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Preparacin de un medio

de cultivo bacteriano
Presentado por:
Juan Jos Osorio Buitrago
Mateo Celi Hurtado
Natalia Chamorro Solrzano
Yimmi Pinto Valencia

introduccin
Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de
microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias
artificiales preparadas en el laboratorio.
El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el medio
de cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el cultivo.
debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de
humedad y presin de oxgeno adecuadas, as como un grado correcto de
acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y
factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante.

Conocer los diferentes constituyentes de los nutrientes que las


bacterias necesitan para su crecimiento.
Clasificar los medios de cultivo, segn: el estado fsico, la naturaleza
de sus constituyentes y los propsitos de uso.
Comprender las formas de preparacin de los diferentes medios de
cultivo y su aplicacin.
Conocer el uso adecuado del microscopio ptico.

Procedimiento a seguir
La practica de laboratorio se llev a cabo de la siguiente forma:
Se prepararon 250 ml de medio de cultivo nutritivo , que estaba conformado por :
1.5 gramos de triptena de soya
0.75 gramos de Agar agar
Se agreg la muestra a un Erlenmeyer de 500 ml y se le adicion agua destilada
necesaria para un volumen de 50 ml para obtener una mezcla homogenizada.

Imagen 1. Erlenmeyer con medio de


cultivo en preparacin.

Se tap el medio de cultivo y este se llev a autoclave durante 20


minutos.
Se verti el medio de cultivo en dos cajas de Petri, 20mL a cada una,
en un lugar previamente esterilizado.
Se dej solidificar el medio de cultivo, y se llevaron las cajas de Petri
que lo contenan a la incubadora. All, se invirtieron y se guardaron.

Imagen 2. Medio esterilizado

resultados
El medio de cultivo de la caja de Petri nmero uno se vio afectado , ya
que al haberse invertido esta al momento de verter all el agar, se
present una congelacin y no se conserv de manera adecuada para
cultivo de bacterias.
El medio de cultivo de la caja de Petri nmero dos, no se vio afectado
por factores externos, ni de errores en el procedimiento. Por tanto, este
medio de cultivo, present textura suave y gelatinosa.
Imagen 3. Cajas de Petri con medios
de cultivo.

Discusin
Para que se utiliza un medio slido? Es utilizado para inhibir el movimiento celular,
permitindoles crecer de forma aislada visible (Colonias). La textura slida se da por
la adicin de agar gelificante. (Madigan et al., 2004).
Por qu es fundamental el medio de cultivo para el crecimiento y desarrollo de las
bacterias?
El medio de cultivo es fundamental porque suministra los nutrientes y condiciones
especiales, necesarios para que se d un correcto desarrollo de los microorganismos.
Para preparar un medio de cultivo apto es necesario que se encuentre en un medio
estril para que no se contamine de agentes del medio externo o de los materiales
que puedan desarrollarse y alterar las pruebas.

Un medio de cultivo adecuado para la investigacin


microbiolgica ha de contener, como mnimo, carbono,
nitrgeno, azufre, fsforo y sales inorgnicas. En muchos
casos sern necesarias ciertas vitaminas y otras sustancias
inductoras del crecimiento.

El medio de cultivo debe oscilar entre 35-37C adems, se debe


proporcionar una fuente adecuada de agua que mantenga la humedad
necesaria para el crecimiento de los cultivos y evitar as que se deseque
el medio. Los microorganismos mesfilos crecen de forma ptima a
temperaturas entre 15 y 43C. Otros como los psicrfilos crecen a 0C y
los termfilos a 80C o incluso a temperaturas superiores
(hipertemfilos). En lneas generales, los patgenos humanos crecen en
rangos de temperatura mucho ms cortos, alrededor de 37C

Dado que los microorganismos son ubicuos, los medios de cultivos debe
ser esterilizados antes de usarse. Para la mayora de los medios de
cultivo estos se realiza por calor, habitualmente mediante calor hmedo
en un gran recipiente a presin.
Fase de purgado: A medida que la resistencia calienta el agua del fondo
del caldern, se va produciendo vapor que desplaza el aire, hacindolo
salir por la vlvula de purgado que est abierta. Esta fase termina
cuando se alcanza la temperatura de esterilizacin. (Gnzalez et. al.,
2012)

Fase de esterilizacin: Una vez cerrada la vlvula de purgado y


alcanzada la temperatura de esterilizacin previamente seleccionada se
inicia el proceso de esterilizacin.
Fase de descarga: Terminado el proceso de esterilizacin, deja de
funcionar la resistencia calefactora, con lo que deja de producirse vapor
y la presin y temperatura del caldern empieza a bajar poco a poco.

conclusiones
Se determin cul es la importancia de preparar un medio que permita
la propagacin de organismos microbianos.
Se reconoci el funcionamiento de la autoclave como principal
instrumento de esterilizacin de medios de cultivo.
Se clasificaron los medios de cultivo segn su estado fsico y segn
las necesidades microbianas.
Se comprendi cmo se preparan los medios de cultivo lquidos y
slidos.

Referencias bibliogrficas.
1. MADIGAN, M. T., MARTINKO, J. M. Y PARKER, J.
Brock biology of microorganisms
En el texto: (Madigan, Martinko and Parker, 2003)
Bibliografa: Madigan, M., Martinko, J. and Parker, J. (2003). Brock biology of microorganisms. Upper Saddle
River, NJ: Prentice Hall/Pearson Education.
2. MEDIOS DE CULTIVO EN UN LABORATORIO DE MICROBIOLOGA
M Concepcin Casado Gonzlez
Gertrudis Torrico Cabezas
Mara Medina Anguita
Ao de publicacin: 2012
Disponible en: https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-cultivo-en-un-laboratorio-demicrobiologc3ada.pdf