CICLO DE KREBS O ACIDOS TRICARBOXILICOS

Introduccin El ciclo del cido ctrico es la va central del metabolismo aerobio: es la va oxidativa final en el catabolismo de los carbohidratos, cidos grasos y aminocidos.

Provee ms del 90% de la energa del cuerpo. Se lleva a cabo en las mitocondrias. Es una fuente importante de intermediarios de vas biosintticas.

Ciclo de Krebs
Etapas:
1.-Produccin Coenzima-A. de Acetil

2.-Oxidacin de la Acetil Coenzima-A.

3.-Transferencia de electrones y sntesis de ATP (fosforilacin Oxidativa).

 En condiciones aerobias, el piruvato ingresa a la matriz mitocondrial y es convertido a Acetil-Coenzima A (AcCoA) para llevar estos Carbonos a su estado de oxidacin total en el ciclo del cido ctrico.

 Las ocho enzimas que catalizan la oxidacin de Acetil-CoA a CO2 conservan la energa liberada en forma de equivalentes de reduccin NADH, FADH y GTP, los equivalentes de reduccin NADH y FADH son transferidos a O2 para producir H2O y ATP en la fosforilacin oxidativa.

Reaccin sumaria
Acetil CoA + 2H2O + 3 NAD + FAD + GDP + Pi CoASH +2 CO2 + 2H + 3NADH + FADH2 + GTP

Acetil CoA

Diversas vitaminas del complejo B estn envueltas en la formacin de acetil-CoA.

 Este compuesto representa el enlace principal que integra el metabolismo de los carbohidratos, grasas y protenas, puesto que la acetil-CoA puede ser formada tambin de cidos grasos y ciertos aminocidos.

Formacin de acetil-CoA
Oxidacin del piruvato (3-C) + NAD+ ------> Acetil-CoA (2-C) + CO2 + NADH

La oxidacin del piruvato a Ac-CoA es catalizada por el complejo multienzimtico de la piruvato deshidrogenasa (PDH), el proceso que es muy complicado:

Reaccin general catalizada por el complejo Piruvato deshidrogenasa. En esta reaccin participan 5 coenzimas y 3 enzimas que conforman el complejo enzimtico.

Coenzima A (CoA). Un grupo OH del cido pantotnico se encuentra

unido a un residuo de ADP modificado, mediante un enlace ster fosfato, y su grupo carboxilo est unido a la -mercaptoetanolamina en un enlace amida. El grupo OH del C 3 del ADP tiene un grupo fosforilo que no se encuentra en el ADP. El grupo SH de la -mercaptoetanolamina forma un tioster con el acetato en la Acetil-CoA mostrada en azul.

Oxidacin del piruvato a acetil CoA

piruvato (3-C) + NAD+ -------> Acetil-CoA (2-C) + CO2 + NADH

La oxidacin del piruvato a Ac-CoA es catalizada por el complejo multienzimtico de la piruvato deshidrogenasa (PDH), el proceso que es muy complicado:

Reaccin general catalizada por el complejo Piruvato deshidrogenasa. En esta reaccin participan 5 coenzimas y 3 enzimas que conforman el complejo enzimtico.

Oxaloacetato representa el combustible de carbohidratos necesario para mantener funcionando el ciclo energtico clave.

Ciclo de Krebs:
Por cada molcula de piruvato que se oxida en el ciclo se liberan 3 molculas de CO2: Una durante la formacin de acetilCoA Una por la descarboxilacin del isocitrato Una por la descarboxilacin del -ceto-glutarato.

Esquema del Ciclo de Krebs

Etapas del Ciclo de Krebs

Isomerizacin del citrato a isocitrato (6-C, tres grupos cidos )

La enzima citrato sintasa (enzima condensante) lleva a cabo una condensacin aldlica entre el metilo del Ac-CoA y el carbonilo del oxaloacetato, en la reaccin se hidroliza el tioster y se forma el CoA-SH (succinil-CoA).

La citrato sintasa en inhibida por succinil-CoA, ATP, NADPH, steres de CoA y cidos grasos de cadena larga (18C).

Conversin de Citrato a Isocitrato

La aconitasa cataliza la interconversin entre estos ismeros. La enzima contiene Fe(II) y necesita un tiol como cistena o glutatin (Glu-Cys-Gly) para efectuar la reaccin.

Oxidacin -------> alfa-cetoglutrico (5-C) + CO2 + NADH

Formacin del -cetoglutarato

Es una descarboxilacin oxidativa del isocitrato para formar -ceto(oxo)glutarato y la generacin de la primera molcula de CO2 y NADH del ciclo. La enzima que cataliza la reaccin es la isocitrato deshidrogenasa, que existe en dos isoformas:
Dependiente de NAD+ que slo se encuentra en mitocondria (Principal catalizador de esta va, necesita ADP como modulador positivo, asi como Mg2+) Dependiente de NADP+ que tambin est en citoplasma.(No es alostrica).

Formacin del Succinil-Co-A Es una oxidacin irreversible del -ceto (oxo)glutarato, proceso catalizado por el complejo de la -ceto(oxo)glutarato deshidrogenasa que consiste en la descarboxilacin oxidativa de un cetocido (-ceto(oxo)glutarato), liberando el segundo CO2 y NADH del ciclo del cido ctrico.

Oxidacin -------> succinil-CoA (4-C) + CO2 + NADH

Formacin del Succinato

Es una disociacin del succinil-CoA, la CoA no se pierde por simple hidrlisis, sino en una reaccin de conservacin de la energa con el difosfato de guanosina y fsforo inorgnico. La enzima es la succinil-CoA sintetasa (tambin llamada succinato tiocinasa), que sintetiza un enlace de alta energa en el GTP. Se ha encontrado que el mecanismo se lleva por la fosforilacin de la enzima en una histidina, el mecanismo de reaccin consiste de tres eventos:
1.- Succinil-CoA + Pi + Enzima (E) E-Succinil-P + CoA 2.- E-succinil-P E-P + succinato 3.- E-P + GDP E + GTP.

El GTP cede su P al ADP para formar ATP reaccin catalizada por la nuclesido difosfato cinasa, esta es una fosforilacin a nivel de sustrato como la que cataliza la piruvato cinasa en la gluclisis.

Fosforilacin a nivel de sustrato succinil-CoA (4-C) + GDP -------> succinato (4-C) + GTP

Nota: GTP con ADP se puede interconvertir en ATP)

Formacin del Fumarato La oxidacin del succinato es catalizada por la succinato deshidrogenasa, flavoprotena que contiene FAD unido covalentemente. Esta enzima est unida a la membrana interna mitocondrial, el FAD acta como un aceptor de hidrgenos en la reaccin.

1.

oxidacin -------> fumarato (4-C) + FADH2

Formacin del Fumarato La succinato deshidrogenasa es activada por succinato, fsforo inorgnico, ATP, y coenzima Q (CoQ) reducida. Por otra parte, es inhibida por oxaloacetato, su actividad es mucho mayor que las dems enzimas del ciclo y que las de la cadena respiratoria

Formacin del Malato La hidratacin reversible del fumarato a L-malato es catalizada por la fumarasa, que es una enzima hidratasa. Esta enzima es Inhibida por ATP, y es estereoespecfica para su substrato.

1. Conversion el fumarato en maleato, una nueva 2. oxidacin -------> oxalacetato (4-C) + NADH

Formacin del Oxalacetato

Es la ltima reaccin del ciclo. La enzima malato deshidrogenasa NAD+ dependiente cataliza la oxidacin del L-malato a oxaloacetato. Es una enzima estereoespecfica, se encuentran 2 isoformas en animales, una mitocondrial y otra citoplsmica.

PIRUVATO DESHIDROGENASA
El Acetil CoA es el sustrato para el ciclo del cido ctrico proviene del cido pirvico por piruvato deshidrogenasa un complejo multienzimtico que cataliza la descarboxilacion de piruvato: Piruvato + CoASH + NAD Acetil CoA + CO2 + NADH

PIRUVATO DESHIDROGENASA

E. Coli 60 polipptidos y MM 5 millones

 Las cinco reacciones catalizadas por el complejo requieren 5 cofactores diferentes los cuales son derivados de 5 vitaminas diferentes acido lipoico, tiamina pirofosfato, dinucleotido de flavina y adenina dinucleotido de adenina y coenzima A.

 La piruvato dehidrogenasa puede ser inhibida de dos formas: Regulacin alostrica Modificacin covalente

Regulacion alostrica E2 Transacetilasa E3 Dihidrolipoil dehidrogenasa

Modificacin covalente E1 Fosforilacion e inactivacion por PDH quinasa -Energia Mg+2 PDHfosfatasa activa E1

PIRUVATO DESCARBOXILASA Para que el ciclo de los cidos carboxlicos se lleve a cabo mas eficientemente es necesario que las cantidades de oxaloacetato y AcetilCoA deben estar balanceadas. Este balance se realiza por regulacin coordinada de las enzimas piruvato descarboxilada y piruvato deshidrogenasa

 La piruvato descarboxilasa es importante en la gluconeogenesis cuando la sntesis de oxaloacetato al inicio de la ruta es requerida para conversin de piruvato a fosfoenolpiruvato.

 Bajas concentraciones de Acetil-CoA se favorece la actividad de la piruvato deshidrogenasa. Altas concentraciones de Acetil-CoA favorece la actividad de la piruvato descarboxilasa.

CITRATO SINTETASA
La sntesis de citrato es el primer paso en el ciclo de Krebs este paso es catalizado por la enzima citrato sintetasa es un dmero. Cuando las molculas de oxaloacetato se unen a cada una de las subunidades idnticas de la enzima ocurre un cambio conformacional.

CITRATO SINTASA

(a)Forma abierta de una enzima sola; (b)Forma cerrada unida con oxalacetato (amarillo) y un anlogo estable del acetil CoA (rojo).

 Estos cambios crean sitios de unin para la Acetil-CoA y permite que la citrato sintetasa actu la fuerza para esta reaccin es la hidrlisis de enlaces tioester ricos en energa unidos a AcetilCoA.

RESULTADO FINAL Los productos finales del ciclo de Krebs son:

Produccin de adenosina de trifosfato (ATP). Se producen 36 molculas de ATP por cada mol de glucosa oxidado. Bixido de carbono (CO2). Agua (H2O).

SITIOS DE CONTROL Disponibilidad de sustrato. Inhibicin por producto. Piruvato deshidrogenasa sirve para controlar el suministro de Acetil- CoA.

El ciclo por si mismo es regulado

+ NADH menor transporte de electrones es una seal de que la clula esta en un estado de alta energa. El ciclo es inhibido por NADH, ADP y AMP los cuales son una seal de baja energa. Activan al ciclo isocictrato a-cetoglutarato y malato tienen alternativas metablicas en las grasas.

Reacciones anaplerticas
Existen ciclos intermediarios que por si mismos pueden ser reemplazados a partir de un numero de fuentes. Esos intercambios entre intermediarios dentro y fuera del ciclo son colectivamente conocidos como las reacciones anaplerticas. Este trmino es derivado del griego que significa llenar hasta arriba.

 Balance para una molcula de glucosa que se convierte en 2 piruvatos, luego en 2 AcetilCoA y luego a CO2 en la va el ciclo de los cidos tricarboxlicos , con todo el NADH y el FADH convertidos en ATP por la respiracin: 1 glucosa + 38 ADP + 38 ----> 6 CO2 + 38 ATP

 Nota: 2 de los NADH son formados en el citoplasma durante la gliclisis. Para ser transportados a la matriz mitocondrial para ser posteriormente oxidado por la cadena transportadora de electrones, tienen que pasar por medio de transporte activo al interior de la mitocondria, Esto "cuesta" 1 ATP por NADH. Por lo tanto el balance final resulta en 36 ATP por glucosa y no 38 ATP.

Ciclo del Glioxilato

El metabolismo en diferentes organismo puede variar en diferentes formas, las bacterias y las plantas pueden generar glucosa a partir de Acetil-CoA mientras que los animales no pueden .

 Muchas bacterias y plantas siguen el ciclo del glioxilato el cual es derivado anablico del ciclo de Krebs.

 La caracterstica esencial del ciclo del Glioxilato es que a partir del CO2 genera pasos del ciclo del Acido Ctrico, en lugar de Acetil CoA genera glioxilato del cual el oxaloacetato puede ser sintetizado

 Esta modificacin permite el crecimiento sobre compuestos como el acetato con rendimiento en Acetil-CoA.

Ciclo del glioxilato

Resumen:
Compuesto Piruvato Acetil-CoA Citrato Isocitrato -Cetoglutarato Succinil-CoA Succinato Fumarato Malato Enzima Piruvato deshidrogenasa Citrato cintetaza Aconitasa Isocitrato deshidrogenasa -Cetoglutarato deshidrogenasa Succinil-CoA sintetasa Succinato deshidrogenasa Fumarasa (hidratasa) Malato deshidrogenasa Producto final Acetil-Co-A Citrato Isocitrato -Cetoglutarato Succinil-CoA Succinato Fumarato Malato Oxalacetato