SEPARACIONES QUÍMICAS

UNIDAD 6
OTROS METODOS DE SEPARACIÓN

ING. HENRY ANTEZANA FERNÁNDEZ

2017
OTROS MÉTODOS DE SEPARACIÓN:
 CROMATOGRAFÍA DE FLUIDOS SUPERCRÍTICOS
• Es una cromatografía híbrida entre GC y HPLC, combina las
mejores características de ambas.
• Permite separación de grupo de compuestos que no pueden
analizarse con GC y/o HPLC, por ej.:

• no volátiles o termolábiles (no GC)

• Compuestos sin grupos funcionales que sean detectables por técnicas
espectroscópicas o electroquímicas útiles para HPLC
CROMATOGRAFÍA DE FLUIDOS SUPERCRÍTICOS

Propiedades de los fluidos supercríticos:

• Los fluidos supercríticos son los que se encuentran a temperaturas y
presiones superiores pero próximas a las punto crítico.
• Temp. Supercrítica: es la temp. por encima de la cual no puede existir
una fase líquida.
CROMATOGRAFÍA DE FLUIDOS SUPERCRÍTICOS

Propiedades de los fluidos supercríticos:

• Los fluidos supercríticos son comparables con valores que se manejan en

HPLC.
CROMATOGRAFÍA DE FLUIDOS SUPERCRÍTICOS

Variable Instrumentales y
Experimentales en SFC:
Existen 2 diferencias con
HPLC:
1. Requiere un horno de
columna termostatizado = GC
2. requiere restrictor o
dispositivo de contrapresión,
para mantener la presión en la
columna y convertir el efluente
de la columna en gas para su
ingreso al detector.
OTROS MÉTODOS DE SEPARACIÓN:
 CROMATOGRAFÍA DE FLUIDOS SUPERCRÍTICOS
• Fases estacionarias: columnas capilares ídem a las de relleno: sílice con
siloxanos. Películas de 0,05 a 1 um de 10 20 cm de largo de diám. internos
de 0,05-0,1 mm
• Fases móviles: CO2 (Tc=31ºC y Pc=72,9 atm), Etano, pentano, amoniaco,
diclofluorometano, etc.
• A mayores velocidades lineales se tiene alturas de plato 3 veces menores
entonces mejora eficiencia de columna
• Detectores: ionización de llama porq tiene respuesta universal a comp.
Orgánicos, sensible y sin problemas de manejo. MS se adaptan fácilmente.
Adsorción ultravioleta e infrarrojo, de emisión por fluorescencia, el
termoiónico y fotométrico de llama
OTROS MÉTODOS DE SEPARACIÓN:
 Aplicaciones de SFC:

• Productos naturales, drogas, alimentos, plaguicidas y herbicidas,

tensoactivos, polímeros, combustibles fósiles, explosivos, etc.
OTROS METODOS DE SEPARACION:
 ELECTROFÓRESIS CAPILAR:
• Especies cargadas (iones y part. Coloidales) se separan en función
a distinta velocidad de migración en un campo eléctrico.
OTROS METODOS DE SEPARACION:
 ELECTROFÓRESIS CAPILAR:
OTROS METODOS DE SEPARACION:
 ELECTROFÓRESIS CAPILAR:
• Las separaciones electroforéticas se originan por las diferentes
movilidades de los solutos, que son proporcionales a la carga del
soluto e inversamente proporcional a las fuerzas de friccion o
retraso que dependen de la forma y el tamaño de las especies asi
como de la viscosidad.
• También es importante: la fuerza ionica del medio, pH const.
Dielectrica.
OTROS METODOS DE SEPARACION:
 ELECTROFÓRESIS CAPILAR:
• Un capilar de 1 m de 75um de diam. Con unos 5ul de disolución
reguladora debe inyectarse con 5-50 nL de muestra.
• La inyección puede ser por gravedad o electroosmótica.
• corriente de unos 5kV durante unos segundos
APLICACIONES:
• Para análisis y separación de proteínas, polinucleotidos y
biopolímeros.
OTROS METODOS DE SEPARACION:
• Cromatografía plana: la FE se fija sobre una placa plana o a los intersticios de un
papel y la FM se desplaza a través de la fase estacionaria por capilaridad o por
gravedad.
• Cromatografía plana. La fase estacionaria se sitúa sobre una placa plana o sobre
un papel. Las principales técnicas son:
• Cromatografía en papel
• Cromatografía en capa fina
 OTROS METODOS DE SEPARACION:
Tipos Fase móvil Fase estacionaria
Cromatografía en papel Líquido Papel de celulosa.
Cromatografía en capa fina Líquido Gel de sílice o alúmina.

La fase estacionaria está constituida simplemente por una tira de papel filtro. La muestra se deposita
en un extremo colocando pequeñas gotas de la solución y evaporando el disolvente. Luego el
disolvente empleado como fase móvil se hace ascender por capilaridad. Luego se coloca la tira de
papel verticalmente y con la muestra de abajo dentro de un recipiente que contiene fase móvil en el
fondo.
Después de unos minutos cuando el disolvente deja de ascender o ha llegado al extremo se retira el
papel y se deja secar. Si el disolvente elegido fue adecuado y las sustancias tienen color propio se
verán las manchas de distinto color separadas. Cuando los componentes no tienen color propio el
papel se somete a procesos de revelado.
Hay varios factores de los cuales depende una cromolitografíe eficaz: la elección del disolvente y la
del papel de filtro.
OTROS METODOS DE SEPARACION:

• La cromatografía en capa fina (CCF) es una técnica cromatográfica que

utiliza una placa inmersa verticalmente. Esta placa cromatográfica consiste
en una fase estacionaria polar (comúnmente se utiliza sílica gel) adherida a
una superficie sólida.1​La fase estacionaria es una capa uniforme de un
absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de vidrio, aluminio
u otro soporte.