UNIVERSIDAD DE SONORA

Unidad Regional Sur

Departamento de Física, Matemáticas e Ingeniería

Bioquímica – Laboratorio

PRESENTA:
Protocolo
Practica No. 1 - Reacciones características
para la identificación de carbohidratos.

PROFESOR:
Micaela Verdugo Pacheco

INTEGRANTES:
Carmen Dalí Muñoz Bacasehua

Navojoa, Sonora.
 PROTOCOLO - Práctica No. 1
Reacciones características para la identificación de carbohidratos.

Fundamento.

Los carbohidratos comprenden los azucares, almidones, celulosas y las

sustancias inmediatamente relacionadas a ellos. Es difícil formular una definición
del término “carbohidratos” que incluya todos los miembros de esta familia de
compuestos pero a partir de fórmulas estructurales. Deberá notarse un
carbohidrato. Ejemplo: la glucosa y la arabinosa son polioxialdehidos mientras que
la fructosa es una polioxicetona.
El metabolismo de los carbohidratos en el cuerpo animal es esencialmente el de la
glucosa y sustancias fines de la misma en sus procesos metabólicos.
Los carbohidratos presentan tamaños moleculares muy diferentes. En función de
ello, se clasifican en monosacáridos, oligosacáridos y polisacáridos. Los
monosacáridos contienen de 3 a 8 átomos de carbono. Son las unidades básicas y
no pueden hidrolizarse para dar azúcares más sencillos. Los oligosacáridos son
compuestos formados por uniones de algunos monosacáridos. Los más
importantes tienen sólo 2 unidades y reciben el nombre de disacáridos. Por último,
los polisacáridos están constituidos por un alto número de unidades de
monosacáridos. Son largas cadenas lineales o ramificadas, dependiendo del tipo
de unión entre las unidades. Se dividen en homopolisacáridos y
heteropolisacáridos según estén formados por el mismo tipo de monosacárido o
por varios diferentes.

Protocolo.

 Reacción de Fehling.

Instalar un baño de agua, Luego pipetee los siguientes

colocar vaso de precipitado
de 600 ml con agua
destilada.
Después coloque en su
gradilla 5 tubos de 18x150,
numerados.
carbohidratos:
Tubo 1: 5.0 ml de glucosa
Tubo 2: 5.0 ml de fructosa
Tubo 3: 5.0 ml de sacarosa
Tubo 4: 5.0 ml de lactosa
Tubo 5: 5.0 ml de maltosa
NOTA: Cada uno con su pipeta o
enjuagar dos veces antes de
tomar otra muestra.
Sacar tubos cuando
aparezca un precipitado
rojo ladrillo y colocar en
una gradilla.
NOTA: si no aparece
precipitado es negativo.
Anotar resultados, los
tubos con reacción positiva
son los que tienen
carbohidratos reductores
NOTA: lavar tubos
Reacción de Barfoed (Pronuncie Barfed)
Repetir el paso 2 y 3 de la
reacción anterior y agregar
5 ml del reactivo de
Barfoed a cada tubo.
Se detectaran
monosacáridos y filtrado hervir por 10 min
disacáridos en la
mezcla.
Colocar los tubos a baño
maría al mismo tiempo y
anotarlo.
Colocar los tubos a baño
maría, esperar 10 min.
NOTA: el precipitado será
menos grueso que el
anterior.
Sacar tubo cuando
precipite, luego filtrar. Lo
hasta que aparezca un
nuevo precipitado.
Agregar a 5ml del Reactivo
de Fehling a los 5 tubos.
Anotar los tiempos de
aparición. Los que salgan
positivos en unos 3 min serán
monosacáridos y los de 5 min
o más serán disacáridos.
Colocar una mezcla de
glucosa y lactosa en un
tubo y agregar el reactivo
mencionado y llevar a baño
maría.
 Reacción de Seliwanoff (Pronuncie Selivanof)

Enumerar 3 tubos y Pipetee 1 ml de xilosa al Agregue 5 ml del reactivo, a

colocar en gradilla. tubo 1, 1 ml de glucosa al cada uno de los 3 y colocar
tubo 2 y 1 ml de fructosa al a baño maría.
tubo 3. La reacción
identifica cetohexosas.

Observar la aparición
de color, tiempo y
anotar.

Positivos: contienen
cetohexosas

Reacción de Bial

Enumerar 3 tubos y Agregue 5 ml del reactivo a

colocarlos en una gradilla.
Pipetee 0.5 ml de Xilosa en cada tubo y colocar a baño
maría.
el tubo 1, 0.5 ml de glucosa
en el tubo 2 y 0.5 ml de
fructosa en el tubo 3.

Observar el color, tiempo y

anotar resultados

Positivo: contiene Pentosa

Preparación de reactivos

 Reactivo de Fehling (1 Litro)

Solución A.

Disolver 34.65 gr de sulfato cúprico

pentahidratado en suficiente agua para
500 ml.

Mezclar A y B en
partes iguales de
acuerdo a lo que se
vaya a utilizar.
 Solución B.

Disolver 178 gr de tartrato doble de sodio

y potasio, Añadir 50 gr de hidróxido de
sodio en suficiente agua para 500 ml.

 Reactivo de Barfoed (1 Litro)

Disolver 66.5 gr de acetato Filtrar y agregar 24.8 ml de

cúprico en poco menos de 1 ácido acético al 38% (aforar 9
Aforar a 1 Litro
L de H2O Dest. ml de ácido glacial a 25 ml con
H20 Dest.)

 Reacción de Seliwanoff (500 ml)

Disolver 250 mg de Aforar a 50 ml (Sln al 0.5 %) Aforar a 500 ml con H2O
resorcinol en H2O Dest. y agregar 170 ml de ácido
clorhídrico concentrado.

 Reactivo de Bial (180 ml)

Disolver 60 mg de orcinol Añadir 12 mg de cloruro
en 20 ml de H2O, agregar férrico y aforar a 180 con
100 ml de ácido clorhídrico H2O.
conc.
Muestras de soluciones de carbohidratos

 Xilosa (o arabinosa) (50 ml)

Pesar 750 mg de xilosa y disolver con H2O hasta 50 ml
(si es necesario diluye 1:10)

 Glucosa (300 ml)

Pesar 5.4 gr de glucosa y agregarlos lentamente y agitar
a 250 ml. después aforar a 300 ml.

 Fructosa (300 ml)

Pesar 5.4 gramos de fructosa y disolver en agua
destilada y aforar a 300 ml.

 Sacarosa (300 ml)

Pesar 10.8 gr de sacarosa y disolver en H2O Dest. Para

aforar a 300 ml.

 Maltosa (300 ml)

Pesar 10.8 gr de maltosa y disolver en H2O Dest. Para

aforar a 300 ml.

 Lactosa (300 ml)

Pesar 10.8 gr de lactosa y disolver en H2O Dest. Para

aforar a 300 ml.