UNMSM Facultad de Ciencias Biológicas

Curso de BIOQUIMICA

CICLO DE KREBS y su
Regulación
Ciclo del Glioxilato

Mg. Edith Rodríguez

CICLO DE KREBS
 Se adapta del adenosín trifosfato del cysteamine y
de la vitamina B5.

Dipeptido (alanina unido acido dihidroximetilbutirico. Quimicamente es

un thiol y puede reaccionar con ácidos carboxílico, Es portador de
grupo acilo. Su molécula consta de ac. Pantoténico
(vitamina B5), adenosin difosfato y cisteamina . Si la
coenzima lleva el grupo acetilo : acetilCoA, No lleva HSCoA
Mecanismo Acción de la Piruvato deshidrogenasa
 1.- REGULACIÓN DEL COMPLEJO Piruvato deshidrogenasa.

Esta es una reacción crucial en el metabolismo energético puesto que es

esencialmente irreversible y supone la única entrada al metabolismo aerobio.

La regulación se lleva a cabo de dos formas diferentes:

1.- Mediante inhibición por producto (NADH y Acetil-CoA).
2.- Mediante modificación covalente de la piruvato deshidrogenasa (E1).
1935 Szent-Gyorgyi : trabajó con músculo de alas de
pichon con mitocondrias intactas demostró Respiración
Celular(consumo de oxígeno) , era estimulada por ácidos
dicarboxílicos. Demostró la presencia de succinatoDH así
también su inhibidor: malonato.

Alemanes Knoop y Martinus estudiaron las etapas

intermedias de oxidación de citrato : Ac. Cítrico, aconítico,
isocítrico, 2oxoglutarato, succínico.

Hans Krebs : Ác. Tri y dicarboxílicos relaciona con la

combustion de los alimentos y “ el ác. Oxalacético junto
con otra sustancia podrían combinarse para la síntesis de
citrato.1937 carta a Editor Nature, resumían: evidencia de
una secuencia cíclica de reacciones que explican la
oxidación completa de una triosa derivada de la
glucólisis”. Manuscrito envió a la revista Lancet.
Inhibida por su producto que compite con
oxalacetato
 Aconitasa , tiene en su molécula Fe+2 y requiere de glutation
( GSH) para su actividad. Diferencia los grupos carbonilos del citrato
uniéndolos por 3 puntos. y deshidrata siempre por la molécula
procente del oxalacetato.
Es ferrosulfoproteína y puede ser inhibida por la fluoroacetato
(raticida) dando fluorcitrato

Complejo aconitasa y metilisotrato

 2 oxoglutarato

ATP(-),ADP (-)
gma
ISOCITRATO DESHIDROGENASA
Enzima alostérica, de PM 380 kD, formada 8
subunidades.
Requiere de Mn2+ y Mg2+.
Complejo Enzimático αKetoglutarato Deshidrogenasa
ma
La enzima S uccinil sintetasa pertenece a
la clase LIGASA

Enzima que actúa en el ciclo del

ácido cítrico uniéndose al succinil-
CoA por medio de la incorporación
de un fosfato inorgánico. Se forma
un producto intermedio, el succinil-
fosfato y se libera la coenzima A.
Enzima con 4 cadenas polipeptídicas
PM = 400kDa
RENDIMIENTO ENERGÉTICO DEL ACIDO
CITRICO
Por cada molécula de acetil CoA que entra al ciclo se forma 12 ATP:

Isocitrato---- ketoglutarato 1NADH 3 ATP (c. respiratoria)

2 ketoglutarato---- succinilCoA 1NADH 3 ATP (c.respiratoria)
SuccinilCoA ----- succinato 1 GTP 1 ATP (Transferencia d)
Succinato ----- fumarato 1 FADH 2 ATP (c. respiratoria)
Malato ----- oxalacetato 1 NADH 3 ATP (c. respiratoria)

12 ATP son equivalentes a 87,6 (12x7,3kcal)

3 ATP proviene de formación acetilCoA
 REGULACION DE LAS ENZIMAS DEL CICLO DE KREBS

G0' G
Reacción Enzima
(kcal/mol) (kcal/mol)
1 Citrato sintasa - 7.7 Negativo
2 Aconitasa + 1.5 ~0
3 Isocitrato deshidrogenasa - 5.0 Negativo
4 Complejo -cetoglutarato deshidrogenasa - 7.9 Negativo
5 Succinil-CoA sintetasa - 0.7 ~0
6 Succinato deshidrogenasa + 1.4 ~0
7 Fumarasa + 0.8 ~0

8 Malato deshidrogenasa

Tres son las enzimas que trabajan fuera del equilibrio:

Citrato sintasa, Isocitrato DH y αcetoglutarato Deshidrogernasa.
Son pues las etapas limitantes de la velocidad del ciclo.
 En el ciclo del ácido cítrico la regulación de las etapas limitantes NO
tiene lugar mediante elaborados procesos alostéricos sino por tres
sistemas mucho más simples:
1.- Disponibilidad de los sustratos.
2.- Inhibición por producto de la reacción.
3.- Inhibición competitiva por ciertos intermediarios del ciclo.

El flujo metabólico del ciclo del ácido cítrico es proporcional al consumo de

oxígeno.

Puesto que el consumo de oxígeno, la reoxidación del NADH y la síntesis de ATP

están absolutamente relacionadas, la regulación del ciclo dependerá de los
mecanismos que controlen la producción de NADH.

Los reguladores más importantes son Acetil-CoA, oxalacetato y NADH.

 1) Regulación de la citrato sintasa

Si se precisa una mayor producción de energía, se incrementa el consumo de O 2

y la [NADH] mitocondrial descenderá y se incrementará la [oxalacetato], la
cual estimulará la reacción catalizada por la citrato sintasa. Altas [citrato] y
[NADH] inhiben esta enzima. Succinil-CoA compite por al enzima y la inhibe.

2) Regulación de la isocitrato deshidrogenasa

El uso del citrato se controla por la isocitrato deshidrogenasa, que es

inhibida por NADH, ya que la aconitasa opera en el equilibrio.
ATP y NADH son inhibidores de la enzima.
El Ca2+ es un activador.
Estudios in vitro han encontrado dos efectores alostéricos de esta enzima:
ADP como activador y ATP como inhibidor

3) Regulación de la a-cetoglutarato deshidrogenasa

Es inhibida por NADH, ATP y sucinil-CoA.

También en este caso Ca2+ es un activador.
Vías que usan intermediarios del CK son llamas reacciones catapleroticas sirve
para : biosíntesis de Glucosa (usa malato que ha sido transportado al citosol a
través de la membrana mitocondrial , biosíntesis de lípidos ; biosíntesis de
aminoácidos y porfirinas.
REACCIONES ANAPLEROTICAS

Un aumento súbito de piruvato a partir de

glucosa ó de acetilCoA a partir de los ácidos
grasos (ejercicio brusco o estrés nervioso) puede
generar limitación de la entrada al ciclo Krebs
por insuficiente disponibilidad de oxalacetato
para la síntesis de citrato. Reacciones auxiliares
del ciclo ANAPLERÖTICAS (reposición de
intermediarios del ciclo K. y evitan tal situación:
las catalizadas por la piruvato carboxilasa
(gluconeogénesis) fosfoenolpiruvato
carboxiquinasa y por la malato DH.
 PAPEL DEL CICLO DE KREBS EN EL ANABOLISMO
Y REACCIONES ANAPLERÓTICAS (DE RELLENO)

aminoacidos
aminoacidos
 CICLO DEL GLIOXILATO

En muchas bacterias bacterias y plantas que se desarrollan en acetato u

otros compuestos rinden acetil CoA. Usan la vía metabólica que
convierten las unidades acetilo en unidades de 4C (succinato) para
producir energía y para sus procesos de biosíntesis.
NO OCURRE DESCARBOXILACIONES, dos moléculas de acetil CoA
en vez de una, entran al ciclo en cada vuelta.
Isocitrato por acción de la isocitrato liasa se transforma en succinato y
glioxilato, éste se condensa con acetilCoA para formar malato por acción
d e malato sintasa; malato sale al citosol que por accion de
deshidrogenasa malica se convierte en oxalacetato y es usado en la
gluconeogenesis. El succinato es transferido a mitocondria donde por
reacciones del CK se convierte en oxalacetato y por transaminación con
Glutamato se convierte en aspartato el cual e ingresa al glioxisoma
para transformarse en oxalacetato.