Practica de proteínas Numero 6

Parte 1.

Algunos estudiantes realizaron la práctica de proteína de la Universidad Santiago de Cali y

obtuvieron los siguientes resultados.

Evalué si los datos reportados son correctos y responde las preguntas

1. Coagulación de una proteína.

Procedimiento Resultado
Coloque 7 tubos de ensayo en una gradilla y
numérelos. De la clara de huevo obtenida
separe 5 ml, para el tubo, el resto se le agrega
agua, se agita y se completan 100 ml. Luego se
filtra y se hacen con esta solución todos los
ensayos). Vierta en cada tubo 3 ml de la
solución de albúmina, excepto al No 1 que
lleva los 5 ml de clara.
Realice lo siguiente:
Tubo No. 1: Se calienta suavemente y poco a
poco en un baño de agua, controlando la
temperatura mediante un termómetro
colocado en el interior del tubo. Determine la
temperatura a la cual se insolubiliza la
proteína.
Tubo No. 2: Agregue 2 ml de acetona. Deje en
reposo y observe que pasa al cabo de algunos
minutos.
Tubo No. 3: Añada 1 ml de HCl 9 N. Observe.
Tubo No. 4: Agregue 2 ml de NaCl al 20 %.
Observe
Tubo No. 5: Añada 2 ml de HNO3 al 20%.
Observe
Tubo No. 6: Agregue 4 ml de NaOH 5 M.
Observe
Tubo No. 7: Control

 Indique el efecto de la temperatura, los solventes orgánicos, los pH extremos (adición de

HCl 9 N o NaOH al 5 M), la concentración salina (adición de NaCl al 20 %) sobre la
estabilidad de una proteína en solución. ¿Cuáles factores pueden causar la coagulación de
una proteína?
 2. Precipitación de la proteína por iones metálicos pesados

Procedimiento Resultado
Deposite en un tubo de ensayo 3 ml de la
solución de albúmina, y añádale 1 ml de
acetato de plomo 0.005 M. Espere algunos
minutos

Agregue ahora 1 ml de ácido

etilendiaminotetracético (EDTA) 0.05 M. Agite
y observe

 ¿Cuál es el efecto de iones metálicos en la solubilización de las proteínas?

3. Insolubilización reversible e irreversible

Procedimiento Resultado
En un tubo de ensayo coloque 5 ml de la
solución de albúmina, agregue en porciones
pequeñas y agitando para que se disuelva
bien, 2.36 g de sulfato de amonio.
En otro tubo de ensayo, coloque 5 ml de la
solución de albúmina y añada 1 ml de ácido
tricloroacético al 50 %.
Centrifugue las suspensiones de ambos tubos
a 3000 r.p.m., durante 10 minutos. Separe el
sobrenadante de ambos tubos por
decantación, deséchelo.

Agregue a cada tubo 4 ml de agua destilada y

agite bien.

¿Cuándo la insolubilización de proteínas puede ser reversible o irreversible? (¿Reacción de

solución de albumina con Sulfato de amonio o con ácido tricloroacético?
 4. Reacción xantoproteica

Procedimiento Resultado

Coloque en un tubo de ensayo 3 ml de la

solución de albúmina y agréguele 3 ml de
ácido nítrico al 20 %. Caliente en un baño de
agua por algunos minutos. Enfríe el tubo y
posteriormente añada 3 ml de hidróxido de
amonio.

 ¿Cuál es el fundamento y finalidad químico de la reacción xantoproteica?

5. Reacción de Biuret

Procedimiento Resultado

Coloque en un tubo de ensayo 3 ml de la

solución de albúmina. Añada el mismo
volumen de hidróxido de sodio 5 M, y 5 gotas
de sulfato cúprico 0.1 M.

 ¿Cuál es el fundamento químico de esta reacción?

Parte 2.

Practique en el laboratorio virtual de biomodel con la práctica “Determinación de la actividad

gamma-glutamiltranspeptidasa en una muestra de orina” que se encuentra en el siguiente link
https://biomodel.uah.es/lab/abs/cinetica.htm. Realice la gráfica y coloquela en el documento.

Calcule la pendiente de la regresión lineal y calcule la actividad enzimática a partir de la siguiente

ecuación