FACULTAD DE INGENIERÍA

E.A.P. INGENIERÍA AMBIENTAL

Practica: Análisis microbiológico de

muestras de agua según la técnica
del NMP
Dr. César Correa Arellano
 ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DEL AGUA

 Conjunto de operaciones encaminadas a

determinar los microorganismos presentes
en una muestra de AGUA.
FINALIDAD DE ANÁLISIS DEL AGUA
 Evaluar la calidad de las aguas de abastecimiento
doméstico a nivel urbano y rural.
 Evaluar la calidad de las aguas costeras y aguas dulces
destinadas a recreación.
 Detectar la influencia de los pozos sépticos, ubicados en
la cercanía de la línea de costa y de ríos y quebradas.
 Analizar los aportes de los pluviales a la carga bacteriana
del cuerpo receptor.
 Cuantificar la influencia de descargas puntuales
importantes, como plantas de tratamiento de líquidos
cloacales e industriales.
 MICROORGANISMOS INDICADORES:
 La contaminación fecal del agua puede ser
demostrada mediante la detección de
bacterias que están presentes en números
muy elevados en el contenido intestinal del
hombre y de otros animales.
 Su presencia en el agua prueba que está
polucionada con material fecal de personas o
animales de sangre caliente
 Métodos de determinación del número:
Métodos del número más probable (NMP),
método de filtro de membrana
 TOMA DE MUESTRAS

 Las muestras deben ser representativas

 El análisis debe realizar antes de 6 horas desde
el momento de la toma de muestras.
 Excepcionalmente las muestras pueden
conservarse a una temperatura de 4°C durante
un periodo máximo de 24 h antes de su análisis.
 Debe recolectarse entre 500 y 1000 ml. En
frascos estériles.
 Se añadirá 0,2 ml de una solución acuosa al 3%
de tiosulfato sódico por 250 mL de muestra de
agua.
ANÁLISIS DE BACTERIAS COLIFORMES

FUNDAMENTO:
Especies bacterianas pertenecientes a la familia
Enterobacteriaceae, de morfología bacilar, Gram
negativas, aerobias o anaerobias facultativas, oxidasa
negativa, no esporuladas y que fermentan la lactosa con
producción de ácido a 37°C en 24-48 horas
Géneros:
Escherichia, Enterobacter, Edwardsiella, Citrobacter,
Klebsiella, Serratia
 Escherichia coli produce dolor abdominal, diarrea,
nauseas, vómitos y fiebre.
 Klebsiella produce enfermedades respiratorias.
 Citrobacter produce alteraciones a nivel del colon y a
nivel intestinal
 Coliformes Totales y Fecales: Método NMP
Prueba Presuntiva (C. Totales)
Inoculación en caldo lauril triptosa (CLT)
35 +/- 2 °C 24-48 Hrs.

Turbidez y Producción de gas + No producción de gas

Fin de la prueba
Prueba Confirmativa (C. Totales)
Resiembra a partir de los tubos positivos del CLT

Siembra a tubos con caldo lactosa bilis
verde brillante 35 +/- 2 °C por 24 a 48
Hrs. (Turbidez y producción de gas +)
Coliformes fecales
Siembra en caldo Escherichia coli
(EC) a 44.5°C por 24 Hrs.
(Turbidez y producción de gas +)

Agar EMB, agotamiento por estría

Colonias con brillo metálico, Bacilos Gram negativos, no esporulados
E.COLI
Fin de la prueba
LECTURA E INTERPRETACIÓN
CLT: Si se observa crecimiento bacteriano con
producción de gas en 24 hrs. o antes a 35 +/- 2 °C,
indica la presencia de bacterias coliformes totales. Si
no hay desarrollo dejar incubando hasta 48 hrs.

CLBVB: Si se observa crecimiento bacteriano con

producción de gas en 24 a 48 hrs. A 35 +/- 2 °C,
confirma la presencia de bacterias coliformes totales.
EC: Desarrollo bacteriano por ser capaces de fermentar
la lactosa, con producción de ácido y de gas a 44.5 ºC,
en un tiempo de 24 a 48 Hrs. Confirma presencia de
Coliformes fecales
Agar EMB: Colonias negras o marrones con brillo verde
metálico característico debido a la rápida fermentación
de la lactosa, en un tiempo de 24 Hrs. Confirma
presencia de E. coli
Reglamento de la Calidad del Agua para Consumo
Humano. DS N° 031-2010-SA.

 Finalidad: Establece las disposiciones

generales con relación a la gestión de la
calidad del agua para consumo humano, con
la finalidad de garantizar su inocuidad,
prevenir los factores de riesgos sanitarios, así
como proteger y promover la salud y
bienestar de la población.

Reglamento de la Calidad del Agua para Consumo Humano. DS N° 031-2010-SA.

LMP PARÀMETROS MICROBIOLÒGICOS Y PARASITOLÒGICOS DE
AGUA PARA CONSUMO HUMANO

Reglamento de la Calidad del Agua para Consumo Humano. DS N° 031-2010-SA.

CONTROL DE CALIDAD MICROBIOLÒGICA
EN AGUA DE PISCINAS

Directiva Sanitaria para la Determinación del Índice de Calificación Sanitaria de las

Piscinas Públicas y Privadas de Uso Colectivo- Directiva Sanitária N° 033 -
MINSA/DIGESA – V.01, RM N° 484-2010/MINSA.Dirección General de Salud Ambiental,
Ministerio de Salud, Lima – Perú, 2011
CONTROL DE LA CALIDAD
MICROBIOLÒGICA EN AGUA DE PLAYAS

Directiva Sanitaria que Establece el Procedimiento para la Evaluación de la Calidad Sanitaria de las Playas del Litoral Peruano.Directiva Sanitaria N° 038-
MINSA/DIGESA-V.01. RM N° 659-2010/MINSA. Dirección General de Salud Ambiental Ministerio de Salud.Lima – Perú. 2011
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Jawetz, Melnick y Adelberg. 2010 Microbiologìa Clìnica. 2° edición. España.
Ed. Mc Graw Hill.
2. MINSA. 2008. Norma Sanitaria que Establece los Criterios Microbiològicos
de Calidad Sanitaria e Inocuidad para los Alimentos y Bebidas de Consumo
Humano: RM 591-2008/MINSA.
3. MINSA. 2010. Directiva Sanitaria para la Determinación del Índice de
Calificación Sanitaria de las Piscinas Públicas y Privadas de Uso Colectivo-
Directiva Sanitária N° 033 - MINSA/DIGESA – V.01, RM N° 484-2010/MINSA.
Dirección General de Salud Ambiental, Ministerio de Salud, Perú.
4. MINSA. 2010. Directiva Sanitaria que Establece el Procedimiento para la
Evaluación de la Calidad Sanitaria de las Playas del Litoral
Peruano.Directiva Sanitaria N° 038-MINSA/DIGESA-V.01. RM N°
659-2010/MINSA. Dirección General de Salud Ambiental Ministerio de
Salud. Perú.
5. MINSA. 2010. Reglamento de la Calidad del Agua para Consumo Humano.
DS N° 031-2010-SA. Perù.
6. http://sisbib.unmsm.edu.pe/bibvirtual/tesis/basic/marchand_p_e/anteced.h
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7. http://www.bvsde.paho.org/eswww/proyecto/repidisc/publica/hdt/hdt035.ht
ml