INFORME DE VERIFICACION DE METODOLOGIA NIOSH 7900

Milangel Luzardo M.
Realizado por:
Encargado de Sala AAS

Manuel Chirinos O.
Revisado por:
Encargado de Calidad

Javier Olivero J.
Aprobado por:
Gerente de Operaciones

1. IDENTIFICACION DEL METODO DE ENSAYO VALIDADO

Método: NIOSH 7900. Determinación de Arsénico y compuestos, como Arsénico (excepto AsH y
As2O3)
Tipo de Método: Normalizado.
Analito: Arsénico (As) Unidades: μg/L. Responsable Validación: Milangel Luzardo
Matriz: Filtros Impactados con Polvo. Morillo – Encargado de Sala de Absorción
Atómica.
Fecha: 27/02/2019 - 11/03/2019

2. IDENTIFICACION DE MATERIALES, INSUMOS Y EQUIPOS EMPLEADOS.

Equipos Involucrados:
Perkin Elmer – PinnAAcle 900F
Perkin Elmer – FIAS 400
Soluciones estándares y/o patrones involucrados:
Estándares.
As: 2; 4; 6; 8; 10 μg/L
Materiales de Referencia Certificados:
Arsénico 1000 mg/L, Merck, Trazable a NIST SRM 3103a.
 3. LINEALIDAD.

La linealidad es la capacidad de un método de análisis, dentro de un determinado

intervalo, de dar una respuesta o resultados instrumentales que sean proporcionales a la
cantidad del analito que se habrá de determinar en la muestra de laboratorio.

a. Arsénico:

Para la aplicación del concepto de linealidad se prepararon soluciones estándares de 2; 4;

6; 8 y 10 µg/L a partir de un material de referencia certificado trazable a NIST para
Arsénico, para proceder a construir la curva de calibración la cual consta de los 5 puntos
anteriormente mencionados y fue replicada 3 veces para de esta forma promediar la
absorbancia medida, calcular la desviación estándar, coeficiente de correlación y
coeficiente de determinación.

A continuación, en la tabla 1 se muestran los puntos de la curva de calibración con su

respectiva concentración, la absorbancia para cada medición, el promedio de la
absorbancia, la desviación estándar y el porcentaje de covarianza.

Tabla 1. Curvas de Calibración Arsénico

Concentración Absorbancia Absorbancia Absorbancia Absorbancia Desviación

Puntos
µg/L 1 2 3 Promedio Estándar
1 2 0,0881 0,0847 0,0843 0,0857 0,0021
2 4 0,1752 0,1695 0,1630 0,1692 0,0061
3 6 0,2569 0,2392 0,2344 0,2435 0,0118
4 8 0,3299 0,3195 0,3004 0,3166 0,0150
5 10 0,4266 0,3805 0,3621 0,3897 0,0332
Se realizó el cálculo de los coeficientes de correlación y determinación para el promedio
de la curva de calibración de acuerdo a las absorbancias obtenidas, los cuales son los
siguientes:

Coeficiente de correlación (r): 0,9996

Coeficiente de determinación (r2): 0,9992

Ambos coeficientes son mayores de 0,995 por lo que son aceptables y se concluye que
existe correlación con una probabilidad elevada.

Se realizó una evaluación de curva de calibración global, realizando una evaluación

estadística de prueba t-student, como un mejor indicador del modelo lineal, para ello se
calcula un valor de t (t-student) con n-2 grados de libertad y se compara con el valor
tabulado de t para el nivel de confianza requerido (α=0,0015), dos-colas, en este caso para
un “n” que depende de los niveles de calibración que es 5.

Se desea probar si existe entonces una correlación significativa: La hipótesis nula H 0 es que
no existe correlación entre X e Y. si el valor observado de t r es mayor que tcri, se rechaza la
hipótesis nula H0, siendo la correlación lineal significativa con la probabilidad calculada.

Donde:

tr = Valor del estimador t Student obtenido para el coeficiente de correlación

r = Valor absoluto del coeficiente de correlación

n-2= Numero de grados de libertad

r2= Valor del coeficiente de determinación

Se obtuvo un valor de tr= 62,592 y se tiene un valor de tcri = 5,841 (Valor obtenido a partir
de tabla de la distribución de t-Student ver anexo 1).

Por lo que tr es mayor a tcri y se rechaza la hipótesis nula H 0, siendo la correlación lineal
significativa con la probabilidad calculada.
4. Límites

Se tienen en consideración los siguientes parámetros: valor crítico, límite de detección

(LOD) y límite de cuantificación (LOQ).

Valor crítico (LC): el valor de la concentración o cantidad neta que en caso de superarse da
lugar, para una probabilidad de error dada α, a la decisión de que la concentración o
cantidad del analito presente en el material analizado es superior a la contenida en el
material testigo.

Donde:
t= t-student
1-α= probabilidad b
v= grados de libertad
S0= desviación estándar de las lecturas del blanco matriz o testigo reactivo

Límite de detección (LOD): concentración o cantidad real del analito presente en el

material objeto de análisis que llevara, con una probabilidad de (1-β), a la conclusión de
que la concentración o cantidad del analito es mayor en el material analizado que en el
material testigo.

Donde:
t= t-student
1-α= probabilidad b
v= grados de libertad
S0= desviación estándar de las lecturas del blanco matriz o testigo reactivo

Límite de cuantificación (LOQ): una característica del funcionamiento del método que
suele expresarse como señal del valor (verdadero) de la medición que producirá
estimaciones con una desviación estándar relativa (RSD) generalmente de 10 % (o 6 %).
a. Arsénico:

Se realizaron 10 mediciones al blanco matriz obteniendo una desviación estándar de

0,0624 por lo que se calculó el valor crítico, límite de detección y límite de cuantificación
obteniendo los siguientes resultados:

LC = 0,096 µg/L

LOD = 0,192 µg/L

LOQ = 0,584 µg/L

El límite de cuantificación es mayor al límite de detección y este a su vez es mayor al valor

crítico por lo tanto se aceptan los limites.

5. Veracidad

Determina el grado de coincidencia existente entre el valor medio obtenido de una serie
de resultados y un valor de referencia aceptado.

Recuperación: es la fracción de la sustancia agregada a la muestra (muestra fortificada)

antes del análisis, al ser analizadas muestras fortificadas y sin fortificar.

R = Ce / Ca

Donde:
R= recuperación
Ce= es la concentración de analito de la muestra enriquecida
Ca= es la concentración de analito adicionado a la muestra enriquecida

Se procedió a realizar las muestras fortificadas a partir de materiales de referencia para

Arsénico, siendo agregada las concentraciones conocidas a cada filtro y de ahí se procedió
a realizar la recuperación de las muestras mediante el procesamiento de las mismas de
acuerdo a lo establecido en el método, obteniendo los siguientes resultados:

Tabla 4. % de Recuperación Arsénico

 Metal Añadido Recuperado % de
Muestra
(µg/L) (µg/L) Recuperación

1
3 2,409 80,30
(Baja)

2
5 4,679 93,58
(Media)

3
7 6,002 85,74
(Alta)

% DE RECUPERACION
86,54 %
PROMEDIO

El promedio del porcentaje de recuperación para todas las muestras de Arsénico se

encuentra en 86,54 % cumpliendo con lo establecido en la tabla de % de recuperación del
manual del codex alimentarius de 75 % a 115 % para una unidad de 10 ppb.
Anexos
Anexo 1. Tabla de la distribución t-Student
Anexo 2. Resultados Equipo PINNAACLE 900F