MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE QUIMCIA ANALITICA

INSTRUMENTAL
PRACTICA #2
ANZUETH PAULINA LOPEZ MORGAN

Práctica 2. Determinación de la pureza de una sustancia

1. Objetivo
1.1. Que el alumno tenga la capacidad de diseñar una curva de calibración y la cuantificación
de una muestra de materia prima realizando las lecturas en un espectrofotómetro UV-VIS.

2. Prelaboratorio
2.2. ¿Cuál es la definición de absorbancia?
2.3. Mencione la ley de Lambert - Beer
2.5. Mencione que es un grupo cromóforo
2.6. Definición de estándar primario
2.7. Definición de estándar secundario

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PRACTICA #2
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3. Materiales, equipos y reactivos

3.1. Espectrofotómetro UV-VIS
3.2. Balanza analítica
3.3. Material básico de laboratorio
3.4. Estándar de nicotinamida de pureza conocida
3.5. Muestra problema de nicotinamida
3.6. Vaso de precipitados
3.7. Matraz volumétrico
3.8. Pipeta volumétrica
3.9. Gotero
3.10. Perilla
3.11 Espátula

4. Seguridad y manejo de reactivos y residuos

4.1. Recolectar los residuos para que sean desechados de forma segura.

5. Introducción o fundamento teórico

Algunos procedimientos analíticos requieren la comparación de una propiedad del analito (o
del producto de una reacción con el analito) con estándares o patrones tales que la propiedad
que se está probando concuerde de manera muy cercana con la del estándar. Por ejemplo, en
los primeros colorimétricos, el color producido como resultado de una reacción química de un
analito se comparaba con el color producido por la reacción de estándares. Si la concentración
del estándar se variaba por dilución, por ejemplo, era posible era posible obtener una
coincidencia de color casi exacta. La concentración del analito era entonces igual a la
concentración del estándar después de la dilución.

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En la industria se utilizan diversas materias primas para la elaboración de medicamentos,

suplementos, alimentos, etc. Todas las materias primas a usar deben contar con un grado de
pureza establecido para poder ser utilizado en el proceso de manufactura el cual puede
determinarse mediante diversos métodos analíticos como volumetría, espectrofotometría UV
– Viis, cromatografía de líquidos de alta resolución, entre otros.
La cuantificación de un analito en una muestra problema se puede realizar obteniendo la
respuesta analítica de una preparación de la muestra problema y compararla con la respuesta
analítica de una preparación de un material de referencia o estándar de concentración
conocida.

6. Desarrollo experimental
6.1. Preparar una solución de 20 μg/mL con el estándar de nicotinamida usando agua
destilada como diluente.
6.2. Preparar una solución de 20 μg/mL por triplicado con la muestra problema de
nicotinamida usando agua destilada como diluente.
6.3. Realizar un barrido en el espectrofotómetro UV-VIS en el rango UV con el la
preparación del estándar.
6.4. Determine la longitud de onda de máxima absorbancia.
6.5. Obtener la absorbancia de la preparación del estándar y la muestra problema enel
espectrofotómetro UV - Vis a la longitud de onda determinada en el punto 6.4 utilizando una
celda de cuarzo de 1 cm de ancho y agua destilada como blanco.

Preparar 3 muestras diferentes de 5𝑋10−2 𝑀

UV-VIS 300-600

1𝐿 158 𝑔
5𝑋10−2 ( ) (25 𝑚𝑙) ( ) = 0.1975 𝑔 0.1975 𝑔 → 197.5 𝑚𝑔
1000𝑚𝑙 𝑚𝑜𝑙

Preparación Peso (mg) Absorbancia Concentración (µg/mL)

Estándar 197.5 mg 0.015 5𝑋10−2
Muestra 1 197.5 mg 0.013 5𝑋10−2
Muestra 2 197.5 mg 0.011 5𝑋10−2
Muestra 3 197.5 mg 0.011 5𝑋10−2

7. Recolección de datos experimentales

7.1. Registrar la pureza del estándar, los pesos del estándar y la muestra
7.1. Completar la siguiente tabla

Preparación Peso (mg) Absorbancia

Estándar 197.5 mg 100%
Muestra 1 197.5 mg 0.013
Muestra 2 197.5 mg 0.011
Muestra 3 197.5 mg 0.011

8. Instrucciones de cálculos y resultados

8.1. Calcular la concentración de la preparación del estándar y la muestra
8.2. Calcular el % de pureza de las 3 preparaciones de la muestra
8.3. Calcular el promedio y coeficiente de variación de las 3 preparaciones de la
muestra

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Concentración
Preparación (µg/mL) % Variación

Estándar 5𝑋10−2 100% 77.7333

Promedio
Muestra 1 5𝑋10 −2
86.6% Coeficiente de
9.8783
Muestra 2 5𝑋10 −2
73.3% variación

Muestra 3 5𝑋10−2 73.3%

0.013(100%)
= 86.6666
0.015
0.011(100%)
= 73.3333
0.015
0.011(100%)
= 73.3333
0.015
9. Discusión:
En esta práctica tuvimos que tomar una dilución de la muestra que originalmente íbamos
a preparar pues estaba muy concentrada y la maquina no iba a poder leer la muestra y con ello
podríamos tener un margen de error bastante alto pues no nos iba a proporcionar los datos
certeros.
Al igual al momento de estar realizando nuestras diluciones a partir de la madre ya
comentaba anteriormente hubo algunos errores, pero a pesar de ello se obtuvo un buen resultado y
se pudo continuar con la práctica, de igual forma al calcular la valoración en un principio hubo
algunos errores algebraicos, pero como se observa se corrigió y se obtuvieron los resultados
esperados satisfactoriamente llevando a cabo un análisis de la fórmula utilizada, sustituyendo y
despejando las variables necesarias para conseguir una fórmula que nos permita calcular la
concentración con base en otra solución, sin necesidad de conocer la absortividad molar.

10. Conclusión:
Para concluir podemos decir que la practica cumplió con los objetivos planteados pues se
siguió el método experimental para calcular y obtener todos los datos de las 3 muestras dadas. Con
esto vimos la absorbancia de las 3 muestras que usamos y la comparación con el estándar que
teníamos de referencia; así como también calcular correctamente el porcentaje y coeficiente de
variación. Vimos aplicado experimentalmente los conceptos vistos de clase de absorbancia, la ley
de Lambert-Beer, los tipos de estándares que existen y que utilizamos en el laboratorio, así como
el concepto de grupo cromóforo.
Al igual decimos que un pequeño error podría cambiar todo el resultado de la practica
esperado, ya que el espectrofotómetro en su lectura es muy sensible y exacta, aunque de igual
forma comprobamos que a pesar de ello se pudo realizar los cálculos correspondientes obteniendo
un resultado adecuado.

11. Bibliografía.
11.1. Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos (FEUM) 11ª edición.
11.2. Análisis químico cuantitativo, Daniel C. Harris.
11.3. Gómez Benito, C. y Torres Cartas, S. (2017). Análisis instrumental: manual de laboratorio.
Editorial de la Universidad Politécnica de Valencia.
https://ezproxy.uag.mx:2291/es/lc/bibliouag/titulos/54082
11.4. Skoog, D., West, D., Holler, J. y Stanley, C. (2015). Fundamentos de Química Analítica. 9a
Ed. México: Cengage Learning Eds.