BIOLOGÍA MOLECULAR DE LA CÉLULA CICLO II - 2023

CUESTIONARIO
Herramientas de la Biotecnología

1. Indique si las siguientes afirmaciones son Falsas o Verdaderas:

- La secuenciación de DNA por el método de Sanger tiene poca exactitud ( )
- La clonación de DNA se puede realizar por PCR y por la tecnología del DNA recombinante ( )
- Uno de los componentes del sistema CRISPR-Cas es un RNA mensajero de doble cadena ( )
- La clonación de DNA por ingeniería genética se utiliza para producir bibliotecas de DNA ( )

2. Indique si las siguientes afirmaciones son Falsas o Verdaderas cada enunciado:

- Los bacteriófagos, son virus que invaden a otros virus y son capaces de destruirlos ( )
- El proceso de metilación protege al DNA bacteriano de ser cortado por las enzimas de restricción ( )
- Las secuencias de DNA donde cortan las enzimas de restricción, son palindrómicas ( )
- El bacteriófago más utilizado en ingeniería genética suele ser el fago lambda ( )

3. Sobre los métodos de extracción del DNA, conteste según corresponda:

- Técnica auxiliar de separación que se utiliza durante la extracción del DNA para “eliminar” otros componentes
orgánicos __________________________________________
- Función de las sales caotrópicas en la extracción de DNA por columnas ________________________________
_________________________________________________________________________________________
- Reactivos que pueden emplearse en el paso de lisis, con el fin de extraer DNA __________________________
________________________________________________________________________________________

4. Sobre la tecnología de DNA recombinante, se puede decir que,

- los plásmidos son moléculas de DNA cromosómico bacteriano
- los insertos son moléculas capaces de autorreplicarse por sí solas
- algunos vectores contienen genes para la resistencia a antibióticos
- las enzimas de restricción no son específicas para sus sitios de corte
- un vector de clonación ha de poseer secuencias que permitan la transcripción

5. Acerca de la técnica de PCR se puede afirmar lo siguiente, EXCEPTO que,

- si alguien quiere amplificar un gen en específico, debe conocer al menos parte de la secuencia de ese gen
- la enzima polimerasa más utilizada en la técnica de PCR se conoce como Taq polimerasa, cuya T° óptima es
de 72°C
- tanto la PCR punto final, como la de tiempo real, permiten cuantificar la cantidad de DNA amplificado en el
proceso
- requiere separar las hebras de DNA, lo cual se logra en la etapa en la que se emplean temperaturas más altas
(94° - 98°)
- tanto la PCR punto final, como la de tiempo real, necesitan que en sus procesos existan ciclos de diferentes
temperaturas

6. Uno de los requisitos para clonar DNA in vivo es,

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- transformar bacteriófagos al debilitar sus membranas por medio de bacterias

- utilizar un termociclador de PCR para generar múltiples copias del ácido nucleico
- considerar que los vectores a utilizar deben llevar un sitio de origen de la replicación
- considerar el uso de vectores virales para segmentos de DNA mayores a 25 kb de largo
- utilizar enzimas ligasas para cortar el DNA del vector e introducir en su estructura el inserto

7. Acerca de la tecnología del DNA recombinante, podemos afirmar que

- utilizan dentro de sus procesos colorantes fluorescentes para detectar el DNA quimérico
- las técnicas de DNA recombinante generaron mucha información a principios del siglo XX
- los bacteriófagos llevan a cabo el proceso de transducción durante la clonación de DNA in vivo
- los tipos de insertos más utilizados en este tipo de tecnología son los plásmidos de las bacterias
- los genes de resistencia a antibióticos de un plásmido son indispensables para la expresión génica

8. Las siguientes son características de la PCR, EXCEPTO que,

- es una técnica capaz de generar múltiples copias de una secuencia de DNA (clonación de DNA in vitro)
- para poder utilizar esta técnica se debe conocer por lo menos parte de la secuencia del DNA a amplificar
- es una técnica sensible y específica que trabaja con una programación de ciclos con diferentes temperaturas
- uno de los tipos de PCR, llamada en tiempo real, utiliza sondas fluorescentes para detectar la secuencia de
interés
- la PCR de punto final, a diferencia de la PCR en tiempo real, se utiliza en muchas ocasiones para cuantificar
los resultados

9. Completar
- Nombre del conjunto de técnicas que permiten unir, clonar y multiplicar fragmentos de DNA _____________
______________________________________________
- Explique que se entiende por cDNA (ADN complementario) ________________________________________
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- Mencione dos funciones que tiene el análisis de moléculas de cDNA _________________________________
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10. Con sus palabras explique el fundamento del sistema CRISP-Cas y su importancia biomédica: