Practica n° 6 : Medios de cultivo

1. INTRODUCCION:

Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es

observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el
laboratorio .El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el
medio de cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el cultivo.se han
preparado más de 10.000 medios de cultivo diferentes.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe
reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión
de oxigeno adecuadas, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un
medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y
debe estar exento en todo microorganismo contaminante.

Medios de cultivo
Son una mezcla de nutrientes que, en concentraciones adecuadas y en condiciones
físicas óptimas, permiten el crecimiento de los microorganismos. Son esenciales en
el Laboratorio de Microbiología por lo que un control en su fabricación,
preparación, conservación y uso, asegura la exactitud, confiabilidad y
reproducibilidad de los resultados obtenidos.

Fundamento
El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el
crecimiento de los microorganismos. La composición precisa dependerá de la
especie que se quiera cultivar, porque las necesidades nutricionales varían
considerablemente. Hay microorganismos muy poco exigentes que crecen bien en
medios de laboratorio normales y microorganismos muy exigentes que necesitan
determinadas sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer.
2. OBJETIVOS:

 Preparar medios de cultivo como soporte y fuente de nutrientes para el

desarrollo de los microorganismos in vitro.

 Manejar los instrumentos de uso rutinario, a la vez que imprescindibles, en

el laboratorio de microbiología.

 Hacer un primer acercamiento a la manipulación de microorganismos.

Adquirir la idea de la importancia del trabajo en condiciones de esterilidad y
las técnicas más comunes para realizarlo.

3. MATERIALES
●Balanza
●Infernillo eléctrico
●Probeta 500 ml
 ●Matraz
●Agitador
●Papel indicador
●Tubos de ensayo
●Algodón
●Vaso de precipitados
●Vidrio de reloj
●H Cl
●NaOH
Productos para la preparación del medio.
●Peptona......................5 g
●Extracto de carne.......2,5 g
●NaCl...........................2,5 g
●Agar-agar...................10 g

●Agua...........................50 ml

4. PROCEDIMIENTO:

-Pesar todos los productos, excepto el agar, y disolverlos en parte del agua en un vaso de
precipitados (pesar el extracto de carne sobre un vidrio de reloj )Medir el pH y ajustarlo con
NaOH y HCl a 7,2
-Añadir el agar y el resto del agua hasta 50 mlCalentar al baño maría hasta que el agar esté
fundido.(El medioadquiere un aspecto transparente)
-Antes de que se enfríe el medio (y por tanto solidifique) repartir parte deél en tubos de
ensayo, el resto ponerlo en un matraz de 50 ml.
-Limpiar bien la boca de los tubos y del matraz y tapar con algodón.
-Seleccionar un cultivo en placa de TSA que no tenga agua de condensación.
-Marcar las placas Petri que contienen el medio de cultivo para aislamiento. Los rótulos
deben ser hechos en aquella parte de la placa que lleva el medio. Utilizar placas sin agua de
condensación (ni en la tapadera ni en el medio)
-Colocar siempre las placas en posición INVERTIDA(con el medio de cultivo arriba). Se
evitan las contaminaciones y que el agua de condensación caiga sobre el medio.
-En condiciones de esterilidad, tomar una gota de la mezcla bacteriana con ayuda de un asa
de platino estéril. Si se trata de un cultivo puro (en tubos de TSA inclinados), tomar la
menor cantidad de masa bacteriana posible.
-Incubar las placas, el tiempo y temperatura de incubación adecuados para cada bacteria (si
no se indica lo contrario, 37 oC, 24 horas).

5. RESULTADOS:
 Todos los microbiólogos saben que han de trabajar con cultivos axénicos (puros) para que
sus experimentos sean significativos. Pero incluso los microbiólogos más experimentados
han cometido errores alguna vez. 
6. Anexos :

7. EFERENCIAS:
http://www.pomif.com/pages/practicas/bacteriologia/aislamiento/metodos
https://sites.google.com/a/goumh.umh.es/practicas-de-microbiologia/indice/
preparacion-de-medios-de-cultivo

http://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-cultivo-en-un-
laboratorio-de-microbiologc3ada.pdf
http://es.slideshare.net/WARAUYA20/medios-de-cultivos-metodologa-y-usos

http://www.unavarra.es/genmic/microgral/Tema%2002.-%20Cultivo%20de
%20microorganismos.pdf

http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp4.pdf

http://www.juntadeandalucia.es/averroes/iesvicen/depart/biolog/pdf/p11.pdf