UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRO DEL

PER

FACULTAD DE INGENIERIA QUMICA

ANALISIS MICROBIOLOGICO DE AGUA

CTEDRA : ANALISIS QUIMICO CUANTITATIVO ORGANICO

CATEDRTICO : Ing. ANDRES CORSINO QUINTO

SEMESTRE : V - A

INTEGRANTES :
AUPARI GONZALES, Yordi

HUANCAYO PER
2017
ANALISIS MICROBIOLOGICO DE AGUA
 INTRODUCCIN

Debido a que un gran nmero de enfermedades son transmitidas por va fecal- oral
utilizando como vehculo los alimentos y el agua, es necesario contar con
microorganismos que funcionen como indicador de contaminacin fecal. Estos deben
de ser constantes, abundantes y exclusivos de la materia fecal, deben tener una
sobrevivencia similar a la de los patgenos intestinales y deben ser capaces de
desarrollarse extra intestinalmente.

Cuando los coliformes llegan a los alimentos, no solo sobreviven, si no que se

multiplican, por lo que en los alimentos el grupo coliforme adquiere un significado
distinto al que recibe en el agua.

Para su estudio, se dividen en dos grupos. El grupo de bacterias coliformes totales el

cual comprende a todos los bacilos Gram-negativos aerobios o anaerobios
facultativos, no esporulados, que fermentan lactosa con produccin de gas en un
lapso mximo de 48 horas a 35 C. Este grupo est conformado por 4 gneros
principalmente: Enterobacter, Escherichia, Citobacter y Klebsiella
 RESUMEN

La calidad de agua se define como el conjunto de caracteres fsicos, qumicos y

biolgicos que deben satisfacerse con el fin de que el agua que se suministra sea
segura para el fin destinado.

La contaminacin del agua por materia fecal es un factor de importancia sanitara

debido a que las heces contienen una gran variedad de microorganismos, pudiendo
contener inclusive microorganismos entero patgenos como bacterias del genero
Salmonella, Shigella y Vibrio; protozoarios como Entamoeba histolytica; virus
como enterovirus o de la hepatitis A.

Se obtuvo la muestra de agua la cual fue tomada de un pozo, se determin el Numero

Ms Probable (NMP) de microorganismos coliformes totales, coliformes fecales y
Escherichia coli.

La determinacin del nmero ms probable de microorganismos coliformes fecales se

realiza a partir de los tubos positivos de la prueba presuntiva y se fundamentan en la
capacidad de las bacterias para fermentar la lactosa y producir gas cuando son
incubados a una temperatura de 50C por un periodo de 24 a 48 horas.
 OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

Detectar si la muestra de agua contiene microorganismos como bacterias o

coliformes.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Determinar el nmero de bacterias de coliformes totales por el mtodo del

Numero ms Probable.
Conocer un mtodo sencillo para la determinacin de coliformes totales.
 MARCO TEORICO

MICROBIOLOGA DE AGUAS

El principal riesgo asociado al agua en los abastecimientos es el de enfermedades

infecciosas relacionadas con la contaminacin fecal. Por esto, en el examen
microbiolgico del agua de beber se atribuye gran importancia a la evaluacin de la
calidad higinica del abastecimiento. Para ello es necesario aislar y enumerar los
microorganismos indicadores.

MICROORGANISMOS INDICADORES.

Escherichia coli. Es un miembro de la familia de las enterobactericeas, y se

caracteriza por la posesin de las enzimas -galactosidasa y -glucuronidasa. Se
desarrolla a 44-45 C en medios complejos, fermenta la lactosa y el manitol con
produccin de cido y gas. Abunda en las heces humanas y animales, en las heces
frescas puede llegar a concentraciones de 109 por gramo, puede estar presente y
hasta multiplicarse en aguas tropicales no sujetas a contaminacin fecal humana
Microorganismos coliformes. (coliformes totales) desde hace largo tiempo, los
microorganismos coniformes han sido considerados como un indicador microbiano. El
trmino microorganismos coniforme se aplica a las bacterias Gram-negativas, de
forma de bastoncillos, capaces de desarrollarse en presencia de sales de la bilis u
otros agentes tenso activos con propiedades anlogas como inhibidores del
crecimiento.Tradicionalmente, las bacterias coniformes han venido siendo
consideradas como pertenecientes a los gneros: Escherichia, Enterobacter y
lebsiella. Sin embargo, segn los mtodos taxonometricos modernos, el grupo es
heterogeneo. Incluye bacterias fermentadoras de la lactosa, tales como Enterobacter,
Cloacae y Citrobacter freundii, que puede encontrarse tanto en las heces como en el
medio ambiente (aguas ricas en nutrientes, suelo, materia vegetal en
descomposicin), pueden multiplicarse en agua potable de una calidad relativamente
buena, por ejemplo, Serratia fonticola, Rabnella aquatilis y Buttiauxella agrestes.
Enterobacterias. La familia Enterobacteriaceae se encuentra ampliamente distribuida
en el medio ambiente. Las especies que la integran son colonizadores normales del
tracto intestinal del hombre y animales de sangre caliente.
La familia Enterobacteriaceae tiene 26 gneros:

salmonella, xenorhabdus, tatumella, morganella, citrobacter,

obesumbacterium, koserella, cedecea, klebsiella, escherichia, moellerella,
leclercia, proteus, shigella, butiauxella, pragia, providencia, edwardsiella,
yersinia, budvicia, kluyvera, hafnia, enterobacter, leminorella , ewingella,
serratia

El uso de esta familia como indicador resulta til para detectar contaminacin
posterior, en aquellos productos que han sido sometidos a algn tratamiento
tecnolgico, para evaluar la efectividad del proceso y tambin en aquellos
alimentos en los cuales no se realiza RAM (Recuento de Microorganismos
Aerobios Mesfilos Viables).

MUESTREO

El objetivo del muestreo es coleccionar una pequea porcin del material,

suficiente en volumen, para ser transportado de manera conveniente para su
manejo en el laboratorio, el cual an debe representar con exactitud el material
muestreado. Este objetivo implica que la proporcin o concentracin relativa de
todos los componentes sern las mismas en las muestras, y que el material
muestreado, debe ser manipulado de manera tal que no sufran cambios
significativos en su composicin antes de las pruebas.

Ningn anlisis de laboratorio tiene sentido si la muestra tomada no es

representativa del agua que se est examinando. Es muy raro que los
resultados de una sola muestra sean suficientes para determinar el grado de
contaminacin del agua; por lo general, es necesario tomar duplicado o
triplicado.
 MATERIAL NECESARIO:

- Utilizar frascos de vidrio neutro o plstico esterilizable de boca ancha, con tapa
rosca y cierre hermtico.

- Las botellas de boca ancha y tapa de bakelita deben secarse a 50C a 60C y
su esterilizacin slo es en autoclave.

-Las botellas de polipropileno o policarbonato son autoclavables. Las de

polietileno no.

-Capacidad: mnimo 500 mL. (100 mL. de muestra) para facilitar la

homogenizacin antes del anlisis.

CONDICIONES BSICAS PARA EL MUESTREO

Deben estar constituidos por un nmero adecuado de muestras tomadas en

para que puedan reflejar las condiciones del todo de donde proceden.

Deben tomarse con una frecuencia suficiente para que arrojen las variaciones
de la calidad de agua dentro de intervalos de tiempo prefijados. Debe realizarse
con personas competentes, para reducir.
 TABLA DE PRESERVACIN Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS

PARMETROS VOLU RECIPIENT PRESERVANTE TIEMPO

MICROBIOLGIC MEN E S
ALMACENAMIEN
OS MNIM
TO
O

Refrigerar y
100-
Coliformes Totales PoV Tiosulfato De Mximo 6 h.
500 M
Sodio*

100- REFRIGERAR
Coliformes Fecales PoV TIOSULFATO Mximo 6 h.
500 M
DE SODIO*
Recuento Total Refrigerar
100-
(Bacterias PoV Tiosulfato De Mximo 6 h.
500 M
Heterotrficos) Sodio*

NOTA: Todos los envases para la muestra microbiolgica deben ser estriles. *Se
aade Tiosulfato de Sodio slo si el agua contiene cloro residual.

PARTE EXPERIMENTAL

Materiales y equipos

1 pipeta de 9 ml
1 pipeta de 10 ml
2 matraces Erlenmeyer
tubos de ensayo
Embaces con tiosulfato
Placas patrn (para comparar)
Reactivos

Cultivo bacteriolgico
Muestra de agua

Procedimiento

Si la muestra est demasiado contaminada lo ms recomendable es

disminuir la contaminacin mediante dilucin.
La muestra debe semejarse al agua potable (claridad).
Una vez obtenida la muestra se procede a seleccionar 10 ml de agua
contaminada y se le agregan 90 ml de agua destilada.
Posteriormente se le agrega el cultivo bacteriolgico y se le agita hasta que
no quede grumos de cultivo.
Inmediatamente despus colocarlo en las placas, homogenizar y sellarlo.
Una vez sellado la placa se deja en la incubadora por un tiempo de 24 horas.
Se realiza la lectura de coliformes mediante tablas.
 CALCLOS Y RESULTADOS

RESULTADOS OBTENIDOS EXPERIMENTALMENTE EN EL LABORATORIO DE

LA MUESTRA DE AGUA (AGUA DE POZO)

La cantidad de colonias obtenidas se realiza mediante la lectura de datos

proporcionados los cuales se presentan a continuacin:

Mediante la lectura de la tabla mostrada y en nmero en la parte horizontal (8

cuadrados con colonias) y el nmero en la parte vertical (0 cuadraditos con
colonias), intersectando estos nmeros obtenemos la cantidad de coliformes totales
el cual es 8.6.
 DISCUSIN DE RESULTADOS

Muchas de las aguas de ros y pozos son contaminados con aguas de drenaje
y tuberas y que estos contienen desechos fecales tanto de animales como de
humanos, adems estas aguas no son sometidas a ningn tipo de tratamiento
para poder ser utilizadas.

Otro punto de contaminacin se puede dar debido a la mala manipulacin de

los instrumentos as como de la muestra y su transporte, ya que estos generan
focos de contaminacin.
 CONCLUSIONES

El nmero de coliformes totales obtenidos experimentalmente es:

/100 = 8.6
El mtodo presentado resulta muy sencillo y accesible para la determinacin
de coliformes la nica dificultad es la manipulacin de la muestra para que no
se contamine
Debido a la presencia de coliformes se concluye la presencia de bacterias
presentes en la muestra
 BIBLIOGRAFIA

Gaceta Ecolgica. Enero 1990. Criterios Ecolgicos de la Calidad del Agua.

CE CCA 001 / 89.
Goez Lpez, M; Vzquez Garca, M. J.; Pena Caamao, P. (1996).
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ANEXOS