son aceptables, aunque son preferibles componentes compatibles con los hemates del receptor. Crioprecipitado: Todos los grupos son aceptables. La sangre Rh + debe ser reservada para individuos Rh+. Mientras que la sangre Rh- debe ser para receptores Rh-.

** Siempre que sea posible los pacientes deben recibir componentes sanguneos de su propio grupo. Cuando no es posible se pueden utilizar componentes de grupos alternativos. Si el componente tiene un elevado N de hemates, las clulas del donante deben ser ABO compatibles con el plasma del receptor: O--->A, O--->B, O--->AB, A--->AB, B--->AB.

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