Práctica 5: Cromatografía en placa fina

Diagrama de flujo

Separación de carotenos

Cromato placa trazar con lápiz una Aplicar sobre ésta dos puntos
línea de 0.5cm de distancia del borde equidistantes por medio de un
inferior aplicador la muestra de caroteno

Retirar de la cámara cromatográfica,

Dejar secar y desarrollar cromatograma
marcar el centro de cada mancha
en una mezcla de hexano, acetona,
observada y calcular valores de Rf para
teniendo cuidado de que no rebase los
cada componente
puntos de aplicación y que diluya 0.5cm
antes del borde

Identificación de aceites esenciales

Realizar el mismo procedimiento,

utilizando benceno como fase móvil,
sumergir placas en (KMnO4) al 10%
que será nuestro revelador, el
resultado serán manchas de color
café y calcular Rf.
 SEPARACIÓN DE CAROTENOS POR CROMATOGRAFÍA EN
Colocar columna cromatográfica
con pinza universal y con un
agitador un trozo de algodón hasta
la base
La llave de la columna debe de estar
abierta durante todo el proceso de
empacamiento, dejar gotear el
disolvente y esperar hasta que
quede ligeramente arriba de la fase
estacionaria
Una vez que los pigmentos
penetraron la sílice, llenar
lentamente la columna con la
mezcla hexano acetona (no hacer
remolinos), observar la separación
de los componentes de la mezcla.
COLUMNA.
Empacar la columna y adicionar por
la parte superior una suspensión de
4g de sílica de gel mezclado con
hexano y acetona
Una vez empacada la sílica agregar
cloruro de sodio (aproximadamente
una capa de 1cm), agregar 10 gotas
de concentrado de espinaca (no
derramar en las paredes ni que se
mezcle con fase móvil)
Una vez recolectadas las
fracciones, llevar a baño de
agua, evaporar la cantidad
posible de disolvente para
Recoger primera fracción en tubos realizar cromatografía en
de ensayo enumerados y cubiertos placa fina, usando como fase
de papel aluminio, después cambiar móvil la mezcla de hexano
eluyente a acetato de etilo, metanol acetona e identificar
y recoger la siguiente fracción con
pigmentos
tubos de ensayo
 Separación de licopenos

Hacer el mismo procedimiento,

pero ahora con el extracto de
jitomate