2.

4 Medición de la actividad enzimática de la pectinasa

2.3.1 Determinación experimental

Después de la extracción de pectina se procedió a evaluar la actividad enzimática con 7

pruebas, empleando concentraciones de sustrato diferentes, las cuales fueron tomadas del
documento Pectin-to-Galacturonic Acid: Waste-to-Bioproducts [cita]; y empleando la misma
concentración de enzima. Para la realización de estas pruebas se siguieron las indicaciones de la
guía del laboratorio de diseño de biorreactores de la universidad ICESI: Procedimientos
generales para medir la actividad enzimática de la Pectinliasa [cita].

2.3.2 Curva de calibración

Con el objetivo de encontrar la conversión de ácido galacturónico, se elaboró una curva de

calibración de acido galacturónico, cuyo procedimiento se realizó siguiendo las instrucciones
del laboratorio de diseño de biorreactores de la universidad ICESI: Medición de Ácido
Galacturónico Liberado por Hidrolisis enzimática[cita].

2.5 Modelado matemático

2.4.1 Modelado para la determinación de parámetros cinéticos

Con el fin de modelar los reactores Batch y CSTR, es necesario determinar los parámetros
cinéticos, para modelar correctamente el comportamiento cinético, se utilizaron dos modelos;
Michaelis-Menten (eq. 1) e inhibición acompetitiva por sustrato (eq. 2); de la ecuación 1, se
obtiene el valor de Vmax haciendo uso de la linealización de lineweaver-burk en Excel; los
valores de Km y Ks se obtienen a partir de la ecuación 2 mediante su modelamiento en
MATLAB.

Vmax [S ]
V=
Km+[S ]
(eq 1): Michaelis Menten equation.

V max [S ]
V= 2
[S]
K M+ [ S ]+
KS
(eq 2): Substrate uncompetitive inhibition equation.

2.4.3 Modelado de un biorreactor CSTR

Para el modelamiento del CSTR, se empleó MATLAB y se realizaron las siguientes

suposiciones: Un sistema abierto, también el flujo de entrada es igual al flujo de salida,
se redujo la ecuación del equilibrio general del sustrato, y la cinética de inhibición del
sustrato no competitiva se incluyó en la velocidad de reacción. Para este proceso, se
emplearon las siguientes ecuaciones:
 F
V̇ =
[So]
(eq 3): Volumetric Flow.

V =V̇ ∗(So−Sf )/r s

Where
Vmax∗Sf
r s=
Sf2
Km+ Sf +
Ks

(eq 4): CSTR volume equation.

2.4.4 Modelado de un biorreactor Batch.

Para el modelamiento del biorreactor Batch, se empleó MATLAB y se realizaron las

siguientes suposiciones: Es un sistema cerrado y no estacionario; también
se utilizó la cinética de inhibición de sustrato no competitiva para
modelar el Batch, para encontrar el tiempo de reacción (tb), se utilizó la
siguiente ecuación:

(eq 5): Batch reaction time equation.