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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MXICO FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES DE ZARAGOZA INGENIERIA QUIMICA REPORTE DE CROMATOGRAFIA ELABORO: FELIPE GARCA

REYES GPO: 3362 PROFESORA: ALEJANDRA VALANTAN RESUMEN: Se separaron los componentes de un extracto de chile guajillo utilizando la tcnica cromatogrfica en columna, aunada a una determinacin del disolvente ms adecuado a la mezcla problema para la realizacin de la CC con el uso de la cromatografa de capa fina. Comprobando as la efectividad de la CC para obtener los componentes puros de la mezcla problema. ANTECEDENTES: CROMATOGRAFIA La cromatografa puede definirse como la tcnica de separacin de una mezcla de solutos, basndose esta separacin en la diferente velocidad con que se mueve cada uno a travs de un medio poroso, arrastrados por un disolvente en movimiento. La cromatografa es un mtodo que permite separar los componentes de una mezcla de compuestos por distribucin entre dos fases, una de las cuales es mvil y la otra estacionaria. La fase estacionaria puede ser un slido o un liquido, este ultimo debe de estar inmvil sobre un soporte inerte. La fase mvil pude ser un lquido o un gas. Dependiendo de la naturaleza de las fases usadas; la cromatografa puede clasificarse en varios tipos: solido-liquido, liquido-liquido, solido-gas y liquido-gas; por esta diversidad, la cromatografa en las ltimas dcadas ha adquirido un gran valor, ya que su empleo ha contribuido no solo a la identificacin sino tambin al aislamiento de compuestos que son de origen biolgico; aun en cantidades muy pequeas, dichos compuestos generalmente poseen propiedades fsicas y qumicas muy semejantes; siendo muy difcil por otras tcnicas conseguir tales resultados. Las distintas tcnicas cromatografas se pueden dividir segn cmo est dispuesta

la fase estacionaria: Cromatografa plana. La fase estacionaria se sita sobre una placa plana o sobre un papel. Las principales tcnicas son: Cromatografa en papel. Cromatografa en capa fina. Cromatografa en columna. La fase estacionaria se sita dentro de una columna. Segn el fluido empleado como fase mvil se distinguen: Cromatografa de lquidos. Cromatografa de gases. Cromatografa de fluidos supe crticos. |TIPO |FASE MOVIL |FASE ESTACIONARIA | |Cromatografa en papel |Liquido |Solido | |Cromatografa en capa fina |Liquido |Solido | |Cromatografa de gases |Gas |Solido o liquido | |Cromatografa liquida en fase inversa |Liquido (polar) |Solido o liquido | | | |(menos polar) | |Cromatografa liquida en fase normal |Liquido (menos polar) |Solido o liquido (polar) | |Cromatografa liquida de intercambio inico |Liquido (polar) |Solido | |Cromatografa liquida de exclusin |Liquido |Solido | |Cromatografa liquida de adsorcin |Liquido |Solido | |Cromatografa de fluidos supercriticos |liquido |Solido | Al enfrentarse con el problema de separar una mezcla completamente desconocida lo mejor es emplear un ensayo cromatogrfico por medio de la cromatografa en capa fina, la cual dar detalles acerca de la complejidad de la mezcla a separar. La cromatografa en capa fina es uno de los mtodos analticos ms sencillos ya que se utiliza poca cantidad de muestra, pues es sensible en alto grado y requiere de poco tiempo para separar compuestos estructuralmente muy parecidos. Los resultados de la cromatografa son muy valiosos pues ayudan a seleccionar el adsorbente y eluyentes adecuados que pueden ser empleados para una separacin en columna. CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA La cromatografa sobre papel es muy verstil y sus mtodos se emplean con mucha frecuencia, pero su uso se limita a separaciones sobre celulosa, ya que otros medios adsorbentes, como la almina y el gel de slice, no pueden prepararse en forma de tiras. Esta dificultad puede superarse fabricando capas finas de estas sustancias sobre placas de vidrio. Las capas finas preparadas sobre vidrio se denominan cromatoplacas. Se usan dos tipos de capas: la capa compacta que se adhiere a la placa de vidrio por medio de un agente aglomerante incorporado al adsorbente o por las cualidades adherentes del propio material, y capa suelta. Estas ltimas solo se emplean en la determinacin de la actividad de los adsorbentes y en

uno de dos casos especiales. Las separaciones sobre la capa finase parecen en muchos aspectos a la del papel, pero es posible la eleccin de muchos ms medios, ye que con esta tcnica pueden realizarse separaciones por reparto, filtracin sobre gel, adsorcin e intercambio inico. Las propiedades particulares de la cromatografa en capa fina permiten desarrollar el fraccionamiento en un periodo de tiempo mucho menor. Una razn de esto es el tamao de las partculas que constituyen los medios empleados en cromatografa en capa fina, por lo que se consiguen mejores resoluciones y manchas ms compactas. Las capas compactas se preparan aplicando una papilla del medio elegido en un disolvente adecuado, sobre las placas de vidrio. En la cromatografa de capa fina es posible emplearse cualquier medio, habiendo discutido que factores influyen en la eleccin. Los ms populares son la celulosa microgranular o micricristalina, gel de slice (silica gel) en adsorcin y reparto y almina. La eleccin del disolvente depender de la naturaleza del compuesto que se va a separar y del material en que la separacin va llevarse a cabo. Una regla general para la eleccin del disolvente es la comparacin de la polaridad del mismo y de la sustancia que se va a separar, as aplicamos el criterio en el cual se emplea un disolvente poderoso (activos) para sustancias no polares y adsorbentes con menos actividad para sustancias ms polares. El revelado de las placas pude llevarse a cabo con agentes corrosivos, tal como cidos concentrados y compuestos fuertemente oxidantes, a alta temperatura, debido a la naturaleza inorgnica de la capa. Otro reactivo muy empleado son los vapores de yodo. En una cmara que contiene en el fondo algunos cristales de yodo, se introduce el cromatograma y se deja durante unos minutos. El yodo tiende a concentrarse en los sitios donde estn los compuestos, por lo que aparece una mancha marrn oscuro, sobre el fondo amarillo plido. Otros mtodos que no afectan el revelado son la fluorescencia y la radioactividad. Muchas placas llevan sustancias fluorescentes como aditivos para el revelado de los compuestos, localizndose los mismos por la aparicin de machas no fluorescentes. Adems muchos compuestos que se separan absorben ultravioleta, siendo este el mtodo ms sencillo para localizarlos. CROMATOGRAFIA DE COLUMNA (filtracin en gel) La cromatografa de filtracin en gel se realiza empleando unas matrices formadas por unas esferas porosas. El volumen de los poros es muy elevado y su dimetro est determinado. Cuando penetran en el lecho de la columna dos protenas de tamaos tales que una penetra en los poros de las bolas de gel y la otra no, la primera se reparte entre el espacio entre las bolas y el interior de los poros, reducindose la concentracin en la fase libre entre las bolas. La segunda protena, por tamao, slo puede encontrarse entre las bolas. El flujo de solvente es ms elevado entre las bolas que en el interior de los poros de stas, por lo que el efecto neto es el de acelerar el desplazamiento de las protenas de mayor

peso molecular respecto al de las de menor peso molecular. En esta cromatografa se eluyen primero las protenas mayores, y en segundo lugar las menores, y tiene una gran influencia en el resultado la longitud de la columna y el volumen de la misma. Columnas largas aseguran separaciones de mayor calidad. Empleando patrones de protenas de peso molecular conocido se emplea para determinar el peso molecular de protenas de tamao desconocido. Son numerosos los adsorbentes empleados en la cromatografa de columna. Las separaciones pueden realizarse por reparto, adsorcin o intercambio inico. Pueden usarse cualquier medio adsorbente, siendo los ms generales la celulosa, gel de slice, almina, oxido de magnesio. El tamao de la columna est determinado por la cantidad de mezcla que se va a fraccionar. El primer paso en el montaje de la columna cromatogrfica es colocarla fija en posicin vertical. A continuacin se pone en la columna un disco de porcelana con varios orificios, y encima de este un poco de lana de vidrio. Este dispositivo retiene el material solido de la columna, mientras que el lquido puede circular libremente. El adsorbente puede introducirse en seco, pero lo ms frecuente es echarlo en forma de una papilla con eluyente. La papilla formada por el adsorbente y el disolvente se agrega lentamente en porciones, lo que permite que se pose en el adsorbente por la fuerza de gravedad, hasta alcanzar la altura deseada. Finalmente se abre la llave inferior de la columna para que salga el exceso de disolvente contenido. La altura del disolvente no debe exceder ms de 2 a 5 mm sobre el slido. Una vez realizado esto la columna esta lista para introducir la muestra que se va a separar. OBJETIVOS: Seleccionar a tcnica cromatogrfica para purificar compuestos coloridos y no coloridos. Identificar a la cromatografa en capa fina como una herramienta en la determinacin del nmero de componentes de una mezcla. Elegir la cromatografa en columna como una tcnica para purificacin de compuestos. HIPOTESIS: En la cromatografa de capa fina obtendremos un buen ensayo para encontrar el eluyente ms apto para la CC, siendo este aquel que sea ms afn a la mezcla problema y muestre una mayor ascendencia en los componentes del extracto. El la cromatografa de columna observaremos la separacin de los componentes del extracto del chile guajillo. PROCEDIMIENTO: LISTADO DE MATERIALES |MATERIALES |

|MATERIAL |CANTIDAD |MATRAZ BOLA 500 ML |1 |TUBO REFRIGERANTE |1 |MANGUERAS DE HULE |2 |SOPORTE UNIVERSAL |1 |PINZAS DE TRES DEDOS CON NUEZ |2 |AGITADOR CON GANDARME |1 |CUBREOBJETOS |10 | |CHAROLA DE ALUMINIO |1 |BOLA DE ALGODN |1 |EMBUDO TALLO CORTO |1 |VASO DE PP DE 100 ML |3 |Vaso de pp 250 ml |1 | |REACTIVOS | |SUSTANCIA |CANTIDAD | |HEXANO |250 ml | |ETER DE PETROLEO |250 ml | |CICLOHEXANO |250 ml | |BENCENO |250 ml | |COLRURO DE METILO |250 ml |TOLUENO |250 ml | |ETER DIETILICO |250 ml | |CLOROFORMO |250 ml | |ACETONA |250 ml | |ETANOL |250 ml | |METANOL |250 ml | |SILICA GEL PARA CAPA FINA |30 gr |SILICA GEL PARA COLUMNA |30 gr PROCEDIMIENTO: Obtencin del extracto:

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1. Se cortaron cuadritos de chile guajillo en cuadros de aproximadamente .5 cm y se pesaron en la balanza analtica 37 gramos de chile. 2. Se depositaron en el matraz bola de 500 ml y se colocaron 70 ml de etanol. 3. Se llevo la mezcla al reflujo a 50C por un aproximado de 20 minutos y se dejo enfriar la mezcla. La mezcla se coloco en un frasco con tapa. Preparacin de la papilla para la cromatografa de capa fina: 1. Se coloco una cantidad de cloruro de metileno dentro de un frasco y se fue agregando poco a poco la silica gel para capa fina.

2. Se agito hasta que en el agitador se observo una capa opaca y uniforme (sin grumos y no debe ser espesa). Preparacin de las cromatoplacas: 1. Se tomaron dos cubreobjetos juntos y se sumergieron en la papilla de silica gel. 2. Se sacaron cuidando no daar la papilla adherida al cubre objetos, se separaron y se colocaron en una charola de aluminio. 3. Se activaron las placas en la estufa a 110 por 30 min. Preparacin de las cmaras de elucin: Se lavaron 5 frascos de gerber con tapa, se etiquetaron y se les coloco el papel filtro alrededor dejando solo una pequea ventana para observar el proceso. Eleccin de la efectividad del disolvente: 1. Se eligieron varias mezclas de disolventes con diferentes polaridades, sumando un total de 5 ml de cada combinacin. Se colocaron en la cmara de elucin y se espero a la absorcin del papel filtro. 2. En la cromatoplaca activada se colocaron, con ayuda de un tubo capilar, dos puntos de la sustancia problema a una distancia de la base de la cromatoplaca a los puntos de 1 cm, para que el disolvente no toque los puntos. Guardando adems una distancia entre dichos puntos para evitar su cruce en la corrida cromatogrfica. 3. Se introdujeron las cromatoplacas en la cmara de elucin y se espero el ascenso del disolvente, cuidando que este no rebasara la capa de silica. 4. Al terminar la corrida se retiro la cromatoplaca y se espero a su secado para corroborar la efectividad de la mezcla. Preparacin de la columna para la cromatografa fraccionada: 1. Se monto la bureta en forma vertical. Se le introdujo un pedazo de algodn el en fondo. 2. Se coloco despus cerca de 1 cm de sal, cuidando quedase esta de forma horizontal. 3. Se prepararon cerca de 6 gramos de silica para columna con el disolvente escogido ( 12ml ter etlico y 18 ml de cloruro de metileno) y se vertieron en la columna esperando que la silica fuera asentndose lentamente hasta tener un aproximado a 10 cm de silica en la columna y se le coloco otra capa de sal del mismo espesor que la anterior. CORRIDA DE LA CROMATOGRAFIA DE COLUMNA:

1. Se introdujo una cantidad de mezcla problema sobre la columna preparada y despus se coloco el disolvente elegido. 2. Se abri la llave de la bureta permitiendo la evacuacin del disolvente a ms o menos 1 gota cada 3 segundos. 3. Se espero a la separacin de los componentes de la sustancia problema reservando cada uno de ellos en tubos de ensaye. Separados por sus tonalidades en cada tubo desde el primero hasta el ltimo. ** ES IMPORTANTE NO DEJAR SECAR LACOLUMNA DURANTE LA CORRIDAYA QUE SE ESTROPEARIA EL TRABAJO ** COMPROBACION DE LOS COMPONENTES DE LA SUSTANCIA PROBLEMA: Una vez obtenidos los componentes de la sustancia problema por separado en los tubos de ensaye: Se concentraron ponindolos a bao mara en agua con el uso de un vaso de pp. de 250 ml. SE PROCURO QUE LOS COMPONENTES NO SE EVAPORARAN POR COMPLETO. Para comprobar si los componentes de la sustancia se obtuvieron puros, se realizo una corrida en CCF para cada componente desde los ms claros hasta los ms oscuros. Se revelaron las cromatoplacas para ver si efectivamente los componentes eran puros. Aquellos que no se podan notar a simple vista se revisaron con luz UV en un lugar oscuro para una mayor eficacia. Resultados: |ELECCION DE DISOLVENTES EN CCF | |CORRIDA |MEZCLA |CANTIDAD |EFICACIA |1 |HEXANO |2.5 ML |POCA | | |ACETONA |2.5ML | | |2 |ETER ETILICO |3ML |BUENA | | CLORURO DE METILO |1ML | | | |CICLOHEXANO |1ML | | |3 |ETER ETILICO 2ML |EXELENTE | | |CLORURO DE METILENO |3ML | |

|COMPROBACION DE LA PUREZA DE LOS EXTRACTOS | |CROMATOPLACA |NO. DE EXTRACTO |COMPROBACION | |I |10 |ESXTRACTOS IGUALES |

| | |II | | |III | | |IV |

|11 |7 |8 |9 |2 |1 |6 |4 |3 |5

| | | | |PURO | |PURO | |MECLA DE 2 |MEZCLA DE 4 |PURO | |MEZCLA DE 2 |MEZCLA DE TODOS |MEZCLA DE TODOS

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ANALISIS DE RESULTADOS: En la cromatografa de capa fina cremos haber obtenido la mezcla de disolventes apropiada para realizar la CC, sin embargo comprobamos al final que tal vez pudo haberse adecuado alguna mezcla de mayor eficacia ya que al comprobar la pureza de los extractos no fue posible encontrarlos todos ellos en estado puro. Algunos de estos estaban en mezcla. Por lo tanto recomendamos realizar la eleccin de la mezcla de disolventes de una manera ms eficaz, lo cual permitira una mejor obtencin de los componentes en sus estados puros. CONCLUSION: La cromatografa es un mtodo muy recomendable para quien quiere comprobar los componentes de una mezcla descocida. Facilita en todo caso la obtencin de estos y resulta ser sencilla y superficial (CCF) o compleja y eficaz (CC). BIBLIOGRAFIA: http://www.ub.es/biocel/wbc/tecnicas/cromatografia.htm http://www.uprm.edu/biology/profs/velez/cromatografias.htm http://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa ----------------------La tabla muestra las diferentes tcnicas cromatogrficas las cuales dependen en todo caso del tipo de fase estacionaria y mvil que se utilizan. El desarrollo de las placas se lleva a cabo en las cmaras de elucin por el mtodo ascendente. En el interior de la cmara debe colocarse un papel filtro empapado de disolvente, que cubra las paredes interiores de la misma, para conseguir que la atmosfera este saturada de vapor del disolvente. El fondo de la cmara se cubre de disolvente hasta una altura de 0.5 a 1 cm y, despus de un periodo apropiado en el que se consigue el equilibrio se introduce la placa. Durante el desarrollo no puede moverse la cmara de elucin.

|INSTRUMENTOS | |INSTRUMENTO |CANTIDAD |PIPETA GRADUADA 10 ML |10 |BURETA 25 ML |1 | |BALANZA A NALITICA |1 |EQUIPOS | |ESTUFA | |CANASTA DE CALENTAMIENTO |REOSTATO | |RECIRCULADOR | |PLACA DE CALENTAMIENTO ELEGIDO

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CROMATOGRAFA EN COLUMNA OBJETIVO: Identificar el pigmento que le da color al chile guajillo por medio de una cromatografa en columna y capa fina. RESUMEN: Se dejo macerar chile guajillo con tolueno y se trituro para poder extraer la mayor cantidad de pigmento. Despus se hizo una extraccin con agua y se agrego Na2SO4 como desecante para as contener el tolueno con el pigmento lo ms puro posible. Para asegurarnos de que solo se trataba de chile guajillo se llevaron muestras a una cromatografa en columna y capa fina. INTRODUCCIN: Se obtendr una mejor identificacin del pigmento cuando se encuentre el sistema de resolucin adecuado de eluyentes para la cromatografa de capa fina y, se comprobara al llevar estos eluyentes a la cromatografa en columna. La Cromatografa en columna es un proceso de separacin donde la mezcla fluye hacia debajo de una columna rellena con absorbente. En todos los casos la separacin que se produce mediante esta tcnica, es con frecuencia comprobable con la obtenida en la cromatografa de capa fina. En este caso la fase mvil se llama eluyente, que es el que nos ayudar en la separacin de componentes de una mezcla y este se selecciona segn su polaridad.

El requerimiento bsico para la cromatografa en columna es disponer de un cilindro hueco (preferentemente de vidrio, un reservorio que contenga el solvente revelador, un buen adsorbente y los medios mediante los cuales los componentes separados se puedan recoger a medida que aparezcan en el fondo de la columna. Los usos de este tipo de cromatografa son:

en la separacin de grandes cantidades de material monitora la separacin de la mezcla.

EN DONDE EUYENTE COLUMNA ELUATO ENTRA SALE Las cromatografas son un grupo de tcnicas de separacin selectiva de molculas, en las que los componentes de una mezcla compleja de componentes pueden ser identificados y/o purificados. Existen varios tipos de cromatografas, segn los criterios que se usan para hacer los anlisis, pero todas consisten de una fase estacionaria y una mvil. En la cromatografa de columna las molculas de una mezcla son separadas en base a la afinidad de las molculas por la fase estacionaria o por la fase mvil. Si una molcula A tiene ms afinidad por la fase estacionaria que la B, B bajar ms rpido que A. Existen muchos tipos de cromatografa de columna. A. Filtracin en gel: En esta las molculas son separadas por su tamao. El gel consiste de una cama de esferas con poros de un tamao dado. El gel se conoce como sefadex, el cual viene con poros de distintos tamaos. Las molculas de igual o menor tamao que el poro entran a las esferas mientras que las molculas ms grandes pasan rpidamente por la columna. Las molculas de tamao intermedio pueden entrar las esferas pero pasan menos tiempo en ellas. Las molculas salen en orden de tamao por el eludo. Aunque para efectos de este laboratorio las muestras que usaremos estn coloreadas, al hacer esta cromatografa en la vida real hay que usar otras pruebas para determinar qu fracciones contienen las muestras de inters, las cuales suelen ser protenas. Estas pruebas pueden ser mediciones fotomtricas, SDS-PAGE o ensayos enzimticos. Una vez tenemos identificadas las fracciones con las muestras,podemos hacer un "profile" de elucin con concentracin en con concentracin en Y y el volumen de elucin en X. El volumen inicial es el "void volume" de la columna. Lo que contiene es en amortiguador que estaba dentro de la columna al empezar. Las molculas ms grandes salen inmediatamente despus. El material que se escoja para la fase estacionaria depender del tipo de muestra que estemos corriendo. Cada tipo de gel presenta poros de distinto tamao.

B. Intercambio inico: Se usa para purificar protenas. Separa molculas en base a su carga inica. La fase estacionaria presenta una matriz con carga. Al eluir una muestra, las molculas de igual carga salen con el amortiguador. Las molculas de carga opuesta se adhieren al material de empaque con distintos grados de afinidad. Para desprender las protenas adheridas se usa una solucin alta en cloruro de potasio o de sodio. Esto puede hacerse usando soluciones con incrementos moderados de salinidad, o de un solo paso, echando la solucin de mayor concentracin de sal primero. Al subir la concentracin poco a poco podemos recolectar las muestras desde las que menos afinidad por la columna tiene hasta las de mayor afinidad. Durante la elucin, la sal va compitiendo con la protena por las cargas de la matriz de la columna, hasta que la desprende. La columna puede ser de matriz negativa (intercambio catinico) o positiva (intercambio aninico). El tipo de empaque depender de qu queremos aislar. En este tipo de columna el pH es importante porque puede alterar la carga de la columna. Fase inversa: Esta es una cromatografa de interaccin en la que la fase estacionaria, con molculas hidrofbicas, interacta con molculas hidrofbicas en la muestra. La matriz conciste de fibras de silicato con cadenas de hidrocarburos. Estas atraern a las molculas hidrofbicas de la muestra mientras que las hidroflicas salen con el amortiguador. Las molculas son eludas de la columna lavando con soluciones de distinta concentracin de alcohol o cualquier otro solvente no polar. MATERIAL: bureta de 25 ml algodn frascos soporte universal pinzas dobles embudo de separacin papel filtro porta objetos capilares 10 tubos de ensayo parrilla de calentamiento

aluminio pipita volumtrica de 5 ml perilla etiquetas vaso de precipitados de 100 ml lmpara de rayos UV gradilla PROCEDIMIENTO:

PREPARACIN DE SLICE GEL PARA LA COLUMNA

En un frasco se mezcla slice gel con benceno, de tal forma que quede una papilla no muy floja.

EMPAQUE DE LA COLUMNA

Se coloca la bureta de 25 ml en un soporte universal, y se le agregan 10 ml de benceno, y se le introduce un pequeo cacho de algodn, de tal forma que quede y se moje con benceno en la parte inferior de la bureta y posteriormente se le agrega 1 cm aproximadamente de NaCl. Cuando este paso se haya realizado, con la ayuda de un embudo se agrega la papilla de slice gel dentro de la bureta. NOTA: cuando se realice este paso se tendr que verificar que no exista burbuja de aire alguna, cuando este el slice gel dentro de la bureta. Se le agrega otro centmetro de NaCl.

ADICION DEL CHILE CON TOLUENO

Posteriormente se procede a agregar en la parte superior una muestra de .2 ml de chile con tolueno El eluato se recibir en una vaso de precipitados de 100 ml y el eluyente se adicionara con la ayuda de un embudo de separacin de 125 ml. (en este caso benceno) Se espera a que se comience a observar la separacin de los componentes del chile con tolueno.

Cuando comience la separacin. Se tratar de recolectar dichas separaciones en los tubos de ensayo y se tendrn que enumerar segn el orden vayan saliendo.

PREPARACIN DE CAMARAS DE ELUSIN

En un frasco de boca ancha, se coloca un rectngulo considerable de papel filtro. En la campana de ventilacin, con la ayuda de pipeta volumtrica se agrega una mezcla de metanol con benceno 9:1, este nos servir para revelar las cromatoplacas que se realizarn sobre los compuestos separados en los tubos de ensayo.

CROMATOGRAFA EN CAFA FINA.

Cuando se haya terminado de separar los componentes del chile con tolueno, se realiza una CCF con cada uno de los eluatos obtenidos. Una vez realizado el procedimiento para la CCF (prctica antes hecha), con la ayuda de una lmpara UV se observar que fue lo que sucedi en la cromatoplaca despus de salir de la cmara de elusin, esto para identificar que compuestos son iguales y cuales son diferentes. DIAGRAMA RESULTADOS: De la cromatografa en columna se obtuvieron 8 tubos de ensaye con distintos tonos de color. Y no se pudieron concluir las elusiones ya que la columna se partio. En la cromatografa de capa fina se eluyeron los distintos compuestos que tenia la muestra de chile guajillo. DISCUSIN DE RESULTADOS De acuerdo a los resultados obtenidos durante el proceso de separacin por medio de cromatografa en columna, se pudo observar que en lo que fue la separacin , se obtuvieron 8 tubos de ensaye con diferentes productos y con diferentes tonalidades de color, esto no garantiza que todos sean diferentes, por lo cual se realiz la cromatografa en capa fina con estos dichos productos, obteniendo as: Las siguientes tablas muestran que productos de los tubos de ensayo fueron iguales y cuales fueron diferentes: # DE TUBO DE ENSAYE 1 2 3 4 SON IGUALES 9 10 11 SON IGUALES

# DE TUBO DE ENSAYE 6 DIFERENTE 7 DIFERENTE 8 DIFERENTE La elusin en la columna no se termino ya que en la columna se formaron burbujas de aire y la silica gel se seco y estrello. CONCLUSIONES Mediante el anlisis de resultados podemos concluir que la prueba en cromatografa en columna para la separacin de componentes de una mezcla de chile guajillo con tolueno fue en parte satisfactoria, por que se obtuvieron buenos resultados en cuanto a los productos contenidos en los tubos de ensaye, aunque no todos nos garantizaban que todos los compuestos contenidos en ellos eran iguales, pero mediante la identificacin de un eluyente adecuado (benceno - metanol 9:1) para esta separacin y una cromatografa en capa fina pudimos identificar 5 componentes diferentes de esos tubos de ensaye. Solo que al romperse la columna no se pudo terminar de eluir toda la muestra. Al identificar estos 5 compuestos diferentes de dicha mezcla de chile se puede decir que no hubo demasiados errores en la elaboracin de dichos experimentos. Aunque si llevan algo de tiempo y de cuidados al trabajar con cromatografa en columna. BIBLIOGRAFA: FIESER, LOUIS EXPERIMENTOS ORGANICOS Barcelona 1967 ED. Revert pp.3-20 BREWESTER, Q, Ray CURSO PRACTICO DE QUMICA ORGANICA ESPAA 1979. ED. Alambra pp.27,43,257,258

Harries, Daniel QUMICA ANALTICA CUALITATIVA pp. CROMATOGRAFA Principios y tcnicas Manual Moderno, S.A., Mxico 1975 VOGEL, i Arthur QUMICA ANALTICA CUALITATIVA Buenos Aires ED. Kapeluz pp.279 REACTIVOS slice gel acetato de etilo tolueno NaCl benceno metanol PREPARACIN DE COLUMNA ( slice gel ) CROMATOGRAFA EN COLUMNA Adicin del eluyente (benceno) Agregar muestra de chile con tolueno

CROMATOGRAFA EN CAPA FINA Recolectar los eluatos En los tubos de ensayo Preparacin de la cmara de elusin con el eluyente elegido en la CCF ya antes realizada Preparacin de las cromatoplacas Comparar las cromatoplacas Realizacin de est tcnica para identificar los diferentes eluatos obtenidos Definir cuantos compuestos se separaron de la mezcla