LABORATORIO No.

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DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE ALGUNOS
COMPONENTES DEL PROTOPLASMA CÉLULAR
INTRODUCCIÓN
Las biomoléculas son compuestos de En esta práctica se estudiarán los dos
carbono con una variedad de grupos primeros niveles de complejidad
funcionales y se encuentran estructural de algunas biomoléculas,
jerárquicamente organizados en las para lo cuál el estudiante deberá
células. La versatilidad de los átomos consultar acerca de sus
de carbono para formar enlaces características y propiedades físico-
covalentes sencillos y dobles químicas, de forma tal que pueda
principalmente, es de gran comprender los resultados de los
significancia biológica porque a partir ensayos que aquí se realicen.
de ellos se establecen unidades
monoméricas como los monosacáridos, 5.1 OBJETIVOS
aminoácidos y nucleótidos. La 5.1.1 OBJETIVO GENERAL:
polimerización de estas unidades ♦ Identificar en forma cualitativa la
monoméricas primarias permite la presencia de algunos componentes
aparición de un segundo nivel de que se encuentran en el protoplasma
complejidad al que pertenecen celular.
macromoléculas como los
polisacáridos (almidón y glucogéno), 5.1.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
proteínas (albúmina e histonas) y
ácidos nucleicos (DNA y RNA). Las ♦ Determinar mediante métodos
interacciones de macromoléculas a cualitativos la presencia de
través de diferentes tipos de fuerzas carbohidratos, lípidos, proteínas,
intermoleculares y mecanismos enzimas y ácidos nucleicos en
complejos de empaquetamiento, muestras de materia viva.
permiten la conformación de
las diferentes organelas (membranas ♦ Reconocer la composición química
plasmáticas) y estructuras de los reactivos que se utilizan en
supramoleculares, como los la identificación de los compuestos
cromosomas. Finalmente la interacción protoplasmáticos.
conjunta de las biomoléculas en sus
diferentes niveles de organización ♦ Investigar las reacciones que
permite la conservación de la se producen en la identificación de
estructura y funcionamiento de las los compuestos protoplasmáticos.
células (Ver Figura No. 5.1).

Figura No. 5.1. Biomoléculas

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 cambio? Analice sus resultados
5.2 MATERIALES: y saque conclusiones.
♦ Tubos de ensayos
♦ Pipetas
♦ Goteros
♦ Gradillas para tubos de ensayos
♦ Mechero de alcohol
♦ Pinzas
♦ Reactivo de Benedict
♦ Solución de glucosa al 3%
♦ Fruta madura
♦ Levadura activa
♦ Almidón
♦ Macerado de pan
♦ Lugol
♦ Solución de clara de huevo
♦ Solución de gelatina sin sabor Figura No. 5.2 Prueba de Benedict.
♦ Suero fisiológico
♦ Hidróxido de sodio al 10% 5.3.1.2 Polisacárido:
♦ Sulfato de cobre al 0.5% a. Haga una suspensión acuosa
♦ Aceite vegetal de almidón y vierta en un tubo de
ensayo 2 ml de ella.
♦ Grasa animal
b. Agréguele a la anterior solución
♦ Sudan III o IV
dos gotas de solución de lugol.
♦ Baño de maría
¿Qué cambio se experimenta?
♦ Agua destilada Anote los resultados.
♦ Solución sanguínea Caliente hasta ebullición esta
♦ Suspensión de levadura activa solución por dos minutos, ¿Se
♦ Reactivo de difenilamina experimenta algún cambio?
♦ Papel filtro Deje el tubo de ensayo en reposo
♦ Anhídrido acético hasta que se enfríe. ¿Qué
♦ Cloroformo sucede? Ver figura No. 4.3
♦ Ácido Sulfúrico concentrado c. Deposite dos gotas de lugol en
♦ Solución reactivo de almidón al 1% una solución acuosa de un
macerado de pan, ¿Qué
5.3 PROCEDIMIENTO: sucede? Saque conclusiones
5.3.1. Determinación de carbohidratos:
5.3.1.1 Monosacáridos:
a. En un tubo de ensayo se vierten
5ml del reactivo de Benedict, y se
calienta hasta ebullición. No debe
cambiar de color.
b. Se añade al mismo tubo de ensayo
1ml de una solución de glucosa y
se calienta hasta ebullición.
¿Qué color aparece? Una turbidez
verde indica de 0.1 a 0.3% de
azúcar reductor, y un precipitado
rojo naranja o rojo ladrillo, indica
que la concentración de azúcar
supera el 1.5%. Ver figura No. 4.2 Figura No. 5.3. Determinación de
c. Macere un pedacito de fruta almidón
madura y adiciónela a un tubo de
ensayo que contiene 5 ml de
reactivo de Benedict. Caliente
hasta ebullición. ¿Nota algún
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5.3.2 Proteínas:
a. Diluya la clara de huevo en 50ml
de suero fisiológico o en agua.
b. A 1ml de la solución anterior
se añaden dos gotas de sulfato de
cobre al 0.5% y 1ml de hidróxido de
sodio al 10%, ¿Se produce algún
cambio?
c. En un tubo de ensayo, coloque 2ml
de solución de gelatina sin
sabor, y proceda como en el
caso anterior. Figura No. 5.5. Determinación de
Agregue dos gotas de sulfato de Lípidos
cobre y 1ml de hidróxido de sodio
agite y anote los resultados. 5.3.3.1. Reacción de Lieberman
Burchard para colesterol:
a. Diluya una parte de la yema de
huevo en 10 ml de cloroformo.
b. Tome 1 ml de la solución
clorofórmica y colóquelo en un tubo de
ensayo limpio y seco.
c. Adicione 1 ml de anhídrido acético.
d. Adicione 3 a 4 gotas de ácido
sulfúrico concentrado.
e. Agite suavemente y observe los
cambios de coloración cuando.
Figura No. 5. 4 Determinación de
5.3.4 Enzimas:
Proteínas
a. En un tubo de ensayo limpio y
seco coloque un embudo
5.3.3 Lípidos:
pequeño con papel filtro.
a. Coloque en un tubo de ensayo 3ml
Enjuáguese la boca con suero
de agua. Agregue una pizca del
fisiológico y descarte.
reactivo Sudan III agite y observe,
b. Sí es necesario mastique un trocito
anote los resultados.
de parafina (vela) y la saliva
b. En el mismo tubo de ensayo adicione
secretada viértala sobre el
1ml de aceite vegetal, agite
embudo, recogiendo la saliva
nuevamente y deje en reposo por
filtrada en el tubo.
unos minutos. Luego observe y
c. Coloque, en una serie de 5 a 10
anote los resultados.
tubos de ensayo, dos gotas de
c. En otro tubo de ensayo coloque 2ml
lugol en cada uno.
de grasa animal y agregue una
d. En otro tubo coloque 10mL de
pizca de Sudan III. Si la grasa está
suspensión acuosa de almidón y
solidificada caliente un poco para
añadale 1ml de saliva y agite.
derretirla. Agite y anote los
e. Cada 20 segundos pase 1mL de
resultados, comparándolos con los
la mezcla almidón más saliva a
del tubo anterior. Saque
cada uno de los tubos de la
conclusiones.
serie, hasta que no se produzca
coloración. Observe la variación de
los colores a lo largo de la serie.
f. Caliente a ebullición otra muestra
de saliva y repita todo el
experimento.

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 Figura No. 5.6 Determinación de colesterol
Figura No. 5.7 Actividad enzimática
5.3.5 Ácidos Nucleicos:
a. Numere tres tubos de ensayo bien
limpios y en cada uno de ellos ponga
las siguientes sustancias:
Tubo Nº. 1 = 3 ml de agua destilada
Tubo Nº. 2 = 3 ml de suspensión de
levadura activa
Tubo Nº. 3 = 3 ml. de solución
sanguínea
b. Agregue a cada tubo 5 ml del
reactivo difenilamina y coloque luego
todos los tubos en baño de maría
durante 15 minutos. Observe y anote
los resultados después de haberse
enfriado todos los tubos.
Figura 5.8. Determinación de
Ác. Nucleicos
5.3 CUESTIONARIO:
• ¿Que es un azúcar reductor?
• Cite ejemplos de azucares
reductores y no reductores
• ¿Cuales son los componentes del
reactivo de Benedict?
• ¿Que reacción se produce cuando
se calienta el tubo de ensayo que
contiene el reactivo de Benedict y
glucosa?
• ¿Cuál es la naturaleza del
precipitado de color rojo ladrillo que
se forma en la anterior reacción?
• ¿Cual es la composición química
del lugol?
• ¿A que se debe la desaparición del
color azul violáceo de la solución de
almidón cuando se calienta hasta
ebullición?
• ¿Por qué aparece nuevamente el
color cuando la anterior solución se
enfría?
• ¿En que consiste la reacción del
biuret?
• ¿En que consiste la reacción
xantoproteica?
• ¿Que es el Sudan III?
• ¿A que se debe la aparición de
color cuando al extracto de rábano
se le adiciona solución acética de
bencidina y agua oxigenada?
• ¿Por qué no aparece color cuando
al extracto de rábano calentado
hasta ebullición se le añade
solución acética de bencidina y
agua oxigenada?
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• ¿Por qué es necesario incluir en el
experimento de ácidos nucleicos un
tubo con agua?
• ¿Considera que las levaduras
contienen más RNA que DNA?
• ¿Que indica la reacción en el caso
de la suspensión de células
sanguíneas?

5.5 ENLACES:
• http://www.ibiblio.org/virtualcell/inde
x.htm: Página sobre una visita
virtual a la célula, con muy buenos
dibujos y animaciones. Incluye
además un “libro virtual” sobre
química orgánica y biología celular.
Puede descargarse completa en un
archivo comprimido e instalarla en
el propio ordenador.
• http://www.acdlabs.com/ Página
para descargar programas que
permiten elaborar estructuras
tridimensionales de las moléculas y
con múltiples enlaces a tutórales de
biomoléculas.
• http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/q
uery.fcgi?DB=pubmed Busca en
esta página las bases de datos de
proteínas y modela alguna de ellas.

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 GALERIA DE ESTRUCTURAS
1. MONOSACARIDOS:

1.1 ENLACES O-GLICOSIDICOS

; VOLVER

1.2 POLISACÁRIDOS:

; VOLVER

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2. PROTEÍNAS:

2.1 ENLACE PEPTIDICO:

2.2 REPRESENTACION TRIDIMENSIONAL DE UNA PROTEINA:

; VOLVER

3. LIPIDOS:

ESTEROIDES

TRIGLICERIDOS
; VOLVER

38
4. ACIDOS NUCLEICOS:

; VOLVER

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