Cinética enzimática

Bioquimica grupo: 8

Tatiana Bermejo Araujo

Valerie Salgado Carmona
Angie Zambrano Reyes
Julio Heredia De ls Hoz

Facultad de quimica y farmacias

Universidad del atlantico 2020-1

 Cinética enzimática
● Estudia la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas. Estos estudios
proporcionan información directa acerca del mecanismo de la reacción catalítica y de
la especificad del enzima.
● Depende de: La concentración de moléculas de sustrato [S], la temperatura, la
presencia de inhibidores, pH del medio, que afecta a la conformación (estructura
espacial) de la molécula enzimática.
 Gráficas de cinética enzimática

● Las siguientes gráficas, muestran la velocidad de reacción como una función de la

concentración de sustrato) se usan a menudo para mostrar información sobre cinética
enzimática.
 CÁLCULO DE LA KM Y DE LA Vmax DE UN ENZIMA
La representación gráfica de la ecuación de Michaelis-Menten (v0 frente a [S]0) es una
hipérbola. La Vmax corresponde al valor máximo al que tiende la curva experimental, y la
KM corresponde a la concentración de sustrato a la cual la velocidad de la reacción es la
mitad de la Vmax.
● Para determinar gráficamente los valores de KM y Vmax es más sencillo utilizar la
representación doble recíproca (1/v0 frente a 1/[S]0), ya que es una línea recta. Esta
representación doble recíproca recibe el nombre de representación de Lineweaver-Burk.
● De esta forma, a partir de los datos experimentales se puede calcular gráficamente, los
valores de KM y Vmax de un enzima para diversos sustratos:
 La constante de Michaelis-Menten (KM)

● KM es la concentración de sustrato para la cual la velocidad de reacción es la mitad de la

velocidad máxima. En efecto, si KM = [S], la ecuación de Michaelis-Menten se reduce a: v =
Vmax/2.
● La KM del sustrato natural es menor que la de los sustratos análogos. Si dos sustratos del mismo
enzima tienen distinta KM, el que presente mayor KM tiene menor afinidad por el enzima, y la
reacción transcurre siempre a menor velocidad que con el sustrato de menor KM, salvo a
concentraciones saturantes de sustrato, donde la v = Vmax.
 Gráficas:

UDP GLUCOSA
[s] UDP Glucosa Mm V0 1/ [s] 1/ Vo

0.025 117 40 0,008547009

0.05 212 20 0,004716981

0.1 333 10 0,003003003

0.2 523 5 0,001912046

 La constante de Michaelis Menten y la velocidad máxima se pueden
hallar tomando nuestros valores de velocidad inicial específicamente el
valor mas alto y asumimos que ese es el valor de velocidad máxima de
la enzima con la que estamos trabajando así que para nuestro caso
nuestra velocidad máxima es 523 y aplicamos la regla que nos dice que
la constante de Michaelis va a estar a la mitad de la velocidad máxima.

Es decir, que en nuestro caso 261,5 es la mitad de la velocidad máxima

y vamos a trazar una línea desde ese valor de eje Y hasta que encuentre
con la curva en el momento que se encuentra con la curva vamos a irnos
hacia abajo con una línea perpendicular hasta tocar el eje X donde esta
la concentración del sustrato y ese punto o valor va a corresponder a la
constante de Michaelis que en este caso es aproximadamente 0,07 V Max: 523mM/s
Km: 0,07 mM
 Se despeja la siguiente formula:

hallamos la velocidad máxima

haciendo el calculo de:
el valor de uno sobre la derivada
que en este caso es 0,001 eso
nos da un valor para la velocidad
máxima de 1000 y luego para
hallar el km lo hacemos
identificando la intersección con
el eje que en este caso el valor
corresponde a 0,0002 y se
multiplica por el valor de la
velocidad Max que obtuvimos en
Vmax: 1000 mM/s este caso el valor de del km
haciendo dicho calculo y despeje
es 0,2
Km: 0.2
Graficas UDP Glucosa
 GLUCOSA M

[s] Glucosa V0 1/ [s] 1/ Vo

0.3 139 3,333333333 0,007194245

0.4 185 2,5 0,005405405

0.5 224 2 0,004464286

1 325 1 0,003076923

2 433 0,5 0,002309469

 se tomo el valor de velocidad
máximo que en este caso es
433 y se hallo el km utilizando la
regla de la constante Michaelis

La cual nos dice que el km se

asume como la mitad de la
velocidad Max en este caso
este valor es 216,5 a partir de
este eje “Y” se traza una línea
hasta llegar a la curva del
grafico dibujada con los datos
experimentales y luego nos
vamos a ir hacia abajo con una
línea perpendicular hasta tocar
el eje de las concentración de
sustrato y ese punto a el que se
V max: 433 Mm/S llega va corresponder a el valor
Km: 0,45mM de la constante de Michaelis
que nos dio un valor de 0,45
 Hacemos el mismo
procedimiento que con La
otra grafica de L-B pasada
despegando la formula:

Tomamos el valor de Uno

sobre la derivada que en
este caso es 0,0013 eso
nos da un valor para la
velocidad máxima de 769,2
y luego para hallar el km lo
hacemos identificación de
la intersección con el eje
que en este caso el valor
corresponde a 0,0017 y se
multiplica por el valor de la
velocidad Max que
obtuvimos y esto nos un
Vmax: 769,23 Mm/s resultado para el Km de
1,307
Km: 1,307 mM
Graficas M Glucosa
BIBLIOGRAFÍA

Brandt, M. (2010). Inhibition kinetics (Cinética inhibitoria). En CHEM 330 biochemistry website, 8.
Consultado en https://www.rose-hulman.edu/~brandt/Chem330/Inhibition_kinetics.pdf.

Berg, J. M., Tymoczko, J. L. y Stryer, L. (2002). The Michaelis-Menten model accounts for the
kinetic properties of many enzymes (El modelo Michaelis-Menten explica las propiedades
cinéticas de muchas enzimas). En Biochemistry (Bioquímica) (5th ed., section 8,4). Nueva York,
NY: W. H. Freeman. Tomado de http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK22430/.

Mixed inhibition. (Inhibición mixta; 2 de diciembre de 2015). Consultado el 15 de febrero de 2016

en Wikipedia: https://en.wikipedia.org/wiki/Mixed_inhibition.