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Introducir un trozo de Adicionarle unos 10 cc de etanol y

Preparación de la luego agregar una suspencion formada


algodón hasta el
columna  al agitar 10 g de silicagel en unos 20 cc
fondo de la columna  de etanol

Abrir la llave de la columna hasta la


altura del solvente sea de 1 mm por
encima de de la superficie.

Depositar 1 o 2 cc de
Cromatografia Abrir la llave hasta que todo el
la mezcla a
Siembra  separar(en solucion
colorante sea absorbido por la
en la columna fase fija 
alcoholica)

Cambie de Si fuera necesario


Ir adicionando mas etanol
recipiente y cambie el etanol por
hasta que se eluya el
Elución  colorante que se desplaza
eluya el agua acidulada para
segundo eluir este segundo
mas rápidamente 
colorante  colorante 

Comparar el color y aspecto de las 2 Guardar parte de estas fracciones


fracciones obtenidas de la columna para el análisis por cromatografica
cromatografica  en capa fina al portaobjetos 

Preparar las placas introduciendo  2 laminas puede conservarse


Separar los portaobjetos, dejar secar
portaobjetos en una suspencion preparada al en recipientes
y señalar 2 puntos que se
agitar 35g de silicagel  en 100ml de una cerrados
encuentran en una imaginaria linea
mezcla de coloroformo-metanol (agitar antes de usar) de partida a 1 cm del borde inferior  

Cromatografia
en capa fina  En uno de los se siembran 2 a 3
Introducir la placa en una cámara de dejar secar  gotas de la mezcla anaranjado de
desarrollo que contiene la fase móvil   el solvente  metilo-azul de metileno y en el otro
un de los colorantes 

Cuando el solvente este por llegar al borde


superior de la placa, retirar esta, marcar el
frente del solvente dejar secar y calcular el Rf 

A 1.5  cm de un extremo de 


Doble la tira En cada mitad, y sobre la linea
la tira de papel de filtro
longitudinalmente, quedando de partida, señale el punto
marcar con lápiz una linea dividida en 2 mitades  medio o lugar de siembra 
recta(linea de partida)

En el otro punto de sembrar uno


Cromatografia Dejar unos minutos para que En uno de estos puntos y con
de los colorantes en solución.
se evapore el solvente de la tubo capilar, depositar 2 a 3
Esperar a que cada gota seque
sobre papel siembra  gotas de la mezcla a analizar. 
antes de sembrar la siguiente 

Introducir la tira en un tubo


Cuando la fase móvil haya ascendido unos
de ensayo de 2 x 15 cm en NO MOVER LA CUBA

8 a 10 cm retirar el papel, marcar el frente


cuyo interior se ha colocado CROMATROGRAFICA

del solvente con lápiz y dejarlo secar


el solvente de desarrollo 

Observar y comparar con las 2


muestras sembradas y calcular el
Rf de cada sustancia

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