CARRERA MEDICINA

SEMESTRE 3er SEMESTRE

PARALELO 107
MATERIA MICROBIOLOGÍA
NOMBRE ADHEMIR JAVIER RIOS MONTES

MEDIO DE CULTIVO

1. OBJETIVO

Aprender las técnicas de preparación de medios de cultivo de diferentes clases y

su forma de esterilización.

2. INTRODUCCIÓN
La esterilización es el proceso de destrucción de toda vida microbiana. El
término estéril es absoluto. El proceso de esterilización remueve todos los
microorganismos que pueden estar presentes en los materiales y medios de
cultivo. Se puede esterilizar por varias vías: con el uso de agentes físicos (calor),
radiación, filtración o agentes químicos (desinfectantes). Se debe tener en
cuenta el tipo de material y medio de cultivo para aplicar un tipo de esterilización
adecuado, este dependerá de la sensibilidad térmica de los materiales. Todos
los medios de cultivo deben estar perfectamente estériles para evitar la aparición
de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el
crecimiento microbiano normal del o de los especímenes inoculados en dichos
medios.
El sistema clásico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que
utiliza vapor de agua a presión como agente esterilizante) aplicando120°C por
15-20 minutos a un presión de 5 atmósfera.
MEDIOS DE CULTIVO
Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos
es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en
el laboratorio. Un medio de cultivo es un sustrato estéril que contiene elementos
 inhibitorios o nutricionales que permiten o regulan el crecimiento y la
multiplicación bacteriana. El crecimiento de los microorganismos es el
Cultivo. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de
crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo
contaminante. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de
cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura,
grado de humedad y presión de oxígeno adecuado, así como un grado correcto
de acidez o alcalinidad. El agar es un elemento solidificante muy empleado para
la preparación de medios de cultivo. Se licúa completamente a la temperatura
del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas
excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es
atacado por aquellas que crecen en él.

Clasificación de medios de cultivo

Según el estado físico, que depende de la concentración de agar en la
composición del medio de cultivo, se clasifican en:
 Solidos 1-2% agar
 Semisólidos 0,2 – 0,5 % agar
 Líquidos 0%

3. MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS

 Pipetas
 Cajas petri
 Frascos para medios de cultivo (autoclavables)
 Autoclave
 Balanza
 Espátulas
 Medios de cultivo
 Agua destilada
 Papel madera
 Papel filtro
 Guantes.
4. PROCEDIMIENTO
 Preparar los medios de cultivo deshidratados, siguiendo
estrictamente las indicaciones del fabricante
 Pesar e hidratar con la mayor exactitud posible durante la disolución,
cubrir la boca del matraz con papel madera y algodón (evita la formación
de espuma y el derrame del medio)
 Disolver completamente el medio, evitar quemar la parte inferior
del recipiente.
 Colocar la tapa del frasco autoclavable
 Esterilizar en autoclave.
DISTRIBUCIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO
 Preparar un área estéril (mesa, alcohol, mechero)
 Marcar las cajas petri (en la base) y tubos de cultivo. Indicaciones
generales: medio de cultivo, grupo de trabajo, fecha.
 Distribuir suavemente el medio de cultivo, a temperatura óptima (45°C)
Cajas petri: 15-20 ml aproximadamente.
 Una vez solidificados, proteger de la humedad cubriéndolos con folias de
papel madera debidamente rotuladas en las cajas petri de vidrio: colocar
una sobre otra en grupos de 4-6 cajas.
 Almacenar en refrigeración.