UNIVERSIDAD TÉCNICA

PARTICULAR DE LOJA
La Universidad Católica de Loja

PREPARACIÓN Y ESTERILIZACIÓN DE MATERIALES Y MEDIOS DE

CULTIVO
Sigcho Wagner, Samaniego Armijos Erika Michelle
emsamaniego3@utpl.edu.ec

RESUMEN
La presente practica se realizó en el laboratorio de Microbiología de Alimentos, en el cual se

efectuó la preparación y esterilización de medios de cultivo. Cabe mencionar que los

microorganismos no pueden estudiarse como individuos, sino es necesario manejarlos por

población, por ende, resulta indispensable manipularlos mediante medios de cultivos que

permitan que se reproduzcan en condiciones necesarias.

INTRODUCCIÓN
Primeramente, conozcamos que es un medio de cultivo, Un medio de cultivo es una técnica de
laboratorio que consta de un gel o una solución que contiene los nutrientes necesarios para permitir,
en condiciones favorables de pH y temperatura, el crecimiento de virus, microorganismos, células,
tejidos vegetales o incluso pequeñas plantas. 

Consecuentemente se desarrollará los distintos medios cultivos de acuerdo a las etiquetas del
contenedor de las mismas, ya que estas nos indican como es la preparación cada medio de cultivo se
prepara distintamente. Debido que en cada uno se desarrollaran microorganismo distinto, con
distintas necesidades.

OBJETIVOS

• Preparar medios de cultivo líquidos y sólidos

• Conocer los fundamentos de la esterilización

MATERIALES Y REACTIVOS
Cajas de cultivo de 10ml Matraces
Probeta Mechero Bunsen
Mechero Espátula
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Autoclave Agar rojo bilis violeta

Manta de calentamiento Agua destilada

METODOLOGÍA
Para la presente practica se utilizó el Agar Plate Count, Para ello se utilizó la balanza

analítica y se procedió a pesar 5,8g del agar, posterior a ello se coloco 140ml de agua

destilada y se puso en un recipiente de vidrio para ser homogenizado, se agito y se ubicó

sobre la manta de calentamiento hasta llegar al punto de ebullición, una vez que obtuvimos la

homogenización del agar se deja enfriar hasta alcanzar una temperatura aproximada de 25ºC

y finalmente se procedió a distribuir 25ml en cada caja Petri, cabe señalar que para la

distribución del agar se debe prender los mecheros bunsen y esterilizar con alcohol el espacio

que será utilizado para el procedimiento mencionado.

RESULTADO

Correcta aplicación de métodos para la preparación de métodos de cultivo.

Se obtuvo un medio gelificado, que nos indica que se encuentra listo para el cultivo de la
bacteria o microorganismo a crecer, al ser un medio sólido solo requiere un correcto estriado
para su cultivo. Tomando en cuenta que nos facilitar el contaje de microorganismo por
colonias por lo que no permite que los microorganismos se muevan manteniéndose en su
lugar.

IMPORTANTE: Tomar en cuenta al momento que después de colocar el agar en la caja Petri,
esta no se la debe cerrar sino, se la debe dejar entre abierta para que el valor pueda ser
expulsado y no forme humedad dentro de la caja petri.
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CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

Mediante la presente practica se logro conocer el procedimiento necesario para la

elaboración de medios de cultivo, así mismo se identifico los diferentes tipos de agares

(básicos, diferenciales y selectivos) los cuales nos ayudaran al estudio de los

microorganismos presentes en los alimentos.

Se recomienda tener una correcta manipulación de los equipos del laboratorio y tomar en

cuenta las condiciones generales que se indican en las etiquetas para la preparación de los

medios de cultivo.

BIBLIOGRAFÍA

ANEXOS

Figura 1. Homogeneización de Figura 2. distribución del agar en

medios de cultivo. cajas Petri.
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1. Fundamento de la esterilización por vapor húmedo

Al aplicar a un determinado material vapor de agua a una presión de 15 lb (121ºC) por un
tiempo determinado, se produce la destrucción total de los microorganismos viables
presentes en el mismo. (Gutiérrez, 2008)

2. Indicar que controles se utilizan para comprobar la temperatura de las

autoclaves.
Las etiquetas de temperatura son instrumentos que contienen una serie de indicadores
sensibles al calor. Estas pueden ser de dos tipos: reversibles e irreversibles. Las primeras
pueden cambiar según sea necesario para indicar la temperatura actual y es posible
utilizarlas varias veces. En el caso de las segundas, se trata de sensores autoadhesivos con
varios pequeños indicadores sellados y resistentes al calor que se tornan de color negro al
alcanzar la temperatura indicada en la etiqueta. Al realizar un cambio permanente, nos
permiten comprobar la temperatura alcanzada durante la esterilización. (Surisa, 2018)

3. Que información ofrece la etiqueta de un medio de cultivo

La etiqueta de un medio de cultivo suele proporcionar información importante sobre la composición
del medio y las instrucciones para su preparación y uso. Algunos de los datos que suelen incluirse en
la etiqueta son

Nombre del medio: El nombre del medio de cultivo específico para identificar el tipo de medio que
se va a utilizar.

Información: para la adaptación del tratamiento antimicrobiano.

4. Como se prepara un medio de cultivo

La preparación de los medios a partir de formulaciones comerciales deshidratadas debe realizarse
siguiendo las instrucciones del fabricante. La formulación de ingredientes básicos, como peptonas,
extractos de levadura, agar, sustancias amortiguadores y antibióticos, se modifica hasta alcanzar la
consistencia del medio. Se disuelve en agua destilada la cantidad requerida de medio deshidratado o
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de cada uno de los ingredientes mediante agitación continúa seguida de calentamiento, si es preciso.
Los medios que contienen agar deben empaparse adecuadamente con la agitación apropiada antes
de calentar. El pH debe ajustarse, y el medio dispensarse en los recipientes apropiados para
esterilización con calor húmedo en un autoclave. Las sustancias termo sensibles (proteínas, enzimas)
se esterilizan utilizando membranas de filtración.

Los medios de cultivo deben almacenarse a las temperaturas especificadas para evitar que se
modifique su composición, y no más allá del periodo de validez del producto. La preparación y la
conservación asépticas son esenciales para proteger los medios de cultivo de la contaminación
microbiana. La pérdida de agua durante el almacenamiento puede reducirse al mínimo utilizando un
envoltorio impermeable o almacenando a 5 °C ± 3 °C. La degradación química, por ejemplo, la
oxidación o la pérdida antimicrobiana, puede retrasarse mediante protección contra la luz, el calor y
la deshidratación.

Bibliografía
Gutiérrez, S. (2008, October). ESTERILIZACIÓN POR CALOR HÚMEDO.
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Esterilizaci
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Surisa. (2018). Temperaturas y tiempos medios para un autoclave de esterilización - sensores-

temperatura.com. https://www.sensores-temperatura.com/es/otros-sectores/temperatura-
autoclave-esterilizacion

Manual Ortega, Y; Quevedo F. 1991. Garantía de la Calidad de los Laboratorios de Microbiología

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RAFÍA Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992. Microbiología. Manual de Métodos Generales (2da
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