PRÁCTICA #1 REACCIONES CARACTERÍSTICAS PARA LA

IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS

REACCIÓN DE FEHLING

1. Coloque en su gradilla 5 2. Pipetee los carbohidratos de 3. Agregue 5.0 ml del reactivo

tubos de ensaye de 18 x 150 y la siguiente manera de Fehling, ya preparado, a
numérelos. 5.0 ml de glucosa al tubo 1 cada uno de los cinco tubos.
5.0 ml de fructosa al tubo 2
5.0 ml de sacarosa al tubo 3
5.0 ml de lactosa al tubo 4
5.0 ml de maltosa al tubo 5

5. Una vez que aparezca el precipitado

característico de color rojo ladrillo, en la mayoría de 4. Cuando el agua del
los tubos (toma de uno a tres minutos), saque del baño esté hirviendo,
baño todos los tubos con ayuda de las pinzas y coloque los cinco
colóquelos en la gradilla. Si algún tubo no ha dado tubos al mismo
el precipitado después de cinco minutos, quiere tiempo, dentro del
decir que la reacción con el carbohidrato de ese vaso, todos al mismo
tubo es negativa. Con reacción positiva contienen: tiempo, y anote el
Carbohidratos Reductores. tiempo.

REACCIÓN DE BARFOED

1. Repita los pasos dos y tres de 2. Agregue 5.0 ml de reactivo de 3. Coloque los cinco tubos al
la reacción anterior. No use los Barfoed ya preparado a cada mismo tiempo en el agua
mismos tubos aunque ya estén uno de los 5 tubos. hirviendo y a note el tiempo.
lavados.

5. Como opción para ver la utilidad de esta prueba,
coloque una mezcla de glucosa y lactosa en un tubo
de ensaye, agregue el reactivo de Barfoed y llévelo
al agua hirviendo. En cuanto aparezca el primer
precipitado, saque el tubo y filtre. El filtrado vuélvalo
a colocar en agua hirviendo por unos diez minutos
más o hasta que aparezca un nuevo precipitado. De
acuerdo a los resultados, verá que esta reacción
puede detectar monosacáridos y disacáridos
en mezcla.
4. Espere hasta 10 minutos, observando
cuidadosamente la aparición de precipitados. El
precipitado va a ser un poco menos grueso que en
la reacción anterior. Anote los tiempos de aparición
del precipitado. Los tubos positivos para la prueba,
en unos tres minutos, serán los que contienen
carbohidratos monosacáridos.
Los tubos positivos en cinco o más minutos serán
los que contienen carbohidratos: Discáridos.
REACCIÓN DE SELIWANOFF

1. Coloque en su gradilla 3
tubos de ensaye y numérelos.
2. Pipetee 1.0 ml de xilosa al tubo 3. Agregue 5.0 ml del reactivo
1; 1.0 ml de glucosa al tubo 2 y 1.0 de Seliwanoff, ya preparado
ml de fructosa al tubo 3. Recuerde a cada uno de los tres tubos.
que la reacción identifica:
Cetohexosas

5. Observe la aparición del 4. Coloque los tres tubos al mismo

color y el tiempo. Aquellos tiempo en el baño de agua hirviendo.
tubos que sean positivos,
serán los que contienen
Cetohexosas.

REACCIÓN DE BIAL

1. Coloque en su gradilla 3 2. Pipetee 1.0 ml de xilosa al tubo 1; 3. Agregue 5.0 ml del reactivo
tubos de ensaye y numérelos. 1.0 ml de glucosa al tubo 2 y 1.0 ml de Bial, ya preparado a cada
de fructosa al tubo 3. uno de los tres tubos.

6. Anote sus resultados en la 5. Observe el 4. Coloque los tres tubos al mismo

hoja de datos. La muestra que desarrollo de el color tiempo en el baño de agua hirviendo.
haya dado la reacción positiva, y el tiempo de
será la que contenga aparición.
carbohidrato: Pentosa.
FUNDAMENTO

REACCIÓN DE FEHLING:
El reactivo de Fehling se utiliza para la detección de sustancias reductoras,
particularmente azúcares reductores. Se basa en el poder reductor del grupo
carbonilo de un aldehído que pasa a ácido reduciendo la sal cúprica de cobre
(II), en medio alcalino, a óxido de cobre (I). Éste forma un precipitado de color
rojo.

REACCIÓN DE BARFOED:
El reactivo de Barfoed es débilmente ácido y es reducido solamente por
monosacáridos, formándose como producto de reacción óxido cuproso. En
medio ácido, tan sólo los monosacáridos son capaces de reducir el Cu2+ a Cu+.
El Cu+ así producido reduce al ácido fosfomolíbdico a un complejo de intenso
color azul oscuro.

REACCIÓN DE SELIWANOFF:
Es una prueba química que se usa para distinguir entre aldosas y cetosas. Los
azúcares son distinguidos a través de su función como cetona o aldehído. Si el
azúcar contiene un grupo cetona, es una cetosa, y si contienen un grupo
aldehído, es una aldosa.

REACCIÓN DE BIAL:
El ensayo de Bial se usa para detectar la presencia de pentosas. El reactivo de
Bial está compuesto por orcinol, acido clorhídrico y cloruro férrico. Si una pentosa
está presente, se deshidratará para formar furfural que reaccionará con el orcinol
para general un compuesto coloreado.
CUESTIONARIO

1. ¿Cuál es la diferencia entre el reactivo de Fehling y el de Barfoed, en

cuanto a composición y en cuanto a su capacidad de reconocer
carbohidratos?

El reactivo de Fehling es un tartrato de Hidróxido de Sodio y Potasio con

sulfato cúprico hidratado y el de Barfoed es Acetato de Cobre, en ambos
el cobre se reduce a óxido de cobre y vira a rojo. Sin embargo, el reactivo
de Fehling es más rápido que el de Barfoed.

2. En la reacción de Fehling, ¿qué pasaría sin calentamiento?

La reacción lleva más tiempo porque el calor ayuda a acelerar la reacción

de los carbohidratos.

3. ¿Se podría usar la prueba de Seliwanoff para distinguir sacarosa de

fructosa? ¿Por qué si o por qué no?

Sí, da positivo en fructosa porque es una cetohexosa. Por otro lado,

aunque la sacarosa contiene glucosa y fructosa (hexosas), no reacciona
con los reactivos porque no es un carbohidrato reductor.

4. Tengo tres frascos, uno con glucosa, otro con manosa y otro con fructosa.
A los tres les añado hidróxido de sodio 0.05 N. ¿Qué obtengo como
producto en cada uno de los tres tubos y por qué?

Está involucrado en la interconversión de glucosa, manosa y fructosa, una

reacción conocida como el reordenamiento de Lobry de Bruyn-Alberda
van Ekenstein. Si la glucosa se trata con hidróxido de sodio, se convierte,
junto con otros productos, en manosa y fructosa. Con el tiempo, más
Fructosa y manosa.

5. En un frasco tengo glucosa y en otro manosa, y los quise tratar con álcali
0.01 N, pero me equivoqué de frasco y lo que añadi fue ácido clorhídrico
0.01 N. ¿Qué sucederá en cada frasco?

Se deshidratan o sea pierden moléculas de agua para dar furfural como

productos como lo son los compuestos heterocíclicos y aldehídos.

6. En el laboratorio había un frasco rotulado lactosa + fructosa, y otro

rotulado glucosa + ribosa, pero al hacerse la limpieza del laboratorio se
cayeron las etiquetas y ahora no se sabe cual es cual. ¿Qué se puede
hacer para etiquetarlos correctamente?

Aplicar la prueba de identificación de carbohidratos. La prueba de Barfoed

mejorará porque la lactosa es un disacárido y la fructosa es un monosacárido,
por lo que un vial reaccionará con el reactivo. Sin embargo, la glucosa en el otro
vial también es un monosacárido, por lo que una prueba de Bial en un solo vial
es suficiente ya que la ribosa es un azúcar de pentosa. Por defecto, si el biberón
no responde, será el de lactosa y fructosa.
BIBLIOGRAFÍAS

REACCIÓN DE FEHLING - LABORATORIOS DE BIOQUÍMICA. (s. f.).

https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-
i/carbohidratos/reaccion-de-fehling

REACCIÓN DE BARFOED - LABORATORIOS DE BIOQUÍMICA. (s. f.).

https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-
i/carbohidratos/reaccion-de-barfoed

REACCIÓN DE SELIWANOFF
https://www.studocu.com/ec/document/universidad-tecnica-de-
manabi/quimica/reaccion-de-seliwanoff/15568637

REACCIÓN DE BIAL https://quimicafacil.net/manual-de-laboratorio/analisis-de-

carbohidratos/