BIOLOGIA 

MOLECULAR APLICADA AL DIAGNOSTICO DE 
ENFERMEDADES INFECCIOSAS Y DIAGNOSTICO GENETICO
FLUJO DE TRABAJO EN DX MOLECULAR
COMPRENDEREMOS………..

1.‐ TOMA DE MUESTRAS
2.‐ EXTRACCION DE ADN ‐ ARN
3.‐ AMPLIFICACION DE ADN ‐ PCR (Reacción en Cadena de la
Polimerasa)
PCR PUNTO FINAL y PCR TIEMPO REAL
3.‐ ELECTROFORESIS CAPILAR
Análisis de fragmentos de ADN y Secuenciación de ADN
TOMA DE MUESTRAS
 OPCIONES DE MUESTRAS COMO FUENTE DE 
ADN

Sangre líquida con EDTA

• Sobre EDTA
• No usar HEPARINA
• Volumen de 2 a 5 ml
• Transporte en cadena de frio: 4 °C
Sangre seca sobre tarjeta FTA o papel filtro

• No requiere anticoagulante
• Cantidad 4 a 5 gotas de sangre
• Transporte a temperatura ambiente
Hisopado Bucales

• No requiere conservantes
• Es importante secar la muestra para evitar proliferación bacteriana
• Cantidad 2 hisopos por persona
• Hisopos de algodón y poliéster (video)
• Transporte a temperatura ambiente
TEJIDOS

• No requiere conservantes
• Es importante la refrigeración si es fresco como una biopsia
• Cantidad 0,5 a 2 g
• Podria ser tejido en bloques de parafina
• Transporte en cadena de frio
EXTRACCION DE ADN Y ARN PARA SU 
ESTUDIO EN BIOLOGIA MOLECULAR
COMPRENDEREMOS………..

1.‐ TOMA DE MUESTRAS
2.‐ EXTRACCION DE ADN ‐ ARN
3.‐ AMPLIFICACION DE ADN ‐ PCR (Reacción en Cadena de la
Polimerasa)
PCR PUNTO FINAL y PCR TIEMPO REAL
3.‐ ELECTROFORESIS CAPILAR
Análisis de fragmentos de ADN y Secuenciación de ADN
 EXTRACCION DE ADN?....

Se entiende por extracción de ADN al aislamiento y purificación

del ADN

 Extracción de ADN es usado para aislar…

 ADN Mitocondrial
 AND Genomico

 ADN puede ser extraido de … 

 Células o tejidos
 De otras muestras
EL ADN SE PUEDE EXTRAER DE DIFERENTES FUENTES

Sangre
Semen
Saliva
Orina
Pelo
Diente
Hueso
Tejido
 APLICACIONES DE LA EXTRACCION DEL ADN

Extraido el material genético se puede emplear para:

PCR (polymerase chain reaction)
RFLP (restriction fragment length polymorphism)
Southern Blotting 
Secuenciación de ADN
 RUPTURA DE LA MEMBRANA

Independiente del tipo de

ADN a extraer (nuclear o
mitocondrial) la extracción
implica rotura de membrana
citoplasmática, nuclear y
mitocondrial

PROTOCOLOS

• Extraer
• Purificar

Muestra pequeña
Buen resultado del análisis Muestra degradada
Muestra contaminada

INDICIOS MINIMOS……………….
TIPOS DE PROTOCOLOS DE EXTRACCION

Podemos diferenciar entre dos grupos básicos de protocolos de

extracción:

 Protocolos estándar, entre los que se encuentra la extracción

con Chelex y la extracción orgánica con fenol-cloroformo.

 Protocolos comerciales, en los que todos los reactivos

necesarios vienen en un kit.
EXTRACCION DE ADN
 Cuantificacion de ADN
1.‐ ESPECTROFOTOMETRIA

2.‐ FLUOROMETRIA

3.‐ POR PCR EN TIEMPO REAL
 EXTRACCION DE ADN ROBOTIZADA

Alta cantidad de muestras por procesar en el laboratorio

AutoMate Express™
Forensic DNA
Extraction System
Microlab STAR y NIMBUS Line
Microlab Nimbus ICL Forense
 Métodos en columna

PureLink® Genomic DNA Mini Kit - (Invitrogen™)

COMPRENDEREMOS………..

1.‐ TOMA DE MUESTRAS
2.‐ EXTRACCION DE ADN ‐ ARN
3.‐ AMPLIFICACION DE ADN ‐ PCR (Reacción en Cadena de la
Polimerasa)
PCR PUNTO FINAL y PCR TIEMPO REAL
3.‐ ELECTROFORESIS CAPILAR
Análisis de fragmentos de ADN y Secuenciación de ADN
QUE ES LA PCR
 Historia

• 1985 – se crea la técnica 
molecular conocida como 
“PCR”
• Kary B. Mullis, Coorporacion
CETUS
– Premio Nobel en Química 
1993
PCR: reacción para amplificar un segmento específico de ADN
 COMPONENTES DE LA PCR

Estabilizadores Tampon

ADN MOLDE

Nucleotidos
dNTPs
LA PCR
 Componentes del sistema de PCR: ADN molde
El ADN molde puede ser de cadena sencilla o doble, circular o lineal. En 
caso de desear amplificar una secuencia de ARN se debe utilizar 
primeramente una transcriptasa reversa.

 Deben tenerse en cuenta los posibles contaminantes

presentes en el ADN molde, que pudieran disminuir la
eficiencia de reacción:
 Urea
 SDS
 Acetato de sodio
 Agarosa
 Fenol

La cantidad de ADN molde a utilizar depende de la muestra  de partida. 
Demasiada cantidad de ADN puede inhibir la reacción de PCR.
 Componentes del sistema de PCR: cebadores

 Longitud de la región complementaria al ADN molde de

entre 18‐25pb.
 Deben ser específicos.
 No deben presentar auto‐complementariedad.
 No deben ser complementarios entre ellos.
 El contenido de G+C debe estar entre el 40‐60%.
 El Tm de los oligos no debe diferir en más de 5ºC.
 Su concentración debe ser de entre 0.1‐1μM
(concentraciones excesivas pueden dar lugar a
inespeficidad de amplificación).
 Componentes del sistema de PCR: polimerasa 
termoestable

Las ADN polimerasas termoestables presentan las siguientes 
características:
 Polimerizan en dirección 5’→ 3’.
 Necesitan de un extremo 3’‐OH libre para comenzar la
polimerización.
 Incorporan dNTPs por complementariedad en una cadena
que sirve de molde.
 Necesitan la presencia de Mg para funcionar.
 Son capaces de resistir altas temperaturas por períodos
considerables.
 Componentes del sistema de PCR: polimerasa 
termoestable
Existe una variedad de enzimas con características diferentes, según 
la finalidad de la PCR a realizar.

ADN polimerasa Vida media  A) B) C)
(95ºC)
Taq (Thermus aquaticus) 40 + ‐ ‐

Vent (Thermococcus litoralis)  400 ‐ + ‐

Pfu (Pyrococcus furiosus) 120 ‐ + ‐

Tth (Thermus thermophilus) 20 + ‐ +

A) Actividad exonucleasa 5’ → 3’.
B) Actividad exonucleasa 3’ → 5’.
C) Actividad de transcriptasa inversa.
 Componentes del sistema de PCR: solución 
buffer y MgCl

 Se utiliza un buffer Tris‐HCl, de pH 8,4 (tº amb).

 La concentración de MgCl influye directamente en la actividad 
de la polimerasa, y es uno de los parámetros a ajustar:
 Si la concentración de Mg2+ es deficiente, ↓ la eficiencia de la
enzima.
 Si la concentración de Mg2+ es excesiva, ↑ la polimerización
inespecífica.
Conc de ADN molde de partida.
La concentración ideal de MgCl  Conc. y longitud de cebadores.
varía entre 0,5‐5mM, 
dependiendo de: Long. del amplicón.
Conc. de dNTPs.
 Componentes del sistema de PCR: dNTPs

 Generalmente se utilizan concentraciones equimolares de los 
4 dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP) en concentraciones que 
varían entre  200 – 250 μM de c/u.

 Concentraciones mayores a 4mM inhiben la PCR por 
quelación de Mg2+.
 Protocolo típico de una reacción de PCR.

1º) Desnaturalización (94 – 95ºC; 5 min)

2º) Desnaturalización (94 – 95ºC; 30 seg – 1
min) Los pasos 2, 3 y 4 
constituyen un 
3º) Hibridación (tº específica para c/par de
ciclo de PCR y se 
cebadores; 30 seg)
repiten entre 25‐
4º) Elongación (72ºC; 30 seg – 3 min, 35 veces.
dependiendo del tamaño del amplicón)
5º) Elongación (72ºC, 5 min)
6) Conservacion 4°C
 Reacción en cadena de la 
polimerasa ‐ PCR
 Síntesis por DNA polimerasa

5’ 3’
 -T A C G
 -A T G C A T G C A T G C * *

Cortos primers de ADN específicos hibridizan con la cadena que 
tiene que ser copiada
 Reacción en cadena de la 
polimerasa ‐ PCR
 Síntesis por DNA polimerasa

5’ 3’
 -T A C G T
 -A T G C A T G C A T G C *
*
 Reacción en cadena de la 
polimerasa ‐ PCR
 Síntesis por DNA polimerasa

5’ 3’
 -T A C G T A
 -A T G C A T G C A T G C *
*
 Reacción en cadena de la 
polimerasa ‐ PCR
 Síntesis por DNA polimerasa

5’ 3’
 -T A C G T A C
 -A T G C A T G C A T G C * *
 Reacción en cadena de la 
polimerasa ‐ PCR
 Síntesis por DNA polimerasa

5’ 3’
 -T A C G T A C G
 -A T G C A T G C A T G C * *
 Reacción en cadena de la 
polimerasa ‐ PCR
 Síntesis por DNA polimerasa
5’ 3’
 -T A C G T A C G T
 -A T G C A T G C A T G C * *
 PRINCIPIO DE LA TECNICA DE LA PCR

1989 Kary Mullis – Premio Novel de Química 1993

1. 90 a 95 °C ADN molde
DESNATURALIZACION

2. 40 a 60 °C Taq Pol 72 °C

3.
HIBRIDACION EXTENSION
100 ADN

90 Desnaturalización 94º C

1 min
80
Primers
70

60 Extensión 72º C
1 min
50 35 ciclos
40 Hibridación 56º C

30 1 min

20
Polimerasa

dNTP
Detección
VERITTI
AMPLIFICACION EXPONENCIAL
AMPLIFICACION EXPONENCIAL

SECUENCIA
CONCENSO MENOR
Procesamiento
 Protocolo general

Ciclo desnaturalizaciónreasociación polimerización

1º ciclo 5’/94ºC
2º‐34º ciclo 1’/94ºC 2’/50ºC 3’/72ºC      
último ciclo  60’/72ºC 
Aplicaciones de la PCR

• Diagnosis de enfermedades
• Establecimiento de la huella genética
• Aislamiento de genes
• Secuenciación
• Mutagénesis
• Amplificación de RNA: RT‐PCR (trascriptasa inversa)
• Amplificación de secuencias adyacentes: PCR inversa
• PCR en tiempo real
 Pérdida de eficiencia de PCR
Fase de 
Fase lag meseta Factores que llevan a la 
pérdida de eficiencia de PCR 
luego de varios ciclos:
[ADN]

 Disminución de actividad 
de la polimerasa.
 Disminución de la 
disponibilidad de  dNTPs y 
cebadores.
 Disminución de la 
Nº de ciclo disponibilidad de Mg2+, 
para el funcionamiento de 
Fase  la enzima.
exponencial
 Tipos de PCR.

• PCR‐semicuantitativa
• PCR‐cuantitativa (PCR‐en tiempo 
real)
• RT‐PCR
• PCR‐multiplex.
• PCR‐anidada.
• PCR‐alelo específica.
 PCR cuantitativa: PCR en Tiempo Real
 Permite cuantificar el producto obtenido a partir de cada
muestra mientras se lleva a cabo la amplificación.
 El equipo se compone de un termociclador y un lector de
fluorescencia, adosados a un equipo de recolección de datos
(ordenador).

Para la cuantificación se 
establece un valor de corte 
(valor umbral) de fluorescencia 
emitida por las muestras. Una 
muestra con mayor 
concentración inicial de ADN 
blanco necesitará menos ciclos 
para alcanzar dicho valor 
umbral.
 RT‐PCR
 Se parte de una muestra de ARN.
 Se realiza primero una transcripción reversa, para obtener
DNA copia y luego se realiza la reacción de PCR.
 PCR multiplex
 Permite amplificar distintos blancos a la vez en una muestra.
 Se utilizan 2, 3 o más pares de cebadores.
 PCR anidada
 Consiste en amplificar un blanco con un par de cebadores, y en una reacción
posterior amplificar una fracción interna del fragmento previamente
amplificado.
 Aumenta la especificidad de amplificación.
 PCR alelo específica
 Se diseñan cebadores que hibridan específicamente con el alelo wild type o
con el mutado.
 Permite la identificación de individuos que presenten dos alelos normales,
de portadores de mutación, y de individuos con dos alelos mutados.
VENTAJAS

 FIDELIDAD

 SENSIBILIDAD

 ESPECIFICIDAD

 AUTOMATIZACIÓN
 APLICACIONES

 Diagnóstico (virales- bacterianas- parasitarias- micóticas)

 Enfermedades hereditarias

 Enfermedades autoinmunes

 OncologÍa

 Medicina forense

 Arqueología
 Organización del laboratorio de biología molecular

 ÁREA DE PREPARACIÓN DE MUESTRAS

 ÁREA DE AMPLIFICACIÓN

 ÁREA DE DETECCIÓN DE PRODUCTOS
 LIMITACIONES DE LA PCR CONVENCIONAL

 Intensas optimizaciones

 Baja sensibilidad

 Baja resolución

 Coloraciones no cuantitativas exactas

 Contaminación con bromuro

 No automatizado

 Necesidad de pos procesamiento de producto PCR

 Resultados no son expresados en números

PCR EN TIEMPO REAL
 COMO FUNCIONA UNA qPCR

La fluoroscencia va aumentando a manera que aumenta el producto

amplificado
PCR EN TIEMPO REAL
 PCR Fase I

Vista linear Vista log

100 1000

90 platô
80

70

60 100

50
linear
40

30 10

20
exponencial
10
0 1
1 10 20 30 40 1 10 20 30 40
ciclos ciclos
 Marcadores de DNA específico
ej. SYBR Green I

Excitación 494 nm Emisión 521 nm

 Princípio TaqMan

R
R = FAM
T T
VIC T
TET
R Q Q = donador

T A G C C T G A C G A GT A C G A C C T T A G C C T G A C G A G
A T C G G A C T G C T CA T G C T G G A A T C G G A C T G C T C A T G C T G G A A T C G G A C T G C T C

Taq Polimerase:
una enzima, con dos atividades
•5´-3´DNA Polimerase
•5´-3´Exonuclease (atividad TaqMan )
Curvas de Amplificación
COMPRENDEREMOS………..

1.‐ TOMA DE MUESTRAS
2.‐ EXTRACCION DE ADN ‐ ARN
3.‐ AMPLIFICACION DE ADN ‐ PCR (Reacción en Cadena de la
Polimerasa)
PCR PUNTO FINAL y PCR TIEMPO REAL
3.‐ ELECTROFORESIS CAPILAR
Análisis de fragmentos de ADN y Secuenciación de ADN
ELECTROFORESIS CAPILAR
DIAGNOSTICO 
MOLECULAR
 DIAGNOSTICO MOLECULAR

‐ Detección de algún componente o molécula
del patógeno:  DNA, RNA o Proteína.
‐ Se considera como diagnóstico directo.
‐ Actualmente son los sistemas de diagnóstico
con mayor especificidad, mayor sensibilidad,
y mayor rapidez.
DIAGNOSTICO DE ENFERMEDADES GENETICAS

Variación en el número de cromosomas: aneuploidias

 DETECCIÓN DE ANEUPLOIDIAS POR PCR Y ELECTOFORESIS CAPILAR

Nuestra prueba detecta al mismo tiempo los siguientes síndromes:

•Cromosoma 21: Síndrome de Down (trisomía)
•Cromosoma 18: Síndrome de Edwards (trisomía)
•Cromosoma 13: Síndrome de Patau (trisomía)
•Cromosomas sexuales X e Y:
• Síndrome de Turner: X0 (monosomía)
• Síndrome de Klinefelter: XXY
• Otras aneuploidías: XXX; XYY
Muestras: Sangre, líquido amniotico y  vellosidades corionicas

Resultados en 7 días
 PROCEDIMIENTO

EXTRACCION 
DE ADN

Amplificación Electroforesis 
capilar
Toma de 
muestras
RESULTADO POR ELECTROFORESIS CAPILAR
DIAGNOSTICO DE ENFERMEDADES INFECCIOSAS
DIAGNOSTICO DE ENFERMEDADES INFECCIOSAS

I. Detección directa del agente etiológico

- detección visual por microscopio
- cultivo del agente patogénico

Problemas / Desventajas :
- Algunos parásitos son morfológicamente indistinguibles entre sí
- escondidos entre los tejidos
- baja sensibilidad
- patógenos difíciles de cultivar,
- contaminación de los cultivos con hongos
- toma mayor tiempo para que crezcan los patógenos en cultivo.
II.  Detección indirecta por presencia de anticuerpos 

Problemas / Desventaja

‐ no discrimina infección presente o pasada
‐ reacciones cruzadas (por determinantes
antigénicos compartidos por diferentes 
microorganismos)
 Tuberculosis (Tb)

• Para el diagnóstico de la Tuberculosis se utiliza:

La baciloscopía o tinción de bacilos ácido‐alcohol resistentes (BAAR) en 
frotis de la muestra

Para confirmar la enfermedad activa, el aislamiento por cultivo de las 
micobacterias presentes en el esputo del paciente. 

• Sin embargo, estas pruebas tienen limitaciones en especificidad, sensibilidad y 
plazos de tiempo requeridos para obtener el resultado. 
 DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE TUBERCULOSIS

• Teóricamente es posible detectar desde 1 bacilo 
• Detección en muestras con baja carga bacteriana 
(paucibacilares) 
• Detección del bacilo en estadios tempranos de la infección 
• Diagnóstico de TB en pocas horas (7 a 8 horas) 
• Aumento de sensibilidad y rapidez en la detección en 
muestras extrapulmonares, facilitando un tratamiento precoz. 
• Permite hacer una detección de TB en niños, que por 
métodos tradicionales es muy dificil
• Evitar tratamientos empíricos donde los métodos 
tradicionales no son muy efectivos (TB renal, intestinal) 
 INFECCIONES RESPIRATORIAS DETECTADAS POR PORPCR EN
TIEMPO REAL

 Mycobacterium tuberculosis
 Virus sincitial respiratorio. 
 Mycoplasma pneumoniae y Chlamydia pneumoniae

Resultados en 24 a 48 horas
“DETECCION DE VIRUS DEL PAPILOMA HUMANO POR 
TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR ‐ ADN EN EL 
DIAGNOSTICO DE CANCER DE CUELLO UTERINO”
 PREVENCION DEL CACU

El cáncer cervical puede usualmente ser prevenido a

través de la detección temprana de los cambios
precancerosos.

PRUEBAS PARA SU DETECCION

 La prueba tradicional de detección para el cáncer cervical es la prueba

de Papanicolaou (prueba de Pap).

La prueba del HPV ADN es una nueva y emocionante adición a la

 prueba de Pap.
 LA PRUEBA DEL VPH?

VPH y cáncer cervicouterino

Las evidencias epidemiológicas indican que

algunos tipos de HPV son la causa principal de
cáncer invasor y de Displasia o Neoplasia
Intraepitelial Cervical (lesión precursora de
cáncer cervicouterino).

El ADN del virus ha sido detectado en un 99.7%

de tejido cervical cancerígeno y se sabe que
para que el cáncer se desarrolle, la presencia del
virus HPV es clave
 VIRUS DE PAPILOMA HUMANO (VPH)

Se ha comprobado que la causa necesaria del CACU es la infección por el Virus

Papiloma Humano (VPH), cuya principal vía de transmisión es la vía sexual.

Existe una asociación de más del 99% entre el VPH y el cáncer de cuello de útero.

Se han encontrado más de 100 tipos de VPH, de los cuales 13 son considerados de
alto riesgo oncogénico.
DETECCIÓN MOLECULAR DE HPV POR
PCR EN TIEMPO REAL
Resultados en 24 a 48 horas

Detectamos 24 
cepas de alto riesgo

16, 18
26, 30, 31, 33, 34, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 
56, 58, 59, 66, 67, 68, 69, 70 73, 82 y 97
 DETECCION DE INFECCIONES DE TRANSMISION 
SANGUINEA POR PCR EN TIEMPO REAL
o Virus de Hepatitis B (HBV) y carga viral
o Virus de Hepatitis C (HCV) y carga viral
o Genotipificación de Virus de Hepatitis C

Resultados  en 24 a 48 horas
 INFECCIONES DE 
TRANSMISION SEXUAL
DETECTADAS POR
PCR EN TIEMPO REAL

• Panel de detección de patógenos de transmisión sexual

por PCR en tiempo real: Chlamydia trachomatis, Neisseria
gonorroheae, Mycoplasma genitalium, Ureaplasma
urealyticum/parvum, Trichomona vaginalis, Gardenella
vaginalis y virus Herpes simplex tipo I y Tipo II.

• Detección de Neisseria gonorrhoeae .

• Detección de Chlamydia trachomatis

• Ureaplasma urealyticum

• Candida albicans/C.glabrata/C.krusei

Resultados en 24 a 48 horas
INFECCIONES DE GASTROINTESTINALES DETECTADAS POR PCR EN 
TIEMPO REAL

• Detección de Helicobacter pylori

• Panel de detección de virus gastrointestinales por

PCR en tiempo Real: Norovirus G1 y G2,
Astrovirus, Rotavirus, Adenovirus y Sapovirus.

• Panel de detección de bacterias gastrointestinales

por PCR en tiempo Real: Salmonella spp., Shigella
spp., Yersinia enterocolitica, Clostridium difficile,
Campylobacter coli, Campylobacter yeyuni,
Campylobacter lari, Escherichia coli
verotoxigenica y Escherichia coli enteroinvasiva.

Resultados en 24 a 48 horas
PCR EN TIEMPO REAL PARA:

Detección del virus de 
influenza A/B (H1N1, H3N2)

Resultados en 24 a 48 horas
 Panel respiratorio para detectar 24 
microorganismos: 

Influenza A, Influenza A (H1N1) swl, 
Influenza B, Rhinovirus, Coronavirus 
(NL63,229E, OC43, HKU1), Parainfluenza
(1,2,3,4) , Metapneumovirus humano 
(A/B), Bocavirus, Virus sincitial
respiratorio (A/B), Adenovirus, 
Enterovirus, Parechovirus, Mycoplasma
pneumoniae,  Chlamydia pneumoniae, 
Staphylococcus aureus, Streptpcoccus
penumoniae y Haemophilus influenzae
Tipo B

Resultados en 24 a 48 horas
DETECCIÓN MOLECULAR POR PCR EN
TIEMPO REAL

Resultados en 24 a 48 horas
 Enfermedades infecciosas y Trasplantes por PCR en Tiempo Real

 Aspergillus PCR Kit

 Virus BK/JC (BK/JC) (carga viral)
 Citomegalovirus (CMV) (carga viral)
 Virus Epstein-Barr (EBV) (carga viral)
 Virus Herpes Simplex tipo I y II (HSV-1/2) (carga viral)
 Parvovirus B19

Resultados en 24 a 48 horas
EMPLEO DEL ADN EN CRIMINALISTICA
PRUEBA DE 
ADN¡¡¡¡
 IDENTIFICACION 
DE PATERNIDAD A TRAVES DEL 
ADN
Explícame esto o 
realizaré un ADN
FUNDAMENTO DE LA PRUEBA DE ADN PARA PATERNIDAD
 PRUEBAS DE ADN CON MUESTRAS DISCRETAS

1.- Son legales?

2.- En que casos se recomienda?
3.- Es válido para tramites
judiciales?
4.- Hay consecuencias legales
para el laboratorio?
 DETERMINACION DE PATERNIDAD
CASO SENCILLO

Procedimiento:
Toma de Muestras: Supuesto Padre, madre y supuesto hijo
 Secuencia paralela, masiva o de nueva 
generación (NGS)
• La secuencia de ácidos nucleicos permite establecer el orden de los
nucleótidos presentes en las moléculas de ADN o ARN a estudiar,
razón por la cual, su uso ha aumentado en los últimos años
exponencialmente en investigaciones y laboratorios clínicos
alrededor del mundo; es así como la NGS se ha implementado
gracias a la posibilidad que brinda de realizar secuencia masiva y
paralela de millones de fragmentos del ADN y/o ARN presente en la
muestra, con el empleo de tecnología de punta, a muy bajo costo y
con un muy alto rendimiento, por lo que se pudo amplificar un
genoma completo en un solo día.
• La NGS tiene alta aplicación en estudios epidemiológicos gracias a
las ventajas ofrecidas, como es el uso de genomas completos para
establecimiento de relaciones filogenéticas entre especies,
identificación de posibles recombinaciones y marcadores
epidemiológicos que aportan a la identificación de posibles
mutaciones en una población, por ello, es considerada como una
tecnología revolucionaría en estudios epidemiológicos aplicados a
la ciencia básica, investigación traslacional, diagnóstico clínico,
agronomía, ciencia forense y ciencia aplicada.
• Este tipo de secuencia también conocida como No‐Sanger, está
disponible en diferentes plataformas o formatos que permiten la
generación de datos con ventajas y desventajas propias de cada
casa matriz.
• Ventajas: calidad de los datos obtenidos a partir de las secuencias,
la robustez y el bajo ruido presente en el cromatograma; como
desventajas se han reportado la disponibilidad de un laboratorio
con capacidad bioinformática que garantice la calidad en obtención
e interpretación de los datos.
MUCHAS GRACIAS……