ANÁLISIS DE ALIMENTOS

VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS

PRESENTADO POR:

DANA MARCELA BENITE URAN

MARÍA CLARA MARTÍNEZ NISPERUZA
JUAN GABRIEL JERÓNIMO GÓMEZ
DIEGO ANDRÉS BELTRÁN SOLAR
KEILA VELLOGIN ARROYO

PRESENTADO A:

BEATRIZ ELENA ÁLVAREZ BADEL

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
SEDE BERASTEGUI

INGENIERÍA DE ALIMENTOS

2021
 TALLER 1. VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS
1. Tres laboratorios de Análisis de Alimentos, que llamaremos A, B y C,
necesitan evaluar su competencia técnica, en términos de precisión,
para la determinación del porcentaje de humedad en muestras de
alimentos. Para ello, cada uno realiza 5 determinaciones de
humedad (%) en una muestra de almendras, cuya lectura real
suponemos conocida e igual a 10 %. Los valores de humedad obtenidos
por cada laboratorio se muestran en la Tabla 1.
a. Calcule la media, el coeficiente de variación y la desviación
estándar.
b. Explique los resultados y discuta sobre la exactitud y precisión de
cada laboratorio, con base en esto seleccione el mejor.

Tabla1. Determinación de humedad obtenida por los laboratorios en

estudio

Laboratorio Humedad (%)

A 10.14 10.21 9.80 9.79 10.19
B 9.78 10.05 9.69 10.04 10.02
C 10.04 10.02 9.98 9.97 10.04

2. En un laboratorio de análisis de alimentos se desea evaluar la precisión

y la veracidad (utilizando el método de adición del patrón) de dos
métodos analíticos para la determinación de hierro en hojas de perejil,
cuyo valor de referencia es 6,5mg de hierro/100 g de muestra. Para
esto, se evaluaron muestras sin la adición de patrones y muestras a las
que se le adicionaron 0,7 mg de hierro (ver Tabla 2).
a. Determine el porcentaje de recuperación, el coeficiente de
variación y la desviación estándar de los métodos. Para estos dos
últimos parámetros utilice los datos sin la adición del patrón.
b. Como ingeniero de Alimentos encargado del laboratorio cuál de
los dos métodos escogería. Justifique su respuesta analizando los
patrones calculados.

Tabla2. Determinación de hierro (mg/100g de muestra) en hojas de perejil.

Método A Método B
Muestra Sin Con Sin Con
Patrón patrón Patrón patrón
1 5.42 5.92 6.12 6.79
2 5.79 6.39 6.08 6.68
3 6.11 6.61 6.02 6.61
4 6.02 6.67 5.97 6.62
5 5.87 6.36 6.02 6.6
6 6.05 6.61 6.12 6.76
 7 5.97 6.65 5.99 6.66
8 6.05 6.7 6.2 6.84

3. La cantidad de proteínas de un preparado enzimático, usado para la

clarificación de jugos, se determina mediante el método de Bradford, el
cual exige para la determinación del analito, la construcción de una
curva de calibración usando como patrón la albumina sérica bovina. En
la Tabla 3, se muestran los valores de absorbancia para cada una de las
soluciones preparadas con diferentes concentraciones de albumina
obtenidos por dos analistas de laboratorio.
a. Grafique las curvas de calibración en Excel, determine los
coeficientes de determinación (r2) y explíquelos.
b. Determine cuál de las curvas presenta mejor linealidad. Justifique
la respuesta.
c. De la curva no seleccionada, explique cuáles errores se pudieron
cometer por los que no se obtuvieron los resultados esperados.

Tabla 3. Datos para la construcción de curvas de calibración del método de

Bradford

Analista A Analista B
Albumin Absorbanci Albumin Absorbanci
a a a a
(mg/ml) (mg/ml)
0.02 0.0318 0.02 0.04
0.05 0.0477 0.05 0.0477
0.1 0.1028 0.1 0.1807
0.2 0.2439 0.2 0.2933
0.3 0.2936 0.3 0.2945
0.5 0.5289 0.5 0.5997
0.6 0.6225 0.6 0.6564
0.7 0.7462 0.7 0.7773
0.8 0.7895 0.8 0.7945
0.9 0.886 0.9 0.922
1 0.9565 1 0.9437

4. Si está considerando adoptar un nuevo método analítico en el

laboratorio para medir el contenido de humedad de los productos de
cereales. ¿Cómo determinaría la precisión del nuevo método? Y ¿Cómo
determinarías la exactitud del nuevo método?
 SOLUCIÓN

1.
A.

Laborator Promed Desviaci %CV

io io ón
A 10,026 0,212 2,119
B 9,916 0,169 1,700
C 10,082 0,180 1,786

B. Mediante los resultados obtenidos en la tabla anterior, los resultados

demuestran que se ha obtenido una desviación buena, al igual que el
coeficiente de variación, con ello, se puede analizar que también hubo un
buen resultado de cada laboratorio.

Respecto a la precisión estos laboratorios obtuvieron buena precisión, ya

que se obtuvieron datos menores a 5 lo cual es lo que indica que hay una
buena precisión o no gracias al coeficiente de variación, también cabe
resaltar que los resultados obtenidos brindaron una buena precisión ya
que hay dispersión de los datos y eso se debe a que la desviación es baja.
De los laboratorios evaluados el que presenta una buena exactitud o la
mejor, es el laboratorio B ya que este laboratorio, según los resultados
presenta un promedio bueno, tiene el coeficiente de variación y la
desviación más baja de los otros 2 laboratorios.

2.
a. Datos calculados.
Método A

%Recuperación Desviación estándar %CV

71,43 0,22 3,79

85,71

71,43

92,86

70,00

80,00

97,14

92,86
 Método B

%Recuperación Desviación estándar %CV

95,71 0,08 1,30

85,71

84,29

92,86

82,86

91,43

95,71

91,43

b. Como ingeniero escogería el método B ya que tiene mejor porcentaje

de recuperación por muestra, y en comparación con el otro método,
aparte muestra que todos los datos están cerca uno de otros, siendo
precisos y exactos.

3.
a. Coeficiente de determinación Analista A: 0.9948
-Coeficiente de determinación Analista B: 0.9806

Estos valores nos sirven para identificar qué tan cerca están los puntos a
la línea de la pendiente, y estos puntos entre más cercanos sean o entre
más se alineen en la pendiente, quiere decir que hay una correlación
más exacta y precisa de los valores de absorbancia correlacionados con
los valores de concentración.

b. La curva con mejor linealidad es la del Analista A, porque existe una

mejor proporcionalidad entre la concentración del analito y la respuesta
del método en el rango de concentraciones. El coeficiente del Analista A
es de 0.9948, por lo tanto, es el que más se acerca a 1, es decir se
acerca bastante a la unidad, lo cual es una buena curva patrón para
interpolar los valores y determinar la concentración de proteínas de una
mejor manera.

c. De la curva no seleccionada, es decir, la B, podemos decir que no se

obtuvieron los resultados esperados quizá por algunos errores que se
presentan con este método, como lo son: el complejo proteína-colorante
formado puede unirse a las celdas de cuarzo, el color puede variar con
diferentes tipos de proteínas, incapacidad de apreciar con exactitud el
cambio de color en la valoración, la proteína estándar no se seleccionó
con el cuidado adecuado y posibles interferencias con detergentes.
4. La validación de un método es un proceso donde se demuestra que los
procedimientos analíticos cumplen con los requisitos para las
aplicaciones analísticas previstas, para empezar a hacer la validación de
un nuevo método, lo primero que se debe tener en cuenta es que el
método debe estar normalizado y documentado , se deben definir las
condiciones (el equipo, los reactivos, el muestreo) y también es
importante establecer las características de desempeño que se evaluaran
( linealidad, especificidad, límite de detección, límite de cuantificación,
precisión y exactitud) También hay que tener en cuenta las
características de desempeño analítico habituales para comparar con los
resultados obtenidos con el nuevo método.