UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONPMA DE

HONDURAS
CENTRO UNIVERSITARIO REGIONAL LITORAL PACIFICO

Microbiología de alimentos
Sección: 5.00-6:00pm

Aislamiento e identificación de escherichia coli presentes en aguas

comerciales santa Emilia y agua sula expendidas en el establecimiento
del Centro Universitario Regional Del Litoral pacifico

Presentado por: cuenta:

Riccy Tatiana Flores corrales 20161100044

Katerin Hernández 20162300053

Mario Hernández 20162330092

José aguilera 20142302176

Catedrático: Dr. José campos

Justificación

La calidad del agua potable es un tema de interés universal, el agua es esencial

para la vida y todas las personas deberían de disponer de un suministro
satisfactorio y de excelente calidad. Sin la seguridad de tener acceso a agua de
calidad, los humanos no podríamos sobrevivir por mucho tiempo. Las
enfermedades relacionadas con el agua están entre los más comunes malestares
como por ejemplo las enfermedades diarreicas agudas.
El proyecto de Aislamiento e Identificación de Escherichia Coli en agua
comerciales vendidas en el Centro Universitario pretende dar a conocer los
efectos dañinos que puede causar al ingerir agua contaminada con
microorganismos patógenos.
La Escherichia coli es una bacteria habitual en el intestino del ser humano y de
otros animales de sangre caliente. Aunque la mayoría de las cepas son
inofensivas, algunas pueden causar una grave enfermedad.
Es por esta razón que se tuvo el interés de realizar técnicas microbiológicas en
aguas comerciales para conocer en qué condiciones y que calidad posee el agua
que consume en el Centro Regional Litoral del Pacífico para identificar si estamos
consumiendo agua segura y libre de microorganismos que nos puedan perjudicar.
Introducción
El agua potable es esencial e imprescindible para que la vida misma sea posible
sobre la faz de la tierra, es mucho más que un bien, que un recurso, que una
mercancía, el agua potable es concretamente un derecho humano de primer orden
y un elemento esencial
El ambiente y nosotros mismos, dependemos mucho del agua, como se sabe el
agua es el elemento de la vida. El agua tal como existe, pocas veces se puede
usar en su forma natural. Se requiere conocer sus características físicas, químicas
y la naturaleza y cantidad de las sustancias disueltas o suspendidas que
contengan, para acondicionar un agua particular al uso deseado.
El control de calidad de este elemento es indispensable, ya que de ello depende la
vida, la calidad del producto que vayamos a elaborar, en pocas palabras todo.
El proyecto está destinado en dar a conocer el estado de calidad en el que se
encuentran las aguas comercializadas santa Emilia y sula en el Centro
Universitario. Mediante técnicas laboratoriales para identificar posibles
microorganismos como Escherichia coli y lo perjudicial que puede ser al ingerir
agua contaminada por microorganismos patógenos y la importancia que se debe
tener en el adecuado manejo y tratamiento de las aguas destinadas al consumo
humano.
Objetivo general
Realizar un correcto aislamiento e identificación en aguas comerciales santa
Emilia y agua sula que son vendidas mayormente en el Centro Regional Del Litoral
Pacífico para determinar la calidad que estas poseen y poder establecer un
análisis objetivo para señalar si cumplen con los estándares dependiendo de los
resultados obtenidos

Objetivos específicos
Conocer la flora microbiana que están presentes en el agua que se consume en el
centro universitario.
Analizar la calidad del agua con las técnicas de investigación microbiológicas.
Marco Teórico
Escherichia coli
Taxonomía
Dominio: Bacteria
Filo: Proteobacteria
Clase : Gammaproteobacteria
Orden: Enterobacteriales
Familia: Enterobacteriaceae
Género: Escherichia
Especie: E. coli
Es una bacteria miembro de la familia de las enterobacterias y forma parte del
microbiota del tracto gastrointestinal de animales homeotermos, como por ejemplo
el ser humano. Es un bacilo gran negativo, no exigente, oxidasa negativa, catalasa
positiva, anaerobio facultativo, cuya temperatura de crecimiento preferente es a 37
grados (mesófilo), fimbriado y comúnmente es móvil por flagelos perítricos.
E. coli es la bacteria anaerobia facultativa comensal más abundante de la
microbiota del tracto gastrointestinal en donde junto con otros microorganismos es
esencial para el funcionamiento correcto del proceso digestivo,
Escherichia coli, en su hábitat natural, vive en los intestinos de la mayor parte de
los mamíferos sanos. Es el principal organismo anaerobio facultativo del sistema
digestivo. En individuos sanos, es decir, si la bacteria no adquiere elementos
genéticos que codifican factores virulentos, la bacteria actúa como un comensal
formando parte del microbiota intestinal y ayudando así a la absorción de
nutrientes. En humanos, Escherichia coli coloniza el tracto gastrointestinal de un
neonato adhiriéndose a las mucosidades del intestino grueso dentro de pocas
horas de nacido. Desde entonces permanece en una relación de mutuo beneficio.
No obstante, estas cepas comensales pueden producir infecciones en el paciente
inmunodeprimido. Las cepas patógenas de E. coli, por el contrario, en cuanto
colonizan un huésped sano, pueden producir infecciones de diversa severidad en
el intestino, las vías urinarias, meningitis, sepsis, entre otras infecciones.
E. coli se puede aislar e identificar a partir de una muestra si se siembra en
medios selectivos bajo condiciones de esterilidad aeróbicas. Los medios selectivos
de elección son, por ejemplo, el agar MacConkey, en donde forman colonias rosas
(lactosas positivas), opacas, circulares, de 2 a 4 mm de diámetro, convexas, de
bordes enteros y suaves, y el agar eosina azul de metileno (EMB)
donde forma colonias negras verde metálico, opacas, brillantes, con un halo de
precipitado de bilis, las colonias aisladas oxidasa negativas, catalasas positivas
deben ser evaluadas por pruebas bioquímicas.
En un frotis teñido por la técnica de Gram, E. coli se presenta como bacilos
gramnegativos, con la tinción de verde de malaquita se observa que no forma
esporas, es un anaerobio facultativo, que fermenta la glucosa y la lactosa, con la
producción de ácido y gas a las 24 horas, reduce los nitratos a nitritos,
descarboxila la L-ornitina y su prueba de IMViC es ++--.
El Agua
El agua es la sustancia mineral más extendida en la superficie del globo
constituyendo en ella la hidrosfera. Existe sobre la tierra bajo tres estados: Sólido,
líquido y gaseoso. El agua es un alimento esencial para los seres vivos, la calidad
del agua puede fácilmente alterarse por la contaminación con microorganismos
patógenos que ocasionan enfermedades graves, el agua limpia y potable es
esencial para la salud pública. El agua envasada es definida como aquella apta
para el consumo humano, contenida en recipientes apropiados, con cierre
hermético sin aditivos que modifiquen sus características organolépticas
Se debe disponer de metodología para conseguir agua de calidad, así como
protocolos para valorar la efectividad de los tratamientos químicos y biológicos
empleados para la potabilización del agua.
No es practico analizar en el agua individualmente cada posible microorganismo
que pudiera estar presente.
Existen métodos generales que nos pueden señalar mediante la presencia de
bacterias “indicadoras” de calidad sanitaria.
Identificación del problema
¿El agua que se consume en el centro regional del litoral pacífico reúne las
condiciones microbiológicas para consumirla sin tener miedo a una posible
enfermedad?

Propuesta:
Para asegurar la calidad microbiológica del agua que se ingiere en el centro
universitario, se desarrollara un debido estudio y técnicas laboratoriales esto para
poder identificar que el agua que consumimos como santa Emilia y agua sula
puedan o no garantizar seguridad.
 Metodología de aplicación de la investigación
La investigación se desarrollara por el método del número más probable, donde
se comienza con la fase presuntiva, seguidamente con la fase confirmatoria que
aquí observaremos el desprendimiento de gas luego se procede a ser una asada
de los tubos del desprendimiento de gas de aquí transfiere con la asada los tubos
ec luego se transfiere una asada del caldo ec en una placa Petri lo cual se hace
por el método de frobischer se incuba de 37 grados por 24 horas luego observar
las colonias típicas de escherichia coli
PASOS:
la fase presuntiva en esta se realizará tomando 10 ml de agua santa Emilia o agua
sula, la cual se agregará en la primera serie de tres tubos con 9 ml de caldo lauril
sulfato tryptosa a doble concentración y una campana durham
Luego se transfiere 1ml de la muestra de agua a la segunda serie de tres tubos
con el caldo lauril sulfato triptosa, después se transfiere o.1ml de la muestra de
agua a la tercera serie de tres tubos con caldo concentración simple y campana de
durham
Luego incubar todos los tubos en baño maría a 37 grados durante 24 a 48 horas.
Una vez realizado esto se pasa a la fase confirmatoria
se agitan los tubos suavemente para poder observar en la campana de durham el
desprendimiento de gas luego transferir una asada de suspensión solamente de
los tubos con gas con 9 ml de caldo verde brillante lactosa bilis
anotar el numero de tubos con gas en cada serie nmp de coliformes totales según
tabla de nmp donde se obtendrá el recuento por gramos o mililitro de muestra
incubar los tubos en baño maría a 44.5 grados durante 24 o 48 horas
transferir al ismo tiempo una asada de la suspensión solamnet de los tubos con
gas a tubos con 9 ml de caldo ec se prosigue a incubar los tubos en baño maría a
44.5 durante 24 a 48 hora
observar la presencia de gas en los tubos con vglb anotar y reportar el ml de
coliformes fecales correspondientes a la tabla de seri de tres tubos
observar la presencia de gas en los tubos con ec anotar y reportar el nm de e coli
correspondiente en la tabla de serie de tres tubos
fase aislamiento e identificación
transferir un asa del caldo ec con gas en una placa de Petri con agar eosin
methylen blue sembrar por la técnica de frobischer incubar a 37 por 24 horas y
después de este tiempo observar las colonias típicas de escherichia coli

materiales a utilizar
 agua santa Emilia y sula
 lauril sulfato tryptosa
 tubos de ensayo
 incubadora
 pipeta
 puntas estériles
 placas Petri
 guantes
 mascarillas
 redecillas
 gabacha
 balanza
 1 asa de anillo
 Mecheros
 Papel toalla
 Balanza
 Masking tape
 Caldo verde brillante lactosa bilis
 Campana de Durham