PROBLEMAS DE CINÉTICA ENZIMÁTICA

1. ¿Cuál será la constante de velocidad de una reacción de primer orden cuya t1/2 es de
0,3 segundos? ¿Qué intervalo de tiempo deberá transcurrir para que desaparezca el
95% del reactivo?

2. La enzima ureasa cataliza la hidrólisis de la urea a amoníaco y a CO2. A 295, la

reacción sin catalizar, tiene una energía de activación de aproximadamente 125
kJ/mol, mientras que en presencia de ureasa la energía de activación se reduce a unos
46 kJ/mol. ¿En qué factor incrementa la ureasa la velocidad de la reacción?

3. ¿Qué relación numérica existe entre Km y [S] cuando una reacción catalizada
enzimáticamente alcanza el 80% de la Vmax?

4. 100 g de una enzima a 25ºC descomponen en 10 minutos el 1% de un sustato 0,1

M. La misma cantidad de enzima, en un minuto, descompone el 5% el sustrato 10-3 M.
Calcular la Km, Vmax y actividad específica de la enzima.

5. Una enzima fue ensayada con una concentración inicial de sustrato de 2 x 10-5 M. En
6 minutos, la mitad del sustrato había reaccionado. La Km para el sustrato es 5 x 10-3.
Calcular la k (constante cinética de primer orden), la Vmax y la concentración de
producto obtenido en 15 minutos.

6. Una enzima con una Km de 2,6 10-3 M se ensayó con una concentración inicial de
sustrato de 0,3 M. La velocidad observada fue de 5,9 x 10-5 M min-1. Si la
concentración inicial de sustrato fuera 2 x 10-5 M, ¿cuál será la concentración de
producto tras 5 y 10 minutos?

7. La aspartato transaminasa cataliza la reacción:

glutamato + oxalacetato  -cetoglutarato + aspartato
El fosfato de piridoxal (PP) actúa como coenzima en el proceso catalítico. Calcular la
Km para el complejo apoenzima-coenzima a partir de los siguientes datos obtenidos al
variar la concentración de PP, mientras que las condiciones de glutamato y oxalacetato
se mantuvieron constantes:

Glutamato que
desaparece (mg/min) 0.17 0.27 0.43 0.65 0.73 0.78 0.79 0.81

PP Añadido (M) 0.30 0.50 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 10.0
8. La penicilina es hidrolizada y con ello inactivada por la penicilasa, una enzima
presente en algunas bacterias resistentes a la penicilina. El peso de este enzima en
Staphylococcus aureus es de 29.6 kDa. La cantidad de penicilina hidrolizada en un
minuto en una disolución de 10 ml que contiene 10-9g de penicilasa purificada se midió
como función de la concentración de penicilina. Suponiendo que la concentración de
penicilina no cambia apreciablemente durante el ensayo, representar 1/v frente a 1/[S]
a partir de los siguientes datos:

[Penicilina] moles hidrolizados/min

0.1 x 10-5M 0.11 x 10-9
0.3 x 10-5M 0.25 x 10-9
0.5 x 10-5M 0.34 x 10-9
1 x 10-5M 0.45 x 10-9
3 x 10-5M 0.58 x 10-9
5 x 10-5M 0.61 x 10-9

¿Sigue la penicilasa una cinética de Michaellis Menten? Si es así ¿cuál es el valor de

Km?; ¿cuál es el valor de Vmax?; ¿cuál es el número de recambio de la penicilasa bajo
estas condiciones experimentales? (Hay que suponer un centro activo por molécula de
enzima).

9. El salicilato inhibe la acción catalítica de la glutamato deshidrogenasa. Determinar el

tipo de inhibición mediante el análisis gráfico de los siguientes datos. Suponer que la
concentración de salicilato se mantiene constante y es de 40 mM. Calcular también la
Km para el sustrato y la Ki (constante de disociación para el complejo enzima-
inhibidor).

[S] mM 1,5 2,0 3,0 4,0 8,0 16,0

mg P/min (sin salicilato) 0,21 0,25 0,28 0,33 0,44 0,40
mg P/min (con salicilato) 0,08 0,10 0,12 0,13 0,16 0,18

10. A partir de los siguientes datos de una reacción enzimática, determinar el tipo de
inhibición, la Km del sustrato, y la Ki para el complejo enzima-inhibidor.

[S] mM 2.0 3.0 4.0 10.0 15.0

g P/h (sin inhib.) 139 179 213 313 370
g P/h (con inhib. 6mM) 88 121 149 257 313

11. Un microorganismo marino contiene una enzima que hidroliza la glucosa-6-sulfato.

El ensayo de detección se basa en la velocidad de formación de glucosa. La enzima en
un extracto libre de células tiene una Km de 6,7 x 10-4 M y una Vmax de 300 nM min-1.
La galactosa-6-sulfato es un inhibidor competitivo. A una concentración de glucosa-6-
fosfato 2 x 10-5 M y galactosa-6-sultato 10-5 M, la velocidad inicial es 1,5 nM min-1.
Calcular la Ki para la galactosa-6-sulfato.

12. ¿Cuál es el grado de inhibición producido por un inhibidor competitivo cuando [S]
= Km y [I] = Ki?
Soluciones:

1. k = 2,31 s-1; t = 1,3s.

2. 1,1 x 1014
3. [S]/Km = 4
4. Km = 1,020 x 10-3 M; Vmax = 1,01 x 10-4 M min-1; a.e. = 1010,2 u.a.esp.
5. k = 0,1155 min-1; Vmax = 5,775 10-4 M min-1; [P] = 1,646 10-5M.
6. P(5min) = 2,2 10-6 M; P(10min) = 4,1 10-6 M.
7. Km = 1,61 M
8. Km = 5,15 10-6 min-1; Vmax = 6,76 10-10 mol/min; núm. rec = 200 min-1
9. Inh no competitiva; Km = 2,65 mM (sin I), Km = 2,65 mM (con I); Vmax =
0,58 mg/min (sin I), Vmax = 0,22 mg/min (conI); Ki = 24,4 mM.
10. Inh. competitiva; Km = 5,13 mM; Ki = 7,5 mM.
11. Ki = 2,02 10-6 M.
12. Grado inh. = 33%