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Anteproyecto de Trabajo Especial de Grado presentado a la Universidad del Zulia para optar
al título de Ingeniero Químico
Autores:
Tutor Académico:
Dra. Cateryna Aiello
Asesor:
Profa. Karina Martinez, MSc.
RESUMEN
El ácido propiónico, un ácido graso de cadena corta, y sus sales, se usan como conservadores
de alimentos desde los años cuarenta, especialmente en el área panadera por ser de los más
económicos y efectivos inhibidores del crecimiento del moho, es fundamental en la
fabricación del pan de molde, estando autorizado para ello en la mayoría de los países, debido
a que forma parte los conservadores no tóxicos según su clasificación. Esta aplicación por si
sola hace que, si se exceptúa la sal común, sea el conservador más utilizado en el mundo
(Arteaga y col., 2005).Es utilizado como aditivo en la alimentación animal y en la fabricación
de plásticos basados en celulosa, herbicidas y perfumes. Por su carácter inhibidor del
crecimiento de las células como resultado de su actividad antimicrobiana, se utiliza en las
aves de corral y otros piensos de animales para prevenir la infección de hongos (Coral,
2008).La otra aplicación importante de este producto es para impregnar exteriormente ciertos
tipos de quesos para impedir su enmohecimiento (Arteaga y col., 2005).
¿Se podrán utilizar los residuos de alimentos procedentes del comedor central de La
Universidad del Zulia como sustratos no convencionales para la producción biotecnológica de
ácido propiónico por Propionibacterium Freudenreichiia?
OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓN
Objetivo general
Objetivos específicos
JUSTIFICACIÓN
Diversas son las aplicaciones que presenta el ácido propiónico ya sea en forma de ácido o sus
sales; como conservante, herbicida, pesticida, agente de esterificación, agente antifúngico,
solvente, entre otras; que le proporcionan gran importancia a nivel comercial y una gran
demanda en el mercado mundial. La síntesis química es la vía más utilizada para la
producción a gran escala de ácido propiónico por su bajo costo y alto rendimiento sin
embargo esta a su vez genera grandes daños al ambiente, durante la síntesis química de ácido
propiónico se producen desechos tóxicos persistentes que contaminan mantos acuíferos y
suelos. A pesar que la síntesis biotecnológica de ácido propiónico genera menor impacto
ambiental, los altos costos para aplicaciones a gran escala apuntan a optimizar los métodos de
bioproducción del ácido propiónico. La búsqueda de materias primas de bajo costo y fácil
adquisición que puedan ser utilizados como sustratos fermentables, fuentes de carbono o
nitrógeno, constituye uno de los retos más interesantes de la biotecnología actual. En este
sentido, residuos de alimentos podrían ser estudiados como posibles sustratos en la
producción biotecnológica del ácido propiónico.
El ácido propiónico es conocido porque inhibe el crecimiento de las células como resultado de
su actividad antimicrobiana, así se utiliza en las aves de corral y otros piensos animales para
prevenir la infección de hongos. También es utilizado como materia prima en diferentes
industrias como intermediario en la síntesis química; ésteres de ácido propiónico se utilizan en
la industria de perfumes y propionatos de celulosa encuentra su uso como un termoplástico
importante en la industria del plástico. Sales de calcio, sodio y potasio del ácido propiónico
han sido enumeradas como conservantes que son aditivos de alimentos GRAS (generalmente
reconocidos como seguros) (Coral, 2008).
El ácido propiónico puede obtenerse de dos formas por vía petroquímica y por vía
fermentativa (Coral, 2008; Boyaval y Corre, 1995). Hoy en día el ácido propiónico es
producido principalmente por síntesis química a partir de los derivados del petróleo.
Industrialmente existen varios procesos para la producción química de ácido propiónico, estos
incluyen la reacción entre el monóxido de carbono y vapor conocido proceso de Reppe a
partir etileno; el proceso de Larson a partir de etanol y monóxido de carbono utilizando
trifluoruro de boro como catalizador; la oxidación del propionaldehído como un subproducto
del proceso Fischer-Tropsch para la síntesis de combustible; y la destilación de la madera
como un subproducto de la pirolisis. Hoy en día el proceso químico Oxo Process es la forma
más común para producir ácido propiónico en las industrias (Boyaval y Corre, 1995; Yu-
HuaLiao, 2003).
comparativo con glucosa y ácido láctico como fuentes de carbono mostraron menos
diversidad en la composición del producto final y una conversión a ácido propiónico de 17%
y 13% más baja que con glicerol respectivamente. Aumento de la concentración inicial de
glicerol resultó en un aumento de la productividad hasta (0,36 g/ lh) y en una concentración
de ácido propiónico máxima de 42 g/l, mientras que se observó una ligera disminución del
rendimiento de conversión. La velocidad de producción de ácido propiónico fue similar o
superior a los valores obtenidos con ácido láctico (0,35 g /Lh) o glucosa (0,28 g/L h). Estos
resultados demuestran que el glicerol es una fuente de carbono de interés para la producción
de ácido propiónico.
Feng y col. (2008) estudiaron el efecto del pH sobre la producción de ácido propiónico por
Propionibacterium freudenreichiia. Investigaron la formación de subproductos durante la
fermentación y propusieron una estrategia de control de dos etapas en la variación del pH para
aumentar la producción de ácido propiónico. Las fermentaciones por carga se llevaron a cabo
bajo condiciones anaeróbicas variando el pH en un rango entre 5.5 y 7.0 utilizando un
biorreactor de 7.5 l conteniendo 4.5 l del medio de fermentación. Los resultados mostraron
que a pH igual a 6 la producción de ácido propiónico es máxima (14.58g/l) y que a un pH de
6.5 el crecimiento celular es mayor (8.26g/l), entonces se aplicó una estrategia de control de
dos etapas en la variación del pH la cual consistió en mantener el pH a 6.5 durante las
primeras 48h para obtener el mayor crecimiento celular y luego de las 48h disminuir el pH a 6
para obtener una mayor producción de ácido propiónico, los nuevos valores de crecimiento
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Alicja y col. (2010) estudiaron las posibilidades de utilizar desechos industriales de glicerol y
lactosa de suero como fuentes de nutrientes en la producción microbiológica de ácido
propiónico. Se estudió la producción de ácido propiónico por Propionibacterium
freudenreichiia ssp shermanii usando glicerol puro, glicerol crudo, y lactosa de suero como
fuente de carbono en el medio de cultivo. El crecimiento celular se llevó a cabo en
fermentación por carga a 20g/l y 40g/l como concentración de la fuente de carbono. Los
resultados de los experimentos realizados mostraron que la mayor producción de ácido
propiónico se registró cuando se utilizó una concentración de 40g/l de la fuente de carbono en
el medio de cultivo. La más alta acumulación de ácido propiónico fue de 22.57g/l usando sólo
lactosa de suero, 24.47g/l usando lactosa de suero con glicerol puro y 24.80g/l usando lactosa
de suero con glicerol crudo. Fue demostrado que la fermentación simultánea de lactosa de
suero con glicerol puro o crudo no redujo el rendimiento en ácido propiónico comparado con
el uso de sólo suero como sustrato en el medio de cultivo. El reemplazo del 50% de lactosa de
suero por glicerol crudo o puro causo una acumulación más baja de ácido acético. La
reducción de este subproducto podría simplificar la extracción del ácido propiónico del caldo
de fermentación en el proceso de destilación. Los resultados indican que los desechos
industriales podrían ser un excelente sustrato para la producción de ácido propiónico.
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PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
SUSTRATO
Contenido de humedad
MICROORGANISMO
Las bacterias P. freudenreichiia deben ser activadas previamente, para esto se sembrarán en
tubos de borosilicato con medio FENG (glucosa, peptona, extracto de levadura, cloruro de
sodio, sulfato de amonio y fosfato de potasio) y se incubarán anaeróbicamente durante un
lapso de 2 a 3 días a 35°C sin agitación.
FERMENTACIONES
residuos de alimentos en base seca, con inóculos equivalentes al 10% del volumen de trabajo
(300 ml). Las fiolas se incubaran a 35ºC por 72h bajo condiciones de relativa anaerobiosis
utilizando para ello trampas de gas con agua, a dos valores distintos de pH 5.5 y 6.5
controlado por la adición de carbonato de calcio. La toma de muestras del líquido de
fermentación se realizará por intervalos de 5 horas hasta alcanzar la fase de crecimiento
estacionario, las cuales se analizarán para determinar el pH, la concentración de biomasa,
azúcares reductores, azúcares totales, contenido de ácido láctico y ácidos grasos de cadenas
cortas.
MÉTODOS DE ANÁLISIS
Después de filtrar las muestras al líquido se le determinará; el contenido de azúcares totales y
reductores, como se describió anteriormente; el pH; la concentración de ácido láctico, la
biomasa y el contenido de ácidos grasos de cadena corta se determinará según los
procedimientos descritos a continuación
Concentración de biomasa
DELIMITACIÓN DE LA INVESTIGACION
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ALCANCE
VIABILIDAD DE LA INVESTIGACIÓN
La viabilidad del trabajo especial de grado viene dada por un análisis en el que se toman en
consideración factores como las fortalezas del estudio, las oportunidades presentes para la
realización del mismo, las posibles debilidades existentes, y las posibles amenazas a la
realización del trabajo, partes que en conjunto constituyen el análisis FODA.
Fortalezas
Oportunidades
manera un proceso que genera un producto de alto valor agregado con bajos costos de
producción y amigable con el medio ambiente.
Debilidades
Las debilidades que presenta la investigación es que en el laboratorio no se cuentan con las
bacterias ácido propiónicas, por lo que se requiere de la colaboración de otros centros de
investigación dentro de La Universidad del Zulia que dispongan de ellas, para lograr su
adquisición.
Amenazas
RECURSOS HUMANOS
La ejecución del presente trabajo se realizará por parte de la Br. Melitza de los Ángeles
González Ferrer y la Br. Luisana Andrea Soto Márquez, bajo la tutoría de la Dra. Cateryna
Aiello y la asesoría de la MSc. Karina Martínez.
RECURSOS TÉCNICOS
RECURSOS FINANCIEROS
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CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES
Revisión
Bibliográfica
Parte
Experimental
Discusión de los
Resultados
Redacción
Presentación de
Tesis
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