Bioquímica – Clase 06

Enzimas. Importancia,
Propiedades y Clasificación.
Cinética. Factores que
afectan la actividad
enzimática. Inhibición
enzimática.
Mg. T.M. Rosa Luz. Carrillo Atahualpa
Enzimas
• Catalizadores de las reacciones biológicas.
• La mayoría son proteínas, aunque hay
moléculas de RNA con actividad catalítica
(ribozimas).
• Gran poder catalítico.
• Alto grado de especificidad.
• Actúan en soluciones acuosas a 37°C y pH
neutro.
• Su actividad puede regularse.
• El 25% de los genes humanos codifican
enzimas que catalizan reacciones
metabólicas.
CARACTERISTISTICAS:
Especificidad Enzimática
•Especificidad de sustrato: Cada enzima puede convertir solamente un sustrato en particular.
Esto se basa en el modelo de "ajuste inducido", en el que el sitio de unión de la enzima cambia
para adaptarse a un sustrato concreto.
•Estereoespecificidad: Los sustratos deben ser un isómero específico (e.g., la lactato
deshidrogenasa solamente puede convertir el L-lactato en piruvato y no su imagen especular, el
D-lactato).
•Especificidad de grupo: Las enzimas reaccionan con un grupo químico específico (e.g., un grupo
amino) situado en el sustrato.
•Especificidad de la reacción: Cada enzima solamente puede catalizar un tipo específico de
reacción (e.g., la hidrólisis)
LA BETA GLUCOSIDASA
La mayoría de las enzimas son de naturaleza proteica a excepción de los ribozimas
que son Moléculas de ácido ribonucleico
Catálisis enzimática
Catálisis enzimática

La energía necesaria
para para transformar
un sustrato en
productos se denomina
Energía de activación

El tiempo que demora en transformar un sustrato en producto se denomina

Tiempo de Reacción
 Energía de activación
La energía de activación es la cantidad de energía necesaria para que los
reactantes inicien la formación de productos. Las enzimas disminuyen
considerablemente esta energía resultando un ahorro energético:

Energía de
activación Energía de
sin enzima activación
sin enzima

Energía de
activación
con enzima
Energía de
activación
con enzima
Las enzimas actúan como biocatalizadores, es decir aceleran las reacciones
químicas en los seres vivos.
Las enzimas no son consumidas por las reacciones que
catalizan, ni alteran su equilibrio químico.
Importancia de las Enzimas

• Cada paso de una vía metabólica está

catalizado por un enzima.
• La medida de la actividad enzimática
en fluidos biológicos o tejidos es
importante para el diagnóstico de
muchas enfermedades.
• Muchos fármacos son inhibidores de
la actividad enzimática.
• Importancia en la industria de
alimentación y agricultura.
 IMPORTANCIA:
 Las enzimas son complejos biocatalizadores proteicos que
aceleran las reacciones químicas sin consumirse.

 Debido a las constantes necesidades metabólicas del

organismo, la ausencia de enzimas haría insostenible la vida,
ya que las reacciones se producirían con demasiada lentitud
sin estas moléculas.

 Las enzimas tienen muchas funciones, como la degradación y

la síntesis de macromoléculas (catabolismo y anabolismo), la
transducción de señales, la generación de energía (adenosina
trifosfato), las bombas de iones/transporte activo, las
reacciones de defensa y degradación (oxidación, reducción,
hidrólisis), la regulación celular, el movimiento (miosina
ATPasa, transporte de sustancias intracelulares) y las
respuestas inmunitarias.
AST - TGO

ALT - TGP
 • Otros un componente adicional
Que necesita el llamado COFACTOR:
enzima para • Pueden ser iones inorgánicos
actuar…

Algunas solo requieren SI SON ….

sus residuos aminoácidos

• Molécula orgánica
• Metaloorgánica

•COENZIMA
 Cofactores inorgánicos
Un tercio de las enzimas requieren algún ión metálico para catalizar
Cofactores enzimáticos
Sustancias de naturaleza química diferente a la proteínas que son requeridas por algunas
enzimas para que estas tengan actividad. Pueden ser inorgánicas u orgánicas
 Cofactores orgánicos
Caracteristicas y funciones de las principales coenzimas
S
Definiciones

• Apoenzima: parte proteica de la

enzima (no activa).
• Cofactor: necesario para la actividad
enzimática. Pueden ser iones
metálicos o una molécula orgánica,
denominada coenzima. Si el cofactor
está unido fuertemente al enzima se
denomina grupo prostético.
• Holoenzima: apoenzima + cofactor.
Enzima activa.
 Centro activo
• Zona de la enzima que se une al sustrato, presenta:
Zona de fijación: esta constituido por una serie de aminoácidos que permiten la adhesión del sustrato.
Zona de catálisis: Secuencia especifica de aminoácidos catalíticos que interaccionan con el sustrato para que
este pase al estado activado
Modelos para entender la función enzimática
• Existen 2 modelos principales que ayudan a
explicar cómo funcionan las enzimas:
• Modelo de cerradura y llave de Fischer (modelo
antiguo):
• Postula que el sustrato encaja en el sitio de
unión de la enzima como una llave que
encaja en una cerradura
• Describe la especificidad del
antígeno/sustrato a la enzima, pero no
cómo funciona la catalización real
Modelo del ajuste inducido de Koshland (modelo
más nuevo):

• Postula que el sitio de unión de la

enzima está cerca de encajar, pero
no perfectamente, con el sustrato
• Esto significa que cuando el
sustrato se une, existe un ligero
cambio conformacional en la
enzima → la tensión se almacena
como energía potencial
• Esta tensión/energía luego actúa
sobre el sustrato, provocando que
ocurra la reacción.
 Nomenclatura
• Código de la Nomenclatura de
Enzimas (enzyme comission) de la
Unión Internacional de Bioquímica y
Hay varios criterios mediante los cuales Biología Molecular (UIBMB).
se han asignado los nombres de las
enzimas:
• Nombres particulares.
• Nombre sistemático.
Transferencia de equivalentes de reducción (1 mol de electrones); el donante de electrones se
oxida y aumenta su carga, el receptor de electrones se reduce y disminuye su carga
Transferencia de grupos enteros (e.g., grupos aminos)
Escisión molecular con adición de agua = escisión hidrolítica
Romper enlaces entre 2 carbonos, o un átomo de carbono y oxígeno, o carbono y azufre
Conversión de moléculas isoméricas entre sí sin cambiar la fórmula molecular
También llamadas sintetasas, enlace de compuestos dependiente de la energía (e.g.,
dependiente del adenosín trifosfato)
Funciones de las Enzimas.
• Catálisis. las enzimas aceleran las
reacciones permitiendo que el
metabolismo se efectúe a la velocidad
que las células requieren.

• Dirección. Las enzimas no permiten

la formación de productos
secundarios, de esta manera evitan
que se pierdan precursores y energía
que la célula necesita; esta
característica también se conoce
como catálisis negativa.

• Control. La actividad de las enzimas

se puede regular para ajustarla a las
necesidades del metabolismo. La
velocidad del metabolismo es
determinada por las enzimas
La energía de activación es la
cantidad de energía
necesaria para que los
reactantes inicien la
formación de productos. Las
enzimas disminuyen
considerablemente esta
energía resultando un
ahorro energético
Factores que afectan la actividad
enzimática

• La actividad enzimática puede verse afectada por diversos factores, como

temperatura, pH y concentración de iones, presencia de inhibidores, etc.
• Las enzimas funcionan mejor dentro de rangos de temperatura y de pH específicos,
y bajo condiciones que no son las óptimas una enzima puede perder su capacidad
de unirse a un sustrato.
Factores que modifican la actividad enzimática
Temperatura

• Al aumentar la temperatura
generalmente se acelera una reacción,
y al bajar la temperatura la hace más
lenta.
• Sin embargo, temperaturas
extremadamente altas pueden causar
que una enzima pierda su forma (se
desnaturalice) y deje de trabajar.
pH

• Cada enzima tiene un rango óptimo

de pH. Cambiar el pH fuera de este
rango hará más lenta la actividad de la
enzima.
• Valores de pH extremos pueden
causar la desnaturalización de la
enzima.
Factores que modifican la actividad enzimática

Pérdida del
estado iónico de
la enzima
Concentración del substrato
• Aumentar la concentración de
sustrato también aumenta la
velocidad de reacción hasta un cierto
punto.
• Una vez que todas las enzimas se han
adherido, cualquier aumento de
sustrato no tendrá efecto alguno en la
velocidad de reacción, ya que las
enzimas disponibles estarán saturadas
y trabajando a su máxima capacidad.
Factores que modifican la actividad enzimática
Concentración del sustrato
La actividad de las enzimas se incrementa hasta la saturación de las moléculas, después
permanece constante

Después de que se alcanza esta velocidad, un aumento en la

concentración del sustrato no tiene efecto en la velocidad de
la reacción. (todos los enzimas están ocupados)

A medida que aumenta la concentración de sustrato,

aumenta la velocidad de reacción (mientras queden
enzimas libres).
 V Máxima.
velocidad que obtendríamos cuando todo la
enzima se encuentra unido al sustrato

Constante de Michaelis-Menten (Km).

Es la concentración del sustrato a la cual la
velocidad de reacción es la mitad de la
velocidad máxima.
El valor de Km da idea de la afinidad de la enzima por el sustrato: A menor Km,
mayor afinidad del enzima por el sustrato y a mayor Km, menor afinidad.
Concentración de la enzima

• Aumentar la concentración de la
enzima acelerará la reacción, siempre
que se disponga de sustrato al cual
unirse.
• Una vez que todo el sustrato esté
adherido, la reacción deja de
acelerarse, puesto que no hay algo a
lo que las enzimas adicionales se
puedan unir.
Cinética enzimática
 Etapas del proceso enzimático

En primer lugar, el sustrato (S) y la enzima (E) se unen y forman un complejo enzima-sustrato (ES).
Una vez formado el complejo ES, este o bien se disocia en enzima más el sustrato o se transforma el
sustrato en producto formado el complejo enzima-producto (EP), que se disocia para dar enzima (E) más
producto (P).
En este esquema, k1, k-1 y k2 son las constantes cinéticas individuales de cada proceso y también reciben el
nombre de constantes microscópicas de velocidad. Según esto, podemos afirmar que:
v1 = k1 [E] [S]
v2 = k-1 [ES]
v3 = k2 [ES]
Cinética enzimática
• La cinética enzimática estudia la velocidad de las
reacciones catalizadas por enzimas.
• Estos estudios proporcionan información directa
acerca del mecanismo de la reacción catalítica y de la
especificidad del enzima.
• La velocidad de una reacción catalizada por un enzima
puede medirse con relativa facilidad, ya que en
muchos casos no es necesario purificar o aislar el
enzima.
• La medida se realiza siempre en las condiciones
óptimas de pH, temperatura, presencia de cofactores,
etc, y se utilizan concentraciones saturantes de
sustrato.
• En estas condiciones, la velocidad de reacción
observada es la velocidad máxima (Vmax).
• La velocidad puede determinarse bien midiendo la
aparición de los productos o la desaparición de los
reactivos.
Cinética enzimática

• Para estudiar la cinética enzimática se mide el efecto de la

concentración inicial de sustrato sobre la velocidad inicial de
la reacción, manteniendo la cantidad de enzima constante.
• Si representamos v0 frente a [S]0 obtenemos una gráfica
como la de la Figura de la derecha.
• Cuando [S]0 es pequeña, la velocidad inicial es directamente
proporcional a la concentración de sustrato y, por tanto, la
reacción es de primer orden.
• A altas [S]0, la enzima se encuentra saturada por el sustrato, y
la velocidad ya no depende de [S]0. En este punto, la reacción
es de orden cero y la velocidad es máxima (Vmax).
• Una reacción de segundo orden es aquella en la que la
velocidad de formación del producto depende de la
concentración de dos sustratos.
 Las reacciones enzimáticas se clasifican en: reacciones de orden cero, primer orden,
segundo orden y tercer orden dependiendo de cómo la velocidad de reacción es
influenciada por la concentración de los reaccionantes o sustratos.

En una reacción de orden cero, la velocidad de En una reacción de primer orden la velocidad de
formación del producto es independiente de la formación de los productos es directamente
concentración de sustrato: v = k proporcional a la concentración del sustrato: v = k [A]

Una reacción de segundo orden es aquella en la que la velocidad

de formación del producto depende
•de la concentración de dos sustratos (como en una reacción de
condensación): v = k [A1] [A2]
•del cuadrado de la concentración de un único sustrato (reacción
de dimerización): v = k [A]2
Inhibidores
Inhibición enzimática
 Inhibidores no competitivos
VELOCIDAD DE LA REACCIÓN

CONCENTRACION DEL SUSTRATO

 Inhibición no competitiva.
sustrato

Enzima activa

Sin inhibidor

Los inhibidores alostéricos

se unen a una zona de la
enzima y cambian la Enzima inactiva
configuración del centro
activo de tal manera que
impiden que el sustrato
se pueda unir a él. con inhibidor

inhibidor
 Inhibidores competitivos

VELOCIDAD DE LA REACCIÓN

CONCENTRACION DEL SUSTRATO

Inhibición competitiva.
 Inhibidores acompetitivos
Un tercer grupo de inhibidores son aquellos que se unen al complejo enzima sustrato y no
a la enzima libre. El resultado de este tipo de inhibición e
Km aumenta. s que la V máx disminuye y la
VELOCIDAD DE LA REACCIÓN

Los inhibidoes acompetitivos

CONCENTRACION DEL SUSTRATO
Efectos cinéticos de la inhibición