GUIÓ PRÀCTICA / GUION PRÁCTICA

NOM DE LA PRÀCTICA: TINCIÓ DIFERENCIAL DE GRAM

MÒDUL: MP5 Microbiologia clínica
NOMBRE DE LA PRÁCTICA: TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM 2h
MÓDULO: MP5 Microbiología clínica
Nom i cognoms: CFGS LCB
Nombre y apellidos:

OBJETIVO GENERAL

Observar la forma, tamaño y agrupación de bacterias de una muestra nuestra, realizando la tinción
diferencial más importante de la microbiología: la tinción de Gram.

MATERIALES UTILIZADOS

 Mechero de alcohol o bunsen  Violeta cristal al 1% en agua

 Portaobjetos y cubreobjetos  Lugol al 2% en agua
 Microscopio óptico  Safranina al 0,5% en agua
 Micropipetas y pipetas  Acetona y etanol en proporción 1:3
 Cristalizador y soportes  Frasco lavador

METODOLOGÍA

1. Extender, en un portaobjetos limpio, una colonia de la anterior práctica. Si la colonia es sólida,

mezclarla bien con una gota de agua destilada.
2. Fijar la extensión con la llama del mechero.
3. Colocar los portaobjetos en los soportes de tinción y realizar la tinción con la siguiente secuencia:
3.1. Cubrir con violeta cristal al 1% durante 2 minutos. Lavar con el frasco lavador.
3.2. Cubrir con lugol al 2% durante 1 minuto.
3.3. Lavar la muestra goteándola con el decolorante (la mezcla de etanol y acetona) durante
medio minuto, hasta que el disolvente deje de salir coloreada.
3.4. Lavar con el frasco lavador. IMPORTANTE: No lavar en exceso.
3.5. Cubrir con safranina al 0,5% durante 1 minuto.
3.6. Lavar con agua del frasco lavador y dejar secar. IMPORTANTE: No lavar en exceso.
4. Colocar una gota de aceite de inmersión entre la muestra y un cubreobjetos y visualizar el
resultado en el microscopio, de igual forma que en la práctica anterior (primero con el objetivo
40x, y después con el objetivo 100x).

JUSTIFICACIÓN DIDÁCTICA
Criterios de evaluación 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6 y 2.7 del resultado de aprendizaje 2.
 GUIÓ PRÀCTICA / GUION PRÁCTICA
NOM DE LA PRÀCTICA: TINCIÓ DIFERENCIAL DE GRAM
MÒDUL: MP5 Microbiologia clínica
NOMBRE DE LA PRÁCTICA: TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM 2h
MÓDULO: MP5 Microbiología clínica
Nom i cognoms: CFGS LCB
Nombre y apellidos:

1. Què és un mordent? En el cas de la tinció de gram, què és el que fa que el lugol funcioni com a
mordent? / ¿Qué es un mordiente? En el caso de la tinción de gram, ¿qué es lo que hace que el
lugol funcione como mordiente?

2. Completa la següent taula i acoloreix com es veurien els bacteris Gram+ i Gram - en cada pas.
Completa la siguiente tabla y colorea cómo se verían las bacterias Gram+ y Gram - en cada paso.

Procedimiento Gram + Gram -

Paso 1: Colorear con _________________
durante 2 minutos.
Paso 2: Aplicar el mordiente de _______
potásico (Lugol) durante 1 minuto.
Paso 3: Proceso de _________________
con alcohol-acetona (30 segundos).
Paso 4: Colorante de ___________,
safranina, durante 1 minuto.

3. Descriu la morfologia dels bacteris que has tenyit. Pots adjuntar una imatge o fer un dibuix per
a ajudar-te. Són gram positives o gram negatives? / Describe la morfología de las bacterias que
has teñido. Puedes adjuntar una imagen o hacer un dibujo para ayudarte. ¿Son gram positivas o
gram negativas?