Introduccion:

Vamos a suponer que les damos una molécula de glucosa a ti y una a Lactobacillus
acidophilus, la amigable bacteria que convierte la leche en yogur. ¿Qué harían tú y la
bacteria con sus respectivas moléculas de glucosa?

En general, el metabolismo de la glucosa en una de tus células es muy diferente al

metabolismo de Lactobacillus; para más información, mira el artículo sobre
fermentación. Sin embargo, los primeros pasos serían los mismos en ambos casos:
tanto tú como la bacteria deberán romper en dos la molécula de glucosa mediante la
glucólisis .

La glucólisis es una serie de reacciones que extraen energía de la glucosa al romperla

en dos moléculas de tres carbonos llamadas piruvato. La glucólisis es una vía
metabólica ancestral o sea, que su evolución ocurrió hace mucho tiempo y se
encuentra en la gran mayoría de los organismos vivos hoy en día.

En los organismos que realizan respiración celular, la glucólisis es la primera etapa de

este proceso. Sin embargo, la glucólisis no requiere de oxígeno, por lo que muchos
organismos anaerobios organismos que no utilizan oxígeno también tienen esta vía.

La glucólisis es el nombre que recibe el metabolismo anaerobio de la glucosa. Este

proceso suministra una fuente de energía rápida, ideal para periodos de ejercicios
cortos e intensos. También puede definirse como la secuencia de reacciones que
convierte una molécula de glucosa en dos moléculas de piruvato, con la producción
neta concomitante (o asociada si lo prefieres) de dos moléculas de ATP. Es un
proceso anaerobio, es decir, que no requiere de oxígeno (O2) fenómeno que es
debido a que apareció en la evolución antes de que en la atmósfera reinara éste.

El piruvato producido en la glucólisis, puede convertirse en lactato mediante la

fermentación láctica o en etanol en la fermentación alcohólica. En presencia de
oxígeno (condiciones aeróbias) el piruvato puede oxidarse en CO2 generando una
cantidad de energía notable.

Por otro lado, la glucosa, la molécula necesaria para que arranque la glucogénesis,
puede obtenerse a partir de piruvato y ácido láctico mediante otra ruta: la
gluconeogénsis.
 OBJETIVOS

 Explicar que es el ciclo de Krebs.

 Comprender la importancia de la función que

desempeñan la glucolisis en la célula.

 Conocer su rendimiento energético y aprender las

funciones de la glucolisis.
 CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO (O CICLO DE KREBS)

El ciclo del ácido cítrico es el modo habitual de degradación oxidativa en organismos

eucariontes y procariontes. También conocido como ciclo de los ácidos tricarboxílicos y ciclo
de Krebs, es el punto central del metabolismo. A través de su estudio se explican los procesos
más importantes de la oxidación de carbohidratos, ácidos grasos y aminoácidos y se generan
numerosos precursores biosintéticos. Por lo tanto se trata de una ruta metabólica anfibólica.

El ciclo consiste en una serie de 8 reacciones, donde se oxidan el grupo acetilo, de

Acetil-CoA a dos moléculas de CO2. De las 8 reacciones, 4 son oxidaciones, en las cuales la
energía es eficientemente conservada, en forma de coenzimas reducidas, NADH Y FADH2, para
usarla a posteriori en la producción de ATP. Durante el ciclo hay 8 enzimas involucradas y al
final por cada molécula de Acetil-CoA se generan 3 moléculas de NADH, una de FADH2 y una
de GTP.

A continuación detallaremos las reacciones del ciclo de Krebs partiendo de la condensación del
Acetil-CoA con el Oxalacetato:

Reacción 1: Formación de citrato.

 La primera reacción del ciclo es la condensación del Acetil-CoA con Oxalacetato (4
Carbonos) por acción de la citrato sintasa para producir Citrato (6 Carbonos). En esta etapa el
grupo metilo del Acetil-CoA se une al carbonilo del Oxalacetado (C2), formando el
intermediario Citril-CoA, que inmediatamente se hidroliza para dar Citrato y CoA libre (que
puede formar más Acetil-CoA). La hidrólisis del enlace tioester de alta energía, es fuertemente
exergónica, por lo tanto esta reacción es irreversible. Que esta reacción posea un ∆G muy
negativo (o sea, que sea altamente favorable e irreversible) es de suma importancia para el
funcionamiento del ciclo, como veremos más adelante, ya que mantiene bajos los niveles de
Oxalacetato.

Reacción 2: Isomerización del citrato.

Los siguientes dos pasos del ciclo implican reestructurar el citrato a un isómero que se
oxide con mayor facilidad. La aconitasa convierte el alcohol terciario en uno secundario
(oxidable), para ello, primero se deshidrata generando un doble enlace cis y luego de hidrata
con un grupo alcohol en el carbono 2.

Reacción 3: Primera descarboxilación oxidativa del isocitrato

 En esta primera oxidación del isocitrato (recordar que posee 6 Carbonos) se
genera la primera molécula CO2 y α-cetoglutarato (que posee 5 Carbonos) por acción de la
isocitrato deshidrogenasa. Esta enzima tiene como cofactor a NAD+ que actúa como aceptor
de los electrones de alta energía generados en esta etapa para dar NADH. Esta es la Segunda
reacción irreversible del ciclo y la principal reguladora del mismo.

Reacción 4: Segunda descarboxilación oxidativa del α-cetoglutarato

A través del complejo enzimático α-cetoglutarato deshidrogenasa (formada por 3

enzimas análogas a las del complejo enzimático piruvato deshidrogenasa, y que requieren los
mismos cofactores TTP, NAD+, FAD, ácido lipoico y Co-A), se produce la segunda
descarboxilación del α-cetoglutarato para dar succinil-CoA (el succinato posee 4 Carbonos) con
la formación de una nueva molécula de NADH a partir de NAD+. Al igual que en el Acetil-CoA,
en el succinil-CoA el enlace tioester formado es de alta energía.

Reacción 5: Formación de GTP a partir de Succinil-CoA

En esta etapa la energía del enlace tioester del Succinil-CoA se aprovecha para llevar a
cabo la fosforilación a nivel de sustrato de GDP y generar GTP, Succinato y regenerar la
Coenzima A. La enzima que actúa en esta etapa es la Succinil-CoA Sintetasa. De aquí en mas no
se producirán mas descarboxilación, solo resta oxidar el succinato hasta oxalacetato y reiniciar
el ciclo.
Obtener GTP es equivalente a obtener ATP:

Reacción 6: Oxidación del Succinato a Fumarato

La Succinato deshidrogenasa es la única enzima que no se encuentra en la matriz

mitocondrial, sino que es una enzima integral de la membrana interna de la mitocondria. Esta
forma parte de la cadena de transporte de electrones. Esta oxidación implica la formación de
un doble enlace, proceso que genera electrones de alta energía, pero de energía menor que
los que se requieren para reducir al NAD+, por ello esta enzima emplea como cofactor al FAD
para obtener FADH2. Ya que la enzima se halla asociada a la membrana interna mitocondrial,
los electrones obtenidos pasan directamente a la cadena respiratoria, proceso metabólico que
veremos más adelante, para la obtención de ATP.

Como la mayoría de la enzimas, la succinato deshidrogenasa en una enzima estereoespecífica

que solo cataliza la formación del isómero trans (fumarato) y no el cis (maleato).

Reacción 7: Hidratación del Fumarato

 La Fumarasa cataliza la hidratación del doble enlace del fumarato para obtener malato.
La Fumarasa, igual que la succinato deshidrogenasa también estereoespecífica, solo cataliza la
hidrólisis del fumarato (no maleato) para formar el isómero L-Malato.

Reacción 8: Oxidación de malato a oxalacetato

Es la última reacción del ciclo de Krebs e implica la última oxidación para obtener el
oxalacetato a partir de Malato con la reducción de una molécula más de NAD+ por acción de la
enzima Malato deshidrogenasa. Aunque la reacción es poco favorable, solo exergonica a muy
bajas concentraciones de Oxalacetato, recordar que la siguiente reacción (reacción 1 del ciclo)
es una reacción irreversible, y muy exergonica, por lo que el poco oxalacetato que se produce
es inmediatamente captado por la citrato sintasa para producir la condensación con el Acetil-
CoA.

De esta forma se mantiene bajas las concentraciones de oxalacetato (alrededor de 10-

6M), la reacción de deshidrogenacion del malato se hace termodinámicamente posible y el
ciclo avanza. (Ver Anexo II) A lo largo de una vuelta del ciclo de Krebs vemos como el grupo
acetilo de dos carbonos ingresa el ciclo, combinándose con oxalacetato, y como resultado se
liberan a lo largo del ciclo 2 carbonos en forma de CO2. Si embargo, tener en cuenta que estos
2 carbonos que se liberan no corresponden al acetilo, si no que son los pertenecientes al
oxalacetato. Así los dos carbonos del acetilo formaran parte de la nueva molécula del
oxalacetato generada, que serán oxidados y liberados en las subsiguientes vueltas del ciclo.

Como balance general del ciclo, tenemos que por cada molécula de Acetil-CoA que
ingresa al ciclo se generan una molécula de GTP, y tres de NADH y una FADH2 que luego en la
cadena respiratoria cederán sus electrones para la formación de mas moléculas de ATP.
 Regulación del ciclo de Krebs
El ciclo del ácido cítrico presenta 3 puntos de regulación, en las enzimas que catalizan
las reacciones irreversibles

• Citrato sintasa: se encuentra inhibida por su producto, citrato, por otro metabolito
intermediario del ciclo, succinyl-CoA y por los productos del ciclo NADH y ATP.
• Isocitrato deshidrogenasa: esta enzima se encuentra regulada por el estado energético
de la célula, así cuando la célula presenta un estado de alta energía, o sea que las
relaciones ATP/ADP y NADH/NAD+ son altas la actividad de la enzima disminuye,
mientras que cuando el estado energético de la célula es bajo, o sea que estas
relaciones son bajas, la enzima se encuentra activada.
• α-cetoglutarato deshidrogenasa: Esta enzima se halla inhibida por su producto,
succinil-CoA. También se regula por el estado energético de la célula, por la relación
ATP/ADP y NADH/NAD+, como la Isocitrato deshidrogenasa.

Carácter anfibólico del ciclo de Krebs

 Como ya se menciono, el ciclo del acido cítrico, a demás de ser una ruta catabólica,
aporta muchos de los intermediarios de diversas rutas biosintéticas, es decir que también es
una via anabólica. Las reacciones catapleroticas son aquellas que emplean intermediarios del
ciclo de Krebs como precursores biosintéticos. Por ejemplo el α-cetoglutarato y el y el
oxalacetato son precursores de los aminoácidos aspartato y glutamato por simple
transaminación. A partir de estos dos aminoácidos se generan otros aminoácidos así como
nucleótidos puricos y pirimidicos. El oxalacetato puede convertirse en glucosa en la
gluconeogénesis y el succinil-CoA es un intermediario en la síntesis del anillo porfirinico del
grupo hemo. Así como los intermediarios del ciclo son consumidos como precursores
biosintenticos de muchas rutas metabolicas, se requiere su biosíntesis para evitar el
vaciamiento del ciclo y mantener el equilibrio. Las reacciones que producen los intermediarios
del ciclo de Krebs se denominan reacciones anapleroticas. A continuación de muestran las
reacciones anapleroticas más comunes.
 CLUGOLISIS
Es la ruta metabólica encargada de oxidar la glucosa con la finalidad de obtener energía
para la célula. Consiste en 10 reacciones enzimáticas consecutivas que convierten a la
glucosa en dos moléculas de piruvato, el cual es capaz de seguir otras vías metabólicas y
así continuar entregando energía al organismo. Esta ruta se realiza tanto en ausencia
como presencia de oxígeno, definido como proceso anaeróbico en este caso.
α-D-glucosa + 2NAD+ + 2ADP + 2Pi ==> 2(piruvato) + 2NADH + 2ATP + 2H+ +
2H2O

FUNCIONES DE LA GLUCOLISIS:
 La generación de moléculas de alta energía (ATP y NADH) como fuente de
energía celular en procesos de respiración aeróbica (presencia de oxígeno) y
fermentación (ausencia de oxígeno).
 La generación de piruvato que pasará al ciclo de Krebs, como parte de la
respiración aeróbica.
 La producción de intermediarios de 6 y 3 carbonos que pueden ser utilizados en
otros procesos celulares.

Vision general:
Durante la glucólisis se obtiene un rendimiento neto de dos moléculas de ATP ;
el ATP puede ser usado como fuente de energía para realizar trabajo
metabólico, mientras que el NADH puede tener diferentes destinos. Puede
usarse como fuente de poder reductor en reacciones anabólicas; si hay
oxígeno, puede oxidarse en la cadena respiratoria, obteniéndose 5 ATP (2.5
por cada NADH); si no hay dioxígeno, se usa para reducir el piruvato a lactato
(fermentación láctica), o a CO2 y etanol (fermentación alcohólica), sin
obtención adicional de energía.
La glucólisis es la forma más rápida de conseguir energía para una célula y, en
el metabolismo de carbohidratos, generalmente es la primera vía a la cual se
recurre. Se encuentra estructurada en 10 reacciones enzimáticas que permiten
la transformación de una molécula de glucosa a dos moléculas de piruvato
mediante un proceso catabólico.
La glucólisis es una de las vías más estudiadas, y generalmente se encuentra
dividida en dos fases: la primera, de gasto de energía y la segunda fase, de
obtención de energía.
La primera fase consiste en transformar una molécula de glucosa en dos
moléculas de gliceraldehído (una molécula de baja energía) mediante el uso de
2 ATP. Esto permite duplicar los resultados de la segunda fase de obtención
energética.
En la segunda fase, el gliceraldehído se transforma en un compuesto de alta
energía, cuya hidrólisis genera una molécula de ATP, y como se generaron 2
moléculas de gliceraldehído, se obtienen en realidad dos moléculas de ATP.
Esta obtención de energía se logra mediante el acoplamiento de una reacción
fuertemente exergónica después de una levemente endergónica. Este
acoplamiento ocurre una vez más en esta fase, generando dos moléculas de
piruvato. De esta manera, en la segunda fase se obtienen 4 moléculas de ATP.
Fase de gasto de energía (ATP)
Esta primera fase de la glucólisis consiste en transformar una molécula de
glucosa en dos moléculas de gliceraldehído.

1er paso: HEXOQUINASA

La primera reacción de la glucólisis es la fosforilación de la glucosa, para activarla
(aumentar su energía) y así poder utilizarla en otros procesos cuando sea necesario.
Esta activación ocurre por la transferencia de un grupo fosfato del ATP, una reacción
catalizada por la enzima hexoquinasa, la cual puede fosforilar (añadir un grupo fosfato)
a moléculas similares a la glucosa, como la fructosa y manosa. Las ventajas de
fosforilar la glucosa son 2: La primera es hacer de la glucosa un metabolito más
reactivo, mencionado anteriormente, y la segunda ventaja es que la glucosa-6-fosfato
no puede cruzar la membrana celular -a diferencia de la glucosa- ya que la carga
negativa que le proporciona el grupo fosfato a la molécula hace que sea más difícil
atravesarla. De esta forma se evita la pérdida de sustrato energético para la célula.
Técnicamente hablando, la hexoquinasa solo fosforila las D-hexosas, y utiliza de
sustrato MgATP2+, ya que este catión permite que el último fosfato del ATP (fosfato
gamma, γ-P o Pγ) sea un blanco más fácil para el ataque nucleofílico que realiza el
grupo hidroxilo (OH) del sexto carbono de la glucosa, lo que es posible debido al Mg2+
que apantalla las cargas de los otros dos fosfatos.
Esta reacción posee un ΔG negativo, y por tanto se trata de una reacción en la que se
pierde energía en forma de calor. En numerosas bacterias esta reacción está acoplada
a la última reacción de la glucólisis (de fosfoenolpiruvato a piruvato) para poder
aprovechar la energía sobrante de la reacción: el fosfato del fosfoenolpiruvato se
transfiere de una a otra proteína de un sistema de transporte fosfotransferasa, y en
última instancia, el fosfato pasará a una molécula de glucosa que es tomada del
exterior de la célula y liberada en forma de G6P en el interior celular. Se trata por tanto
de acoplar la primera y la última reacción de esta vía y usar el excedente de energía
para realizar un tipo de transporte a través de membrana denominado translocación de
grupo.

2do paso: Glucosa-6-P isomerasa

Este es un paso importante, puesto que aquí se define la geometría molecular que
afectará los dos pasos críticos en la glucólisis: El próximo paso, que agregará un grupo
fosfato al producto de esta reacción, y el paso 4, cuando se creen dos moléculas de
gliceraldehido que finalmente serán las precursoras del piruvato.

3er paso: Fosfofructoquinasa

Fosforilación de la fructosa 6-fosfato en el carbono 1, con gasto de un ATP, a través
de la enzima fosfofructoquinasa-1 (PFK1). También este fosfato tendrá una baja
energía de hidrólisis. Por el mismo motivo que en la primera reacción, el proceso es
irreversible. El nuevo producto se denominará fructosa-1,6-bisfosfato. La
irreversibilidad es importante, ya que la hace ser el punto de control de la glucólisis.
Como hay otros sustratos aparte de la glucosa que entran en la glucólisis, el punto de
control no está colocado en la primera reacción, sino en esta. La fosfofructoquinasa
tiene centros alostéricos, sensibles a las concentraciones de intermediarios como
citrato y ácidos grasos. Liberando una enzima llamada fosfructocinasa-2 que fosforila
en el carbono 2 y regula la reacción

4to paso: Aldolasa

La enzima aldolasa (fructosa-1,6-bisfosfato aldolasa), mediante una condensación

aldólica reversible, rompe la fructosa-1,6-bisfosfato en dos moléculas de tres carbonos
(triosas): dihidroxiacetona fosfato y gliceraldehído-3-fosfato. Existen dos tipos de
aldolasa, que difieren tanto en el tipo de organismos donde se expresan, como en los
intermediarios de reacción.
Esta reacción tiene una energía libre (ΔG) entre 20 a 25 kJ/mol, por lo tanto en
condiciones estándar no ocurre de manera espontánea. Sin embargo, en condiciones
intracelulares la energía libre es pequeña debido a la baja concentración de los
sustratos, lo que permite que esta reacción sea reversible.

5to paso: Triosa fosfato isomerasa

Puesto que solo el gliceraldehído-3-fosfato puede seguir los pasos restantes de la
glucólisis, la otra molécula generada por la reacción anterior (dihidroxiacetona-fosfato)
es isomerizada (convertida) en gliceraldehído-3-fosfato. Esta reacción posee una
energía libre en condiciones estándar positiva, lo cual implicaría un proceso no
favorecido, sin embargo al igual que para la reacción 4, considerando las
concentraciones intracelulares reales del reactivo y el producto, se encuentra que la
energía libre total es negativa, por lo que la dirección favorecida es hacia la formación
de G3P.
Este es el último paso de la "fase de gasto de energía". Solo se ha consumido ATP en
el primer paso (hexoquinasa) y el tercer paso (fosfofructoquinasa-1). Cabe recordar
que el 4.º paso (aldolasa) genera una molécula de gliceraldehído-3-fosfato, mientras
que el 5.º paso genera una segunda molécula de este. De aquí en adelante, las
reacciones a seguir ocurrirán dos veces, debido a las 2 moléculas de gliceraldehído
generadas de esta fase. Hasta esta reacción hay intervención de energía (ATP).

Regulacion:
Efecto pasteur: El efecto Pasteur es la visualización del poder que posee el O2 en
la fermentación mediada por levadura, que fue descubierto por Luis Pasteur al
observar la relación entre la tasa de fermentación y la existencia de aire. Él determinó
que estas tenían una relación inversa, y además observó que en condiciones
aeróbicas, las células de levadura aumentaban y la fermentación disminuía.
De esta manera, el efecto Pasteur fue una de las primeras observaciones que alguien
realizó al proceso de la glucólisis de manera indirecta, pero observando que el
metabolismo primario de glucosa se podía realizar con presencia o ausencia de
oxígeno, y que en este último ocurre la fermentación alcohólica.

Reglacion de la actividad enzimática:

La glucólisis se regula enzimáticamente en los tres puntos irreversibles de esta ruta,
esto es, en la primera reacción (G → G-6P), por medio de la hexoquinasa; en la
tercera reacción (F-6P → F-1,6-BP) por medio de la PFK1 y en el último paso (PEP →
Piruvato) por la piruvato quinasa.
La hexoquinasa es un punto de regulación poco importante, ya que se inhibe cuando
hay mucho G-6P en músculo. Es un punto poco importante ya que el G-6P se utiliza
para otras vías.
La fosfofructoquinasa-1 es la enzima principal de la regulación de la glucólisis, actúa
como una llave de agua, si está activa cataliza muchas reacciones y se obtiene más
fructosa-1,6-bisfosfato, lo que permitirá a las enzimas siguientes transformar mucho
piruvato. Si está inhibida, se obtienen bajas concentraciones de producto y por lo tanto
se obtiene poco piruvato. Esta enzima es controlada por regulación alostérica: por un
lado se activa por concentraciones elevadas de ADP y AMP, inhibiéndose en
abundancia de ATP y citrato, y por otro se activa en presencia de un regulador
generado por la PFK2 que es la fructosa-2,6-bisfosfato (F-2,6-BP), que no es un
metabolito ni de la glucólisis ni de la gluconeogénesis, sino un regulador de ambas
vías que refleja el nivel de glucagón en sangre.
La lógica de la inhibición y activación son las siguientes:

 ATP: inhibe esta enzima pues si hay una alta concentración de ATP entonces
la célula no necesita generar más.
 Citrato: Si la concentración de citrato es alta el Ciclo de Krebs va más despacio
de lo que el sustrato (acetil-CoA) llega para degradarse, y la concentración de
glucosa será más alta. En el Ciclo de Krebs se produce mucho NADH y
FADH2, para que funcionen se han de reoxidar en la cadena de transporte
electrónico creando gradiente de protones, si el gradiente no se gasta los
coenzimas no se reoxidan y el Ciclo de Krebs se para.
 AMP, ADP: la alta concentración de estas moléculas implica que hay una
carencia de ATP, por lo que es necesario realizar glucólisis, para generar
piruvato y energía.
La piruvatoquinasa se regula distintamente según el tejido en el que trabaje, pero en
hígado se inhibe en presencia de ATP y Acetil Coenzima-A (Acetil-CoA), y se activa
gracias de nuevo ante la F-1,6-BP y la concentración de fosfoenolpiruvato.

Regulación hormonal:
Al aumentar la glucosa en la sangre, después de una comida, las células beta del
páncreas estimulan la producción de insulina, y esta a su vez aumenta la actividad de
la glucoquinasa en los hepatocitos.
Las concentraciones altas de glucagon y las bajas de insulina disminuyen la
concentración intracelular de fructosa-1,6-bisfosfato. Esto trae por consecuencia la
disminución de la glucólisis y el aumento de la gluconeogenésis.

Regulacion del sustrato:

La membrana plasmática de las células es impermeable a la glucosa. Para llevarla
dentro de ella utiliza transportadores especiales llamados GLUT, de los cuales hay
diferentes tipos y algunos especializados para cada célula.
 CONCLUSIONES
 Se concluye que el ciclo de ácido cítrico o ciclo de
Krebs es un procedimiento bioquímico esencial para
la vida ya que influye en la respiración celular y de
allí genera energía útil para demás procesos de las
diferentes organelos de la célula y su función
determinada procedente a esto va conectado a todas
aquellas funciones macro del ser humano.

 La glucolisis es la vía metabólica en donde a partir de

glucosa se produce piruvato y es una vía central en el
metabolismo.

 En la glucolisis se consume 2ATP y se producen

4ATPs y 2NADH por cada molécula de glucosa.
 BIBLIOGRAFÍA

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Volume 13: Citric Acid Cycle. Boston: Academic
Press. ISBN 0-12-181870-5.

 Krebs HA, Weitzman PDJ (1987). Krebs' citric acid

cycle: half a century and still turning. Londres:
Biochemical Society. ISBN 0-904498-22-0.

 Wagner, Andreas (2014). Arrival of the fittest (first ed.).

New York: Penguin group. p 100.