Manual de Procesos Normalizados - PORFIRIO CENTENO

MANUAL DE PROCESOS ANALÍTICOS - NORMALIZADOS. MDC – P.A.N. V. 1.
Realizado por: Q. Porfirio Centeno. Validado por: Dpto. De Calidad

Última Revisión: 10 – 11 - Laboratorios Zebra y Asociados.
de2022
MANUAL
I.
DE
HEMATOLOGÍA
QUÍMICA ANALÍTICA
MICROBIOLOGÍA
PRO
INMUNOLOGÍA
LÍQUIDOS
Y
CE
DESECHOS
SOS
PÁG. 1 - 104
ANALÍTICOS - NORMALIZADOS
AUTOR: Q. PORFIRIO CENTENO ARENA
AUTORIZADO POR:
Dpto. DE CALIDAD
DE Laboratorios
Zebra y Asociados
EDICIÓN
2022
1
de Laboratorios Zebra y Asociados.
INDICE:
I. MANUAL DE HEMATOLOGÍA – 3.
a. Objetivo – 4.
b. ESTUDIO I: CITOMETRÍA HEMÁTICA – 5.
c. ESTUDIO II: RETICULOCITOS MANUALES – 15.
d. ESTUDIO III: HEMOCLASIFICACIÓN – 26.
II. MANUAL DE QUÍMICA ANALÍTICA – 31.

a. Objetivo – 32.
b. ESTUDIO I: QUÍMICA SANGUÍNEA – 33.
c. ESTUDIO II: PRUEBA DE EMBARAZO EN SANGRE – 45.
III. MANUAL DE MICROBIOLOGÍA – 52.
a. Objetivo – 53.
b. ESTUDIO I: CULTIVOS BACTERIANOS – 54.
c. ESTUDIO II: GRAM – 68.
IV. MANUAL DE INMUNOLOGÍA – 72.
a. Objetivo – 73.
b. ESTUDIO I: ANTÍGENO PROSTÁTICO ESPECÍFICO TOTAL –
74.
c. ESTUDIO II: Helicobacter pylori – 81.
V. MANUAL DE LÍQUIDOS Y DESECHOS – 88.
a. Objetivo – 89.
b. ESTUDIO I: UROANÁLISIS – 90.
c. ESTUDIO II: PRUEBA DE EMBARAZO EN ORINA – 98.
2
D E P A R T A M E N T O D E:
HEMATOLOGÍA
3
O B J E T I V O
D E L
M A N U A L
Se tiene como propósito la recopilación de procedimientos,

procesos y métodos en relación al área de hematología, con el
objetivo de llevar un control sobre los procedimientos que
serán puestos en práctica con diferentes muestras
potencialmente patológicas.
A P L I C A C I Ó N
Todos los procedimientos descritos en el apartado del

departamento de hematología utilizarán tubos al vacío BD
Vacutainer con E. D. T. A., con contenido de sangre periférica
(venosa).
R E S P O N S A B I L I D A D E S
El químico de base será quien procese la muestra en su

totalidad, supervisado por el químico responsable del
departamento clínico de hematología.
S E G U R I D A D Y C O N S I D E R A C I O N E S
Todas las muestras que llegan al departamento deberán tratarse

como altamente peligrosas, es necesario portar el equipo de
protección en todo momento y manipular la muestra con mucho
cuidado y precaución.
4
C I T O M E T R Í A
H E M Á T I C A
SIGNIFICANCIA CLÍNICA.
FUNDAMENTO.
Este estudio es de gran utilidad para el diagnóstico del

paciente. Valora el estudio de 3 líneas celulares. El objetivo
del estudio es el seguimiento de pacientes con anormalidades
en la sangre y sus componentes. Se utiliza para el diagnóstico
de:
a. Síndrome febril.
b. Síndrome anémico.
c. Síndrome purpúrico.
Así como de pacientes que reciben radio y quimio terapias.
Se divide en 3 tipos:
1. SERIE ERITROCITARIA.
2. SERIE BLANCA.
3. SERIE PLAQUETARIA.
DEFINICIÓN Y TERMINOLOGÍA.
1. Quimioterapia: Terapia basada en dosis de radiación para
tratamiento del cáncer.
2. E. D. T. A: Compuesto ácido que evita la coagulación de
la sangre gracias a la afinidad del mismo con el hierro.
3. Citometría: Medición o conteo de las células.
4. Hemático: Referente a la sangre.
5. Torunda: Fibras de algodón entrelazadas que forman
porciones más completas, usualmente bañadas en alcohol
etílico.
6. Frotis: Método de exploración en la extensión de un
fragmento de tejido o muestra corporal.
5
PRINCIPIO DE LA PRUEBA ANALÍTICA.
1. MÉTODO DE DETECCIÓN DE CORRIENTE DIRECTA CON ENFOQUE

HIDRODINÁMICO Y DISCRIMINADORES FLOTANTES AUTOMÁTICOS.
El detector se encarga del conteo de los eritrocitos y de

las plaquetas mediante métodos de enfoque hidrodinámico y de
corriente directa. La muestra es diluida y rodeada por un
reactivo que envuelve las células y pasan a través del centro
de la abertura del detector. Dicho reactivo evita la
circulación parcial de células que pueden ser leídas
falsamente como plaquetas, de igual manera esta técnica evita
que dos o más células pasen al mismo tiempo a través de la
abertura, detectando ambas como una misma de mayor tamaño.
2. HEMOGLOBINA FOTOMÉTRICA LIBRE DE CIANURO PARA LA

DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA.
Se utiliza el lauril sulfato de sodio para medir la

concentración de hemoglobina. El primer paso consiste en que
la S.L.S se une a la membrana del eritrocito por un enlace
iónico, siendo una parte de ese enlace solamente hidrofóbico.
Causa la solubilización de los fosfolípidos en la membrana
eritrocitaria, haciendo que se libere la hemoglobina desde
adentro.
La hemoglobina libre cambia en su estructura por isomería,
el grupo hem del hierro divalente es convertido a hierro
trivalente mediante el enlace con el oxígeno al grupo hem de
hierro o la disolución del oxígeno.
Los grupos hidrofílicos del S.L.S se unen al grupo hem
del hierro trivalente, formando una unión estable en el
proceso. Esta curva de absorción es visible a 535 nm, donde el
analizador mide la absorción a 555 nm.
3. CITOMETRÍA DE FLUJO FLUORESCENTE
Técnica usada para analizar las células que pasan a través

de una celda de flujo. La muestra de sangre es aspirada, se
diluye después de una medición y es teñida con un reactivo
6
fluorescente. Posteriormente, la muestra pasa por una celda de

flujo, donde las células se abren paso a través de una
abertura. Este paso previene que haya pulsos anormales.
Un láser semiconductor que trabaja a 633 nanómetros se
emite sobre las células justamente al pasar estas por la
abertura. La dispersión de la luz es emitida en 3 señales que
varía entre célula y célula de acuerdo a su forma y su grado
de madurez.
El fotodiodo recibe la luz dispersa, a su vez, el tubo
fotomultiplicador del sistema óptico recibe la luz dispersa
lateral y la luz fluorescente; estas señales de luz se
convierten en pulsos eléctricos haciendo posible saber el
tamaño de la célula, la complejidad y su estado maduro.
ALMACENAMIENTO.
REACTIVO TEMPERATURA TEMPERATURA PERIÓDO DE

DE DE USO VALIDEZ UNA
CONSERVACIÓN VEZ ABIERTO
CELLPACK DCL 15 – 35 ºC
CELLPACK DST 2 - 35 ºC 15 – 30 ºC
CELLPACK DFL 60 DÍAS
SULFOLYSER 1 – 30 ºC
LYSERCELL WDF
FLUOROCELL 90 DÍAS
WDF 2 – 35 ºC 15 – 35 ºC
FLUOROCELL
RET -
CELLCLEAN 1 – 30 ºC
AUTO -
EQUIPO.
ANALIZADOR HEMATOLÓGICO “SYSMEX” XN – L 350.
MUESTRA.
Tubo con E. D. T. A. color: LILA.
7
PREPARACIÓN.
1. MATERIALES, REACTIVOS Y OTROS PRODUCTOS.

a. PROCESO MEDIANTE EL EQUIPO AUTOMATIZADO.
i. Tubo lila con E. D. T. A. con la muestra del
paciente.
ii. Equipo Analizador hematológico automatizado
modelo XNL-350 con diferencial de 5 partes.
b. REACTIVOS DEL EQUIPO.
i. Lysercell WDF.
ii. Fluorecell WDF.
iii. CellPack DCL.
iv. Sulfolyser.
v. CellPack DFL.
vi. Fluorecel RET.
c. FROTIS O EXTENDIDO SANGUÍNEO.
i. Portaobjetos.
ii. Extensor.
iii. Torundas con alcohol.
iv. Reactivos de tinción rápida.
v. Capilares.
d. DIFERENCIAL.
i. Contador de células blancas.
ii. Microscopio.
iii. Aceite de inmersión.
PROCEDIMIENTO.
1. MODO OPERATIVO.
Se enciende por orden: IMPRESORA, COMPUTADOR, UNIDAD

PRINCIPAL Y COMPONENTES PRINCIPALES. Automáticamente al
encender se realiza una comprobación con un tiempo estimado de
15 minutos, esto es para verificar que no hay ninguna anomalía
en el procesador. Durante este tiempo se inician los
componentes mecánicos, el enjuague de los componentes
hidráulicos y la estabilización de la temperatura.
Al aparecer el computador dentro del software, se debe
ingresar. A continuación, aparecerá la pantalla principal. Se
debe pulsar en la opción “MODO DE ANÁLISIS” seguido de el modo
de “[WB]”. Se debe especificar el número de muestra. Una vez
8
identificado el número y los datos del paciente, se pulsará el

botón de inicio, se aspirará la muestra y los datos serán
arrojados en la pantalla.
ABSORBE 25 MICROLITROS DE MUESTRA.
2. EXTENDIDO.
1. Se realiza la extensión de la muestra utilizando un

portaobjetos.
2. Se deja caer una gota, no muy grande, de la muestra.
3. Con el extensor, en un ángulo de 45º se realiza una
técnica de arrastre de la gota sobre el portaobjeto.
4. Una vez extendida la muestra, se verifica si cumple con
el tamaño y grosor adecuados.
a. En caso de que no, repetir el procedimiento.
5. Rotular el portaobjetos con un lápiz.
6. Una vez seco, sumergir el extendido en el fijador.
a. 5 VECES EN 1 SEGUNDO.
b. DEJAR ESCURRIR EL EXCESO SOBRE UN PAPEL DE FILTRO.
7. Sumergir el extendido en eosina.
8. Sumergir el extendido en azul.
9. Enjuagar el frotis con solución tapón 7,2 pH.
10. Dejar secando.
3. DIFERENCIAL.
1. Una vez seco, el extendido se lleva al microscopio.

2. Se colocará el objetivo en 10x.
3. Se colocará el extendido sobre la platina.
4. Se le colocará una gota de ACEITE DE IMERSIÓN.
5. Se y enfocará el extendido a 10x.
6. Se ajustará a 100x para observar las células.
7. Los movimientos deberán ser en forma de cuadrados, de
arriba hacia abajo, de izquierda a derecha, abajo hacia
arriba, izquierda a derecha… etc.
8. Una vez identificadas las células, se deberán marcar en
el CONTADOR DIGITAL DE CÉLULAS.
9. Una vez contadas 100 células, reportar en la computadora.
9
PROCESAMIENTO DE RESULTADOS.
1. EQUIPO AUTOMATIZADO.
Los resultados se imprimen de forma automática, en base a

lo que el equipo registró al terminar el proceso.
2. DIFERENCIAL.
Los resultados del equipo se comparan con los del conteo

manual.
REACTIVOS.
a. XN - CHECK.
b. XN – CHECK B. F.
Constan de 2 y 3 niveles. Preparación estabilizada.
CONTROL DE CALIDAD ANALÍTICA.
MÉTODO DE CALIDAD PARA VIGILAR LA VARIACIÓN DIARIA MEDIANTE

SANGRE DE CONTROL.
1. X – BAR: Se introduce una muestra que se analiza dos

veces. La media de los resultados se usa como control.
2. L – J: Se analiza la sangre una vez y el resultado se usa
como dato de control.
10

MUESTRAS DE PX.
1. X – BARM: Calcula una media ponderada de 20 muestras de

pacientes y el resultado es el cual se usa.
Para el control de calidad se utilizan 3 tipos de control

con el fin de monitorear la estabilidad del instrumento.
TIPO DE CONTROL VENTAJAS DESVENTAJAS

CONTROL COMERCIAL CONVENIENTE, ALTO COSTO
ESTABLE Y USO EN MONETARIO,
LA MAYORÍA DE ESTABILIZACIÓN Y
PARÁMETROS. PURIFICACIÓN
CAMBIAN
PROPIEDADES
CELULARES.
MX RETENIDAS DE PX GRATIS; SE ANALIZAN BAJA ESTABILIDAD
CON MAYOR (24 HORAS) Y NO ES
FRECUENCIA QUE UN CONTROL PARA
CONTROL COMERCIAL. SUBPOBLACIONES DE
BUENO COMO CONTROL LEUCOCITOS
DE CORRIDA A (DIFERENCIAL).
CORRIDA Y DE TURNO
A TURNO.
PROMEDIOS MÓVILES ES GRATIS, SENSIBLE NO PUEDE DETECTAR A
DE PX A CAMBIOS SUTILES TIEMPO LAS
EN PERIÓDOS LARGOS DESVIACIONES Y
DE TIEMPO (HEMATÍES TENDENCIAS DE
Y LEUCOCITOS) Y PARÁMETROS MEDIDOS
MONITOREO CONSTANTE DIRECTAMENTE
DE LOS INSTRUMENTOS (DEPENDIENTES DE
CON ESFUERZO POBLACIÓN).
MÍNIMO.
11
RESULTADOS, VALORES E INTERVALOS DE REFERENCIA.

1. ANOMALÍAS DE LOS VALORES.
Entre los resultados que afectan a la serie eritrocitaria se
encuentran:
a) ANEMIA POR DEFICIECIA DE HIERRO.
b) ANEMIA MEGALOBLÁSTICA.
c) ANEMIA APLÁSICA.
d) ESFEROCITOSIS HEREDITARIA.
e) ANEMIA HEMOLÍTICA POR ANTICUERPOS.
Entre los resultados que afectan a la serie linfoide se
encuentran:
a) LEUCEMIA AGUDA.
b) LEUCEMIA GRANULOCÍTICA CRÓNICA.
Entre los resultados que afectan a la serie plaquetaria se
encuentran:
a) PÚRPURA TROMBOCITOPÉNICA POR ANTICUERPOS.
2. VALORES NORMALES e INTERVALOS DE REFERENCIA.
Como la nota lo
expresa,
dependiendo del
lugar en donde
se encuentre el
laboratorio,
estos manejan
sus intervalos
o valores de
referencia.
Imagen I.
Valores
Normales de la
Biometría
Hemática. UNAM.
12
FORMATO DE LABORATORIO DE UNA CITOMETRÍA HEMÁTICA.

Nombre: Edad: Sexo:
Id: D.H._#_0001 <- DEPARTAMENTO de HEMATOLOGÍA_#_0001.
A quien corresponda:
CITOMETRÍA HEMÁTICA
Líquido SANGRE ENTERA Cavidad
Color de tubo: Lila [E.D.T.A.] “Inserte color de tubo y el agente anticoagulante”
PARÁMETRO VALOR DEL PX VALOR DE UNIDADES
REFERENCIA
WBC 4.0 – 11.5 10e3 / uL
LYN 1.0 – 4.8 L
MID 0.0 – 0.8 M
GRA 1.8 – 7.0 G
RBC 4.0 – 5.4 10e6 / L
HGB 11.7 – 16.3 g / dL
HCT 35.1 – 48.9 %
MCV 81.1 – 96.0 fL
MCH 27.0 – 31.2 pg
MCHC 31.8 – 36.0 G / dL
RDW 11.5 – 14.5 %
MPV 6.9 – 10.6 fL
PLT 150.0 – 400.0 10e3 / uL
DIFERENCIAL
DIFERENCIAL RESULTADO VALOR DE UNIDADES
REFERENCIA
SEGMENTADOS 43 – 76 %
BANDAS 0–4 %
LINFOCITOS 25 – 40 %
MONOCITOS 4 – 10 %
EOSINÓFILOS 1–4 %
BASÓFILOS 0–1 %
Observaciones:
Validado por:
___________________________
MÉRIDA, YUCATÁN. “FECHA” FIRMA DEL RESPONSABLE
13
VALIDACIÓN.
La validación de los resultados es responsabilidad del

jefe de departamento. Es el único quien puede dar autorización
de que los resultados se encuentran listos para ser enviados
a la siguiente fase: ENTREGA DE RESULTADOS.
DOCUMENTOS RELACIONADOS.
MANUAL DE USO DEL EQUIPO SYSMEX XNL – 350 Y DEMÁS LÍNEA.
BIBLIOGRAFÍA.
1. López-Santiago N. La biometría hemática. Acta Pediatr

Mex. 2016;37(4):246-249.
2. https://www.sysmex.com/la/es/Products/Documents/Lamina_S
ERIEXNL_SP_new_v04_low.pdf
3. https://www.itwreagents.com/download_file/info_point/IP-
016/es/IP-016_es.pdf
4. Almaguer Gaona C. Interpretación clínica de la biometría
hemática. In: Pérez J, Almaguer D. eds. Hematología. La
sangre y sus enfermedades, 4e. McGraw Hill; 2016. Accessed
octubre 14, 2022.
https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?bookid
=1732&sectionid=121014199
14
R E T I C U L O C I T O S
M A N U A L E S
FUNDAMENTO.
Los reticulocitos son células de la línea hematopoyética

los cuales se encuentran en su penúltimo estado de maduración,
antes de convertirse en eritrocitos o células rojas. Conservan
restos de material retículo - filamentoso constituido
principalmente por ARN y proteínas.
El proceso de maduración a eritrocitos ocurre en la médula
ósea, durante al menos 3 días y 1 día en la sangre periférica,
implicando la eliminación paulatina del material reticular
intracitoplasmático.
Cuando hay una anemia existente, se puede sospechar de una
mala fabricación de la línea eritropoyética en la médula ósea.
Se busca el conteo de los reticulocitos para conocer si se
están sintetizando de forma compensatoria a la falta de
eritrocitos maduros.
1. Reticulocitos: Células hemáticas inmaduras.
2. Manual: Que es fabricado o realizado a mano, sin o con
poca ayuda de un equipo automático.
3. Línea eritropoyética: Perteneciente a la evolución en la
maduración del eritrocito u/o hematíe.
4. ARN: Ácido Ribonucleico.
5. E. D. T. A: Compuesto ácido que evita la coagulación de
la sangre gracias a la afinidad del mismo con el hierro.
15
MANUAL:
Consiste en la tinción de los reticulocitos con azul de

cresil brillante, azul de metileno u otras tinciones que
penetran la célula in vivo, precipitando el ácido nucleico,
apareciendo redes azules en el proceso.
AUTOMATIZADO:
Los ácidos nucleicos de los reticulocitos y de los

leucocitos se tiñen con un colorante fluorescente (FLUOROCELL
– RET). Se estabilizan con un diluyente (CELLPACK DFL). Debido
a su grado de inmadurez, los reticulocitos se diferencian de
los eritrocitos gracias a la intensidad de la fluorescencia
que desprenden.
La citometría de flujo usa un láser semiconductor que
genera un disperso - grama que representa la intensidad de luz
fluorescente en el eje x, y la intensidad de luz dispersa
frontal en el eje Y. Esta herramienta representa las
poblaciones de: RET – RWB – PLT. Por su parte, los RET son
divididos en tres zonas de acuerdo al grado de intensidad que
presenten y cada proporción de los reticulocitos de cada zona
se calcula en base a un número total.
Para la RET – Hb el equipo realiza un algoritmo para
determinarla, derivado de la medición de los RET por
fluorescencia.
16
ALMACENAMIENTO.

CELLPACK DCL 15 – 35 ºC
CELLPACK DST 2 - 35 ºC 15 – 30 ºC
CELLPACK DFL 60 DÍAS
SULFOLYSER 1 – 30 ºC
LYSERCELL WDF
FLUOROCELL 90 DÍAS
WDF 2 – 35 ºC 15 – 35 ºC
FLUOROCELL
RET -
CELLCLEAN 1 – 30 ºC
AUTO -
AZUL DE
CRESIL 5 – 30 ºC - -
BRILLANTE
ACEITE DE 15 – 25 ºC - -
INMERSIÓN
EQUIPO.
MANUAL: -
AUTOMATIZADO: ANALIZADOR HEMATOLÓGICO “SYSMEX” XN – L

350.
MUESTRA.
17
PREPARACIÓN.

e. PROCESO MEDIANTE EL EQUIPO AUTOMATIZADO.
i. Tubo lila con E. D. T. A. con la muestra del
paciente.
ii. Equipo Analizador hematológico automatizado
modelo XNL-350 con diferencial de 5 partes.
f. REACTIVOS DEL EQUIPO.
i. Lysercell WDF.
ii. Fluorecell WDF.
iii. CellPack DCL.
iv. Sulfolyser.
v. CellPack DFL.
vi. Fluorecel RET.
g. FROTIS O EXTENDIDO SANGUÍNEO.
i. Portaobjetos.
ii. Extensor.
iii. Torundas con alcohol.
iv. Reactivo colorante para los reticulocitos.
v. Capilares.
h. DIFERENCIAL.
i. Contador de células blancas (puede usarse
cualquier campo para reticulocitos).
ii. Microscopio.
iii. Aceite de inmersión.
PROCEDIMIENTOS.
PROCEDIMIENTO AUTOMATIZADO
1. MODO OPERATIVO.
Se enciende por orden: IMPRESORA, COMPUTADOR, UNIDAD

PRINCIPAL Y COMPONENTES PRINCIPALES. Automáticamente al
encender se realiza una comprobación con un tiempo estimado de
15 minutos, esto es para verificar que no hay ninguna anomalía
en el procesador. Durante este tiempo se inician los
componentes mecánicos, el enjuague de los componentes
hidráulicos y la estabilización de la temperatura.
18
Al aparecer el computador dentro del software, se debe

ingresar. A continuación, aparecerá la pantalla principal. Se
debe pulsar en la opción “MODO DE ANÁLISIS” seguido del modo
de “[WB]”. Se debe especificar el número de muestra. Una vez
identificado el número y los datos del paciente, se pulsará el
botón de inicio, se aspirará la muestra y los datos serán
arrojados en la pantalla.
ABSORBE 25 MICROLITROS DE MUESTRA.
PROCEDIMIENTO MANUAL
1. PREPARACIÓN DE LA TINCIÓN.
I. Mezclar 80 mL de solución salina con 20 mL de citrato

sódico al 3%.
II. Pesar 1 g de azul de cresil brillante y lo disolvemos
en la mezcla anterior.
III. Filtrar.
2. EXTENDIDO.
1. En un tubo de ensaye de cristal se colocan 150 microlitros

(3 gotas) de colorante previamente filtrado.
2. Se le adicionarán 150 microlitros de sangre (3 gotas).
3. Se mezcla suavemente, se tapa el contenido con papel
parafina o con un tapón.
4. Se introduce a baño maría por al menos 10 minutos, a 37ºC.
5. Se vuelve a homogenizar el contenido una vez terminados
los 10 minutos.
6. Se toma una gota con un capilar y se deposita en un
portaobjetos.
7. Se realiza el extendido sanguíneo con el extensor y se
deja secar.
8. Una vez seco se rotula y se observa en el microscopio.
3. DIFERENCIAL.
9. Una vez seco, el extendido se lleva al microscopio.

10. Se colocará el objetivo en 10x.
19
11. Se colocará el extendido sobre la platina.

12. Se le colocará una gota de ACEITE DE IMERSIÓN.
13. Se y enfocará el extendido a 10x.
14. Se ajustará a 100x para observar las células.
15. Se contarán 500 células en total, correspondiendo a
100%.
16. Con los reticulocitos encontrados se hará una
proporción.
1. EQUIPO AUTOMATIZADO.

lo que el equipo registró desde el inicio.
2. DIFERENCIAL.
Los resultados del equipo se comparan con los del conteo

manual.

SANGRE DE CONTROL.
3. X – BAR: Se introduce una muestra que se analiza dos

veces. La media de los resultados se usa como control.
4. L – J: Se analiza la sangre una vez y el resultado se usa
como dato de control.
20

MUESTRAS DE PX.
2. X – BARM: Calcula una media ponderada de 20 muestras de

pacientes y el resultado es el cual se usa.
Para el control de calidad se utilizan 3 tipos de control

con el fin de monitorear la estabilidad del instrumento.
TIPO DE CONTROL VENTAJAS DESVENTAJAS

CONTROL COMERCIAL CONVENIENTE, ALTO COSTO
ESTABLE Y USO EN MONETARIO,
LA MAYORÍA DE ESTABILIZACIÓN Y
PARÁMETROS. PURIFICACIÓN
CAMBIAN
PROPIEDADES
CELULARES.
MX RETENIDAS DE PX GRATIS; SE ANALIZAN BAJA ESTABILIDAD
CON MAYOR (24 HORAS) Y NO ES
FRECUENCIA QUE UN CONTROL PARA
CONTROL COMERCIAL. SUBPOBLACIONES DE
BUENO COMO CONTROL LEUCOCITOS
DE CORRIDA A (DIFERENCIAL).
CORRIDA Y DE TURNO
A TURNO.
PROMEDIOS MÓVILES ES GRATIS, SENSIBLE NO PUEDE DETECTAR A
DE PX A CAMBIOS SUTILES TIEMPO LAS
EN PERIÓDOS LARGOS DESVIACIONES Y
DE TIEMPO (HEMATÍES TENDENCIAS DE
Y LEUCOCITOS) Y PARÁMETROS MEDIDOS
MONITOREO CONSTANTE DIRECTAMENTE
DE LOS INSTRUMENTOS (DEPENDIENTES DE
CON ESFUERZO POBLACIÓN).
MÍNIMO.
REACTIVOS.
a. XN - CHECK.
b. XN – CHECK B. F.
21
1. Porcentaje de reticulocitos:
Nº DE RETICULOCITOS
% RET: ---------------------- x 100%
500 CÉLULAS
2. Recuento de reticulocitos:
Medición directa y el valor se ofrece en porcentaje o

cifra absoluta (/mm3 o %).
% RET. X HEMATOCRITO DEL PACIENTE (L/L)

RRC o IR: ---------------------------------------
HEMATOCRITO DE REFERENCIA (L/L)
Valor de referencia de Hematocrito: 0.45.
3. Índice de producción eritrocitaria:
Corrección de valores porcentuales en función al incremento

del tiempo de su vida media en circulación acorde al grado de
anemia.
% RET. X HEMATOCRITO DEL PACIENTE (L/L)

IPR: ---------------------------------------------------
FACTOR DE CORRELACIÓN DEL HEMATOCRITO DE REFERENCIA (L/L)
Factor de correlación en un individuo sano: 1 para 0.45 L/L.
22
4. VALORES.
Valores altos del recuento absoluto de reticulocitos se

observan en:
1. Anemias hemolíticas congénitas.
2. Anemias hemolíticas inmunológicas.
3. Infestaciones por plasmodium falciparum.
4. Anemias hemorrágicas agudas.
Valores bajos del recuento absoluto de reticulocitos se
observan en:
1. Anemias hemorrágicas crónicas.
2. Anemias por trastornos en la utilización del hierro.
a. Ferripriva.
b. Enfermedad crónica.
c. Enfermedad sideroblástica.
3. Defectos o supresión de la actividad eritropoyética.
a. Anemia aplásica.
b. Anemia por infiltración medular metastásica.
4. Anemias que se producen por anomalías en la síntesis del
A. D. N.
a. Anemias megaloblásticas.
5. VALORES NORMALES.
DÍAS DE VIDA RETICULOCITOS (%)

1 DÍA 3 – 7
7 DÍAS < 0.1 – 3
4 SEMANAS < 0.1 – 2
8 SEMANAS 0.1 – 2.9
12 SEMANAS 0.4 – 1.6
> 12 SEMANAS 0.2 – 2.0
23
FORMATO DE LABORATORIO DE UN RECUENTO MANUAL DE

RETICULOCITOS.
Nombre: Edad: Sexo:
CONTEO DE RETICULOCITOS MANUALES
Plasma SANGRE TOTAL Suero
Color de tubo: Lila. [E. D. T. A]

VALOR DEL PX VALOR DE UNIDAD
REFERENCIA
3 – 7 (< 12 SEMANAS) %
0.2 – 2.0 (> 12 %
SEMANAS)
Técnica: Tinción con azul de cresil.
Observaciones:
Validado por:
_________________________________
FIRMA DEL RESPONSABLE
MÉRIDA, YUCATÁN. “FECHA”
24
VALIDACIÓN.

MANUAL DE USO DEL EQUIPO SYSMEX XNL – 350 Y DEMÁS LÍNEA.
BIBLIOGRAFÍA.
Laser L, Hernández H, Teresa I, Fundora Sarraff A, Andrade LM,

Ii R. El conteo automático de reticulocitos: una herramienta
de uso diagnóstico, clínico e investigativo Automated
reticulocyte count: a tool for diagnostic, clinical and
research use [Internet]. Sld.cu. [citado el 2 de noviembre de
2022]. Disponible en:
http://scielo.sld.cu/pdf/hih/v31n4/hih04415.pdf
Perfil VT Mi laboratorio de Hematología [Internet].
Blogspot.com. [citado el 2 de noviembre de 2022]. Disponible
en:
https://laboratoriohematologiadefelipe.blogspot.com/2015/05/
reticulocitos.html
25
F A C T O R R. H.
Y G R U P O S S A N G U Í N E O S
FUNDAMENTO.
El sistema ABO es de interés clínico. Pese a que se

clasifican en cuatro grupos sanguíneos; A, B, AB y O, existen
más subgrupos que exhiben diferentes patrones y grados de
aglutinación. Este sistema de igual manera es llamado: SISTEMA
DE GRUPO HISTO – SANGUÍNEO.
Los antígenos del sistema ABO están compuestos por
azúcares que protruyen de la membrana de la superficie de los
eritrocitos, unidos a un componente denominado ceramida, la
cual se encuentra en la membrana de estos. Una serie de cuatro
azúcares se une a la ceramida. A esta estructura se le unen
otros azúcares que le dan especificidad a cada antígeno ABO.
1. Grupo sanguíneo: Sistema de clasificación de la sangre
humana.
2. Membrana: Compuesta de moléculas orgánicas entrelazadas,
su función es delimitar.
3. Ceramida: Lípidos encontrados en la piel que funcionan
para unir las células y evitar la sequedad.
4. Especificidad: Específico a…
5. Eritrocito: Último producto de la línea eritrocitaria. Su
función es llevar oxígeno a las células.
La prueba para la clasificación sanguínea de rutina se

basa en una técnica de hemaglutinación. Se usan reactivos
comerciales que contienen anticuerpos específicos para cada
antígeno, que se mezclan con la sangre a clasificar.
26
ALMACENAMIENTO.

ANTI – A. 2 – 8 ºC - -
ANTI – B. 2 – 8 ºC - -
ANTI – A, B. 2 – 8 ºC - -
EQUIPO.
EL PROCESO ES COMPLETAMENTE MANUAL.
MUESTRA.
PREPARACIÓN.

a. Placas de porcelana.
b. Tubo lila con E. D. T. A; suministrado con sangre
periférica.
c. Puntas amarillas.
d. Micropipetas.
e. Reactivos:
1. ANTI – A.
2. ANTI – B.
3. ANTI – A - B.
f. Marcador SHARPIE para rotular.
27
PROCEDIMIENTOS.
1. Tomar la sangre periférica mediante la venopunción.

2. Dejar 2 minutos en la mezcladora automática.
3. Preparar la porcelana rotulando: A – B – O
respectivamente.
4. Aplicar 2 gotas con ayuda del gotero de cada reactivo
“ANTI” en cada pozo de la porcelana.
5. Con ayuda de una micropipeta, colocar 50 uL de sangre en
cada uno de los pozos con el reactivo respectivo.
6. Con ayuda de un aplicador, mezclar hasta homogenizar la
sangre y el reactivo.
7. Mover manualmente sobre la mesa por al menos 2 minutos.
8. Leer la aglutinación macroscópica.
1. AGLUTINACIÓN:
En A: Positivo a GRUPO A.
En B: Positivo a GRUPO B.
En O: Positivo a GRUPO O.
En AB: Positivo a GRUPO AB.
En AO: Positivo a GRUPO A POSITIVO.
En BO: Positivo a GRUPO B POSITIVO.
En ABO: Positivo a GRUPO AB POSITIVO.
SI EL O ES NEGATIVO, POR ENDE, SE ASUME QUE TANTO A, B Y AB +

O SON NEGATIVOS PARA O.
28
FORMATO DE LABORATORIO DE UNA HEMOCLASIFICACIÓN.

Nombre: Edad: Sexo:
GRUPO SANGUÍNEO
Plasma SANGRE TOTAL Suero
Color de tubo: Lila. [E. D. T. A]

GRUPO SANGUÍNEO AGLUTINÓ NO
AGLUTINÓ
A
B
AB
O
TIPO DE SANGRE
Técnica: Hemoaglutinación.
Observaciones:
Validado por:
______________________________
29
VALIDACIÓN.

INSERTO DEL PRODUCTO.
BIBLIOGRAFÍA.
Alberto C, García A. Sistema de grupo sanguíneo ABO [Internet].

Unam.mx. [citado el 2 de noviembre de 2022]. Disponible en:
https://biblat.unam.mx/hevila/Medicinalaboratorio/2009/vol15
/no7-8/2.pdf
DETERMINACION GRUPO SANGUINEO. SISTEMA ABO-Rh REF: ABO-Rh 12
Estudiantes [Internet]. Bioted.es. [citado el 3 de noviembre
de 2022]. Disponible en:
https://www.bioted.es/protocolos/DETERMINACION-SISTEMA-AB0-
Rh.pdf
30
QUÍMICA
ANALÍTICA
31
O B J E T I V O
D E L
M A N U A L

procesos y métodos en relación al área de química analítica,
con el objetivo de llevar un control sobre los procedimientos
que serán puestos en práctica con diferentes muestras

departamento de química analítica utilizarán tubos al vacío BD
Vacutainer Rojo o Amarillo con gel separador y aditivos con
contenido de suero previamente separado de la fracción
eritrocitaria.

departamento clínico de química analítica.

32
Q U Í M I C A S A N G U Í N E A
FUNDAMENTO.
El proceso de Bioquímica Clínica es una ciencia

cuantitativa, y sustento de ayuda médica, para identificación
de diferentes patologías, por medio de concentraciones o
actividades de sustancias (iones, moléculas, complejos)
llamadas analitos, presentes en los líquidos corporales: como
sangre, plasma, suero, orina, líquido cefalorraquídeo.
1. Analito: Componente de interés en la muestra a
procesar.
2. Slide: Reactivo en forma de rebanada de plástico.
3. Colorimétrico: Medidas cuantitativas y cualitativas
en base al color.
4. Potenciométrico: Componente electrónico que permite
controlar la intensidad de corriente.
5. Reactivo: Sustancia que produce una reacción.
El equipo Fujifilm NX 500i es un equipo de química seca que

usa el método colorimétrico y el método potenciométrico. Los
métodos fotométricos son técnicas analíticas basadas en la
medición de la radiación electromagnética absorbida, reflejada
o emitida por una sustancia dispersantes en una solución.
Para efectos cuantitativos, todas ellas se basan en la
aplicación de la ley de Lamber Beer, ley que establece
básicamente una proporción lineal entre la magnitud de la
absorción y la concentración de las sustancias absorbentes.
A través de estos métodos fotométricos, es posible medir
con gran precisión muchas sustancias coloreadas por fotometría
visual o colorimetría. La colorimetría consiste en la
comparación visual del color de las soluciones de las
33
substancias problema con una serie de patrones, hasta

conseguir la coincidencia. Esta técnica entonces nos permite
la identificación demuestras a través de la comparación de
sustancias patrón, y una vez que se consigue la igualación
visualmente intensa de los colores de las soluciones, se miden
las longitudes de solución, aplicando la ley de Beer se calcula
la concentración y la identificación de nuestra sustancia.
El método potenciométrico implica la medición de una
diferencia de potencial entre dos electrodos diseñados a tal
efecto. Desde el punto de vista analítico se intenta que esta
diferencia de potencial tenga una relación proporcional con la
concentración de algún analito de interés.
QUÍMICA SANGUÍNEA DE 6 ELEMENTOS.
COLESTEROL.
uL de plasma o suero se deposita sobre una FUJI DRI-CHEM

SLIDE TCHO-PIII. Después la muestra se difunde uniformemente
sobre la capa de difusión en donde la lipoproteína es disociada
en lípidos (colesterol) y proteínas por la acción del
sufactante. Después de esto, el ester del colesterol es
hidrolizado para producir formas libres de colesterol por la
clolesterol esterasa (CHE). Este colesterol libre y colesterol
endógeno genera peróxido de hidrogeno por la reacción con el
colesterol oxidasa (COD). El peróxido de hidrogeno y la
peroxidasa (POD) oxidan el leucocolorante para formar un color
azul. La placa es incubada a 37 ° C en un tiempo establecido
en el Analizador FUJI DRI-CHEM y la densidad de la reflexión
óptica es medida a 505 nm. La densidad de reflexión óptica es
convertida hacia concentración de concentración total
utilizando una curva de calibración preinstalada en el
analizador.
GLUCOSA
10 μL de plasma o suero se deposita sobre una placa FUJI

DRI-CHEM SLIDE GLU-PIII.
La muestra se extiende uniformemente sobre la capa de difusión
y se difunde en la capa subyacente. A medida que avanza el
proceso, componentes de gran peso molecular tales como
proteínas o colorantes son filtrados, y sólo los componentes
moleculares pequeños son capaces de permear y difundirse en la
34
capa reactiva. La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la oxidación

de la glucosa de la muestra para generar peróxido de hidrógeno.
En presencia de peroxidasa (POD), el peróxido de hidrógeno
reacciona con precursores de colorantes y finalmente forma un
colorante rojo. La placa se incuba a 37 ° C durante un tiempo
establecido en el Analizador FUJI DRI-CHEM y la densidad de
reflexión óptica se mide a 505 nm. La densidad de reflexión
óptica se convierte luego en la concentración de glucosa
utilizando una curva de calibración preinstalada en el
analizador.
ÁCIDO ÚRICO.
Se depositan 10 L de plasma en un FUJI DRI-CHEM SLIDE UA-

PIII. Después de depositar la muestra se esparce uniformemente
sobre la capa de difusión y el ácido úrico en la muestra se
hidroliza en la capa enzimática por uricasa. En este proceso,
se genera peróxido de hidrógeno (H2O2), que oxida el colorante
leuco de diarilimidazol por la acción de la peroxidasa (POD)
para formar un tinte de color azul. El portaobjetos se incuba
a 37 °C durante un tiempo fijo en el FUJI DRI-CHEM y el óptico
la densidad de reflexión se mide a 650 nm.
BUN
10 μL de plasma o suero se deposita sobre una FUJI DRI-

CHEM SLIDE BUN-PIII. Después de depositar, la muestra se
extiende uniformemente sobre la capa de difusión, el cual
filtra grandes componentes moleculares (proteínas y
colorante), y penetra en la capa de reacción. La urea se
descompone en amoníaco y dióxido de carbono mediante la
reac¬ción con la ureasa. En un pH alcalino, se genera gas de
amoníaco en la placa. El gas penetra a través de la capa de
permeación de gas (capa porosa) alcanzando la capa de
detección. El verde de Bromocresol contenido en la capa de
detección vira de amarillo a verde por el gas amoníaco. El
cambio de color es proporcional a la concentración de nitrógeno
de urea.
35
TRIGLICÉRIDOS
10 µL de plasma o suero se deposita sobre una laminilla

FUJI DRI-CHEM TG-PIII. Después la muestra se difunde
uniformemente sobre la capa de difusión en donde la
lipoproteína es hidrolizada por la LPL para formar glicerol
que se difunde hacia la capa subyacente. En la capa de
reacción, el glicerol es convertido a glicerol-3-fosfato en
presencia de glicerolcinasa (GK) y además a dihidroxiacetona-
3-fosfato por la acción de glicerol-3-fosfato oxidasa (GPO).
En este proceso es generado peroxido de hidrogeno (H2O2), El
cual oxida la diarilimidazol leuco-colorante por la acción de
la peroxidasa (POD) y así formar un colorante azul1. La
laminilla es incubada a 37°C en un tiempo establecido en el
analizador FUJI DRI-CHEM y la densidad de la reflexión óptica
es medida a 650 nm. La densidad de reflexión optica es
convertido hacia concentración de triglicéridos utilizando una
curva de calibración preinstalada en el analizador.
CREATININA
10 µL de plasma o suero se deposita sobre una FUJI DRI-

CHEM SLIDE CRE-PIII. La muestra difunde hacia la capa adyacente
después de dispersarse sobre la capa de difusión. La muestra
penetra hacia la capa de reacción. El amoniaco endógeno es
removido por la acción del ácido α-cetoglutárico, glutamato
deshidrogenasa (GLDH) y NAPDH. La creatina es descompuesta por
la acción de la creatinina deiminasa (CD) en la capa de
reacción para formar un gas de amoniaco. Éste gas penetra hacia
la capa permeable hasta llegar a la capa de detección. El
colorante Azul de bromofenol cambia de color amarillo a azul.
La placa es incubada a 37°C por un tiempo determinado y se
mide la reflexión óptica a 600nm, que posteriormente es
convertido a la concentración de creatinina utilizando una
curva de calibración pre-instalada en el equipo.
36
ALMACENAMIENTO.

GLUCOSA 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
CREATININA 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
CALCIO 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
COLESTEROL 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
BILIRRUBINA 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
TOTAL
T. G. O. 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
T. G. P. 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
ÁCIDO ÚRICO 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
TRIGLICÉRIDOS 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
FÓSFORO 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
ALP 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
GGT 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
AMILASA 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
PROTEÍNAS 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
TOTALES
L. D. H. 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
ALBÚMINA 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
LIPASA 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
BILIRRUBINA 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
DIRECTA
SODIO 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
POTASIO 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
CLORO 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
CONTROL Q. P 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 30 DÍAS
– L
CONTROL Q. P 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 30 DÍAS
- H
CONTROL Q. E. 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 30 DÍAS
CKMB 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
CPK 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
P. C. R. 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
MAGNESIO 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
BUN 2 – 8 ºC 15 – 20 ºC 1 HORA
37
EQUIPO.
FUJI DRI CHEM - NX 500i
MUESTRA.
Tubo rojo con factores de coagulación / Tubo amarillo con

gel separador.
PREPARACIÓN.

a. PROCESO AUTOMATIZADO.
i. Tubo rojo / amarillo con gel separador con
muestra del paciente.
ii. Equipo Fujifilm NX 500i.
b. REACTIVOS DEL EQUIPO.
i. Slide colorimétricos.
1. Enzimas.
2. Química General.
ii. Slide potenciométrico.
1. Electrolitos.
iii. Puntas.
iv. Micropipetas.
v. Tubo de 0.5.
PROCEDIMIENTO.
1. MODO OPERATIVO.
I. Damos click en medición/measurement (Preparación de la

prueba para una prueba nueva).
II. Click en Prueba nueva/New test.
III. Aseguramos de que se despliegue la leyenda: lista
para la prueba/Ready to test.
38
IV. Colocamos los datos de nuestro paciente: Número de

Folio (Nro), Nombre del paciente (ID), Sexo, Tipo de
muestra a leer: Suero/Plasma, Sangre u Orina. Según
aplique.
V. Levantamos la cubierta del muestreador.
VI. Colocar la gradilla de muestra, cartuchos de
laminillas, puntas y muestra (según aplique al volumen de
la muestra es el tipo de volumen de la muestra es el tipo
de gradilla que se pondrá y tamaño de tubo de muestra,
para la succión del mismo). Nota 1: Cuando se trata de
procesar electrolitos séricos (Sodio, Potasio, Cloro), se
colocarán dos puntas en la posición d y c; los cuales
requieren un fluido de referencia, que se colocara en el
apartado RE.
VII. Cierre y bloquee la cubierta del muestreador con
llave.
VIII. Pulse el botón INICIO para iniciar la prueba, y
posterior a ello esperamos el tiempo a transcurrir para
el proceso: un tiempo aproximado de entre 5 y 6 min.
IX. Transcurrido este tiempo, validamos si los
resultados están correctos de acuerdo al estado clínico
de nuestro paciente. En caso de no haber leído uno de los
slide, validamos si posterior a ello hay que volver a
repetir realizando una dilución automatizada o bien
validar si fue por algún error propio del equipo o bien,
simplemente volver a realizar la prueba.
2. CAJA NUEVA DE SLIDES.
I. Este paso aplica cada que se abre una nueva caja a

procesar.
II. La tarjeta del nuevo lote de reactivos se pasa
directamente en la abertura al costado derecho.
III. Deberá aparecer el siguiente mensaje: SE HA LEÍDO LA
TARJETA Q. C.
3. DILUCIÓN AUTOMATIZADA DEL ANALITO.
Toda técnica de detección y cuantificación está determinada

por un nivel mínimo y uno máximo. En algunos casos, las
muestras pueden presentar concentraciones más elevadas de lo
que el método disponible es capaz de determinar eficazmente,
39
por lo cual es necesario realizar una dilución. A veces con

simplemente ver una turbidez en la muestra puedes llegar a
darte una idea de que pudiera ser un interferente espectral y
requiera una dilución post una dilución posterior. También se
debe ser cuidadoso en no diluir en exceso el compuesto deseado
a una concentración por debajo del nivel mínimo detectable, ya
que nos indica que el paciente se encuentra por debajo del
mínimo de rango que lee el equipo y este no requiere dilución.
I. Dejamos en equipo o colocamos la muestra a procesar

dilución, validando que haya suficiente muestra para
succión y no haya burbuja.
II. Colocamos las debidas puntas en los orificios “a” y
“b”, así como la taza para “b”, así como la taza para
mezclar en posición MIX en posición MIX UP.
III. En la TAZA PARA MEZCLAR con ayuda de una pipeta vierta
300-400 μl de diluyente (Agua inyectable).
IV. Colocamos los datos de nuestro paciente: Nro de Folio
(Nro), Nombre del paciente (ID), Sexo, Tipo de muestra
a leer: Suero/Plasma, Sangre total, Orina, Según
aplique.
V. Damos click en NONE para colocar la dilución ideal.
VI. Al realizar la siguiente prueba con el mismo No., ID,
sexo y tipo de muestra que los de la prueba anterior,
pulse el botón RERUN. Sólo puede cambiarse el ajuste
del campo Dilution/dilución.

lo que el equipo registró al terminar el proceso.
REACTIVOS DEL CONTROL.
Control Q. P – L.
Control Q. P – H.
Control Q. E.
40
Hidratación de controles: Sueros liofilizados, cuales

deben reconstituirse con agua inyectable, según la medida
mencionada en el reactivo. Hidratar por media hora.
Para el montaje: se emplean los reactivos para cada
determinación, del mismo modo como el montaje de las muestras
de pacientes. Una vez arrojado el resultado: Comparamos estos
valores con los valores de referencia.
Indicaciones de deterioro: Cuando los resultados
arrojados indican determinaciones muy alejadas de los
intervalos de control, para los sueros control interno. Lo
errores sistemáticos, arrojados por el programa estadístico,
puede sugerir deterioro en el suero control. En ese sentido,
es preciso descartar los viales preparados y congelados, esto
puede observarse al final de los montajes, con sueros con
tiempo de preparación superior a 20 días. Para los sueros
control externo, no aplica deterioro, ya que estos se emplean
una vez, son reconstruidos sin conservase.
41
ANALITO VALOR DE UNIDADES

REFERENCIA
H M
GLUCOSA 70 - 110 mg / dL
CREATININA 0.6 – 1.1 mg / dL
1.1
CALCIO 8.4 – 10.2 mg/dL
COLESTEROL 150 - 219 mg / dL
BILIRRUBINA 0.1 – 1.2 mg / dL
TOTAL
T. G. O. 8 - 38 U / L
T. G. P. 4 – 44 U / L
ÁCIDO ÚRICO 4 – 7 3 - 5 mg / dL
TRIGLICÉRIDOS 50 - 149 mg / dL
FÓSFORO 2.6 – 4.4 mg / dL
ALP 104 - 338 U / L
GGT 16 - 73 U / L
AMILASA 37 – 125 U / L
PROTEÍNAS 6.7 – 8.3 g / dL
TOTALES
L. D. H. 106 - 211 U / L
ALBÚMINA 3.8 – 5 g / dL
LIPASA 13 – 42 U / L
BILIRRUBINA 0.1 – 0.4 mg / dL
DIRECTA
SODIO 136 - 149 mmol - L
POTASIO 3.8 – 5 mmol / L
CLORO 98 - 106 mmol / L
CKMB < 25 U / L
CPK 40 - 30 - U / L
200 150
P. C. R. < 5 mg / L
MAGNESIO 1.8 – 2.4 mg / dL
BUN 8 - 23 mg / dL
Los valores de referencia pueden variar de acuerdo al

lugar en dónde se encuentre el laboratorio, tomando en
cuenta magnitudes físicas.
42
FORMATO DE LABORATORIO DE UNA QUÍMICA SANGUÍNEA.

Nombre: Edad: Sexo:
Id: D.Q.A._#_0001 <- DEPARTAMENTO de QUÍMICA ANALÍTICA_#_0001.
QUÍMICA SANGUÍNEA
Plasma SUERO Orina
Color de tubo: Rojo / Amarillo [GEL] “Inserte color de tubo y el agente
anticoagulante”
PARÁMETRO VALOR DEL PX VALOR DE UNIDADES
REFERENCIA
Observaciones:
Validado por:
___________________________
43
VALIDACIÓN.

Manual de instrucciones para el manejo del equipo: FUJI

DRI-CHEM NX 500i, analizador de Química clínica / Manual
operativo.
Insertos de cada “SLIDE”
BIBLIOGRAFÍA.
Balcells A. La clínica y el laboratorio. 21 edición, Edit. J.

M Prieto Valtueña, J. R Yuste Ara, 2010.
44
P R U E B A R Á P I D A D E E M B A R A Z O
E N S A N G R E
FUNDAMENTO.
La GONADOTROPINA CORIÓNICA HUMANA o en sus siglas: hCG,

es una hormona glucoproteica que es secretada en el desarrollo
de la placenta post fertilización. En un embarazo, el hCG puede
ser detectado en orina, plasma o suero entre 7 a 10 días
después de la concepción.
Los niveles del hCG aumentan exponencialmente en función
a las semanas de embarazo.
1. H. C. G: Gonadotropina coriónica humana.
2. Fertilización: Unión del óvulo con un espermatozoide
humano.
3. Inmunoensayo: Prueba que usa antígenos y anticuerpos, su
unión. Para identificar o medir ciertas sustancias.
4. Cromatografía: Método analítico que permite separación de
gases o líquidos de una mezcla por adsorción selectiva en
un medio adsorbente.
5. Anticuerpos: Proteína segregada por las células
plasmáticas en respuesta a un antígeno.
Inmunoensayo rápido cromatográfico. Detecta

cualitativamente la presencia de la HCG en orina, suero o
plasma. La tira utiliza dos líneas para indicar los resultados;
la de prueba utiliza anticuerpos (entre ellos el monoclonal
hCG). La línea de control se compone de anticuerpos
policlonales de cabra y partículas coloidales de oro. La
muestra migra por acción capilar por la membrana reaccionando
con las líneas que se tornan de un color vino.
45
ALMACENAMIENTO.

2 – 30 ºC
TIRA REACTIVA O ATEMPERAR -
“MONLAB” TEMPERATURA
AMBIENTE
EQUIPO.
Centrifugadora “VE-4000 PLUS CENTRÍFUGA DE BAJA

VELOCIDAD”.
MUESTRA.

gel separador.
PREPARACIÓN.
a. Suero en tubo amarillo o rojo.

b. Tiras reactivas “MONLAB” de prueba de embarazo en sangre.
c. Centrifugadora “VE-4000 PLUS CENTRÍFUGA DE BAJA
VELOCIDAD”.
d. Cronómetro (el teléfono celular servirá).
e. Gradilla o soporte para el tubo.
46
2. PROCEDIMIENTOS.
1. Se utilizará tanto un tubo amarillo como un tubo rojo

para la separación del suero. Una vez obtenida la muestra
se centrifugará en cuanto haya coagulación.
2. Se tomará un sobre con una tira “MONLAB” al momento que
se procese la muestra.
a. El sobre deberá reposar a temperatura ambiente.
3. Destaparemos tubo de ensaye previamente centrifugado y
abriremos por completo el sobre contenedor de la tira
“MONLAB”.
4. Identificaremos las flechas que indican la parte de la
tira que entrará en contacto con el suero.
5. Se sumergirá la tira durante 15 seg en el suero, una vez
pasado el tiempo, se dejará sobre el envoltorio de la
tira.
6. Se deberá esperar 5 – 10 minutos para la revelación de
las líneas.
a. Pasados los 10 minutos, una concentración baja de
HCG puede dar un resultado positivo. NO INTERPRETAR
PASADOS LOS 10 MINUTOS.
Se deben leer las instrucciones del inserto al pie de la

letra. El periodo de procesamiento es de 9 minutos, terminando
el límite (9 MINUTOS con 59 SEGUNDOS), el resultado será
inválido y se deberá rehacer el estudio.
REACTIVO DEL CONTROL.
ANTICUERPOS DE hCG.
El control consiste en la línea roja de la zona de

control. La aparición del mismo confirma un volumen de muestra
47
suficiente. La no aparición de la línea se considera un control

negativo en el procedimiento.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS.
1. POSITIVO: Aparecerán dos líneas coloreadas distintas. La

línea de la zona de control “(C)” quedará marcada y la
línea de la zona de prueba “(T)” también se marcará. Es
positivo aún si la línea “T” es menos tenue que la otra”.
2. NEGATIVO: Aparecerá una línea coloreada. La línea de la

zona de control “(C)” quedará marcada. No aparecerá ni
una línea coloreada en la zona de prueba “(T)”.
3. NO VÁLIDO: El resultado se vuelve no válido si no aparece

ni una línea tanto en la zona de control “(C)” como en la
zona de prueba “(T)”. Incluso si se marcase esta última,
se deberá repetir la prueba con otra tira.
4. INTERVALOS DE REFERENCIA:
POSITIVO = / > 10 mIU/ml.
NEGATIVO < 10 mIU/ml.
5. LIMITACIONES: La tira puede marcar falsos positivos

cuando:
a. Hay presencia de enfermedad trofoblástica.
b. Neoplasias.
c. Tumores testiculares.
d. Cáncer de próstata.
e. Cáncer de mama.
f. Cáncer de pulmón.
La tira puede marcar falsos negativos cuando:
g. Niveles de hCG se encuentran por debajo del nivel de
sensibilidad de la prueba (10 mIU/ml).
h. Pacientes que tengan anticuerpos de ratón. Cualquier
paciente que haya recibido terapia con anticuerpos
48
monoclonales pueden contener HAMA. Esto puede llevar

a resultados falsos positivos o falsos negativos.
i. Resultados se complementan con historia y revisión
clínica.
6. VALORES: Negativo en mujeres sanas no gestantes y varones

sanos. Mujeres saludables embrazadas tienen hCG presentes
en:
j. ORINA.
k. PLASMA.
l. SUERO.
La cantidad de hCG presente variará de acuerdo al tiempo de
gestación.
7. SUSTANCIAS INTERFERENTES:
SUSTANCIA INTERFERENTE CANTIDAD
Acetaminofeno > / = 20 mg/dL
Ácido Acetilsalicílico > / = 20 mg/dL
Ácido Ascórbico > / = 20 mg/dL
Atropina > / = 20 mg/dL
Bilirrubina > / = 2 mg/dL
Triglicéridos (suero / > / = 1,200 mg/dL
plasma)
Cafeína > / = 20 mg/dL
Ácido Gentísico > / = 20 mg/dL
Glucosa > / = 2 g/dL
Hemoglobina > / = 1 mg/dL
Bilirrubina (suero / plasma) > / = 40 mg/dL
49
FORMATO DE LABORATORIO DE UNA PRUEBA DE EMBARAZO EN SANGRE.

Nombre: Edad: Sexo:
PRUEBA DE EMBARAZO
Plasma SUERO Orina
Color de tubo: Rojo / Amarillo (GEL)
PARÁMETROS RESULTADO
POSITIVO
NEGATIVO
Técnica: Inmunoensayo cromatográfico.

Observaciones:
Validado por:
_________________________________
50
VALIDACIÓN.

INSERTO DE LA TIRA REACTIVA.
BIBLIOGRAFÍA.
Velázquez Nelson. La hormona gonadotrofina coriónica humana:

Una molécula ubícua y versátil. Parte I. Rev Obstet Ginecol
Venez [Internet]. 2014 Jun [citado 2022 Nov 01] ; 74( 2
): 122-133. Disponible en:
http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0048
-77322014000200006&lng=es.
Barrera D, Chirinos M, García-Becerra R, Zubirán S, Rincón D.
Mecanismos de regulación de la síntesis y secreción de la
gonadotropina coriónica humana (hCG) durante el embarazo
[Internet]. Medigraphic.com. [citado el 1 de noviembre de
https://www.medigraphic.com/pdfs/revinvcli/nn-
2008/nn082g.pdf
51
MICRO–
BIOLOGÍA
52
O B J E T I V O
D E L
M A N U A L

procesos y métodos en relación al área de microbiología, con
el objetivo de llevar un control sobre los procedimientos que

departamento de microbiología utilizarán medios de cultivo y
pruebas bioquímicas.

departamento clínico de microbiología.

53
C U L T I V O S B A C T E R I A N O S
FUNDAMENTO.
El cultivo de un microorganismo se basa en el conocimiento

de sus necesidades nutritivas y físicas. En el laboratorio
podemos preparar o seleccionar medios adecuados a las
necesidades de crecimiento de una bacteria. Un medio puede ser
de consistencia líquida, en este caso se denomina caldo, o
sólida, si se agrega agar al caldo. El agar es un polisacárido,
extraído de algas, que funciona como sustancia solidificante
e inerte, ya que no actúa como elemento nutritivo frente a la
gran mayoría de las bacterias. Se comercializa en forma de
polvo o gránulos finos y se puede agregar a cualquier caldo en
concentración de aproximadamente 15 a 20 gramos por litro, de
acuerdo a la calidad y grado de hidratación. El agar le
confiere al medio una consistencia sólida, o si se agrega en
menor cantidad se pueden preparar medios semisólidos. Muchos
de los adelantos de la Microbiología se debieron al uso del
agar, que ha permitido aislar y diferenciar bacterias, proceso
que no es posible en medios líquidos.
1. Fermentación: Utilización de carbohidratos en forma
anaerobia.
2. Incubación: Mantenimiento de cultivos bacterianos en
condiciones favorables para su desarrollo y
multiplicación.
3. Inóculo: Alícuota de una muestra que es transferida a un
medio de cultivo.
4. Medio de cultivo: Medio artificial de sustancias
nutritivas necesarias para el crecimiento y
multiplicación de las bacterias in vitro, que puede
encontrarse en estado sólido, semisólido o líquido.
5. Microorganismo viable: Es aquel que es capaz de
reproducirse
54
Se utilizan para conocer a qué familia, género, especie

o grupo pertenece una bacteria, como también para diferenciar
bacterias muy relacionadas. En el laboratorio de Bacteriología
Clínica se recurre normalmente a métodos destinados a poner de
manifiesto alguna propiedad bioquímica específica. Entre
ellas, podemos citar la determinación de la capacidad de la
bacteria en estudio de producir ciertas enzimas (coagulasa,
fosfatasa alcalina, catalasa, oxidasa), de hidrolizar algún
compuesto (esculina, urea), de producir acidez a partir de
hidratos de carbono.
Si bien existen reacciones bioquímicas que son bastante
definitorias, en general la información que proveen se debe
tomar en el contexto de la bacteria en estudio. Se debe hacer
una selección del mínimo número de reacciones bioquímicas a
estudiar para lograr una definición, teniendo en cuenta que no
es recomendable basarse en una única prueba para distinguir
entre dos especies. Dentro de los medios de identificación
existen algunos que se utilizan como multi - prueba. Por
ejemplo, el medio TSI (Triple Azúcar Hierro) en el cual después
de cultivar entre 18 y 24 horas un bacilo Gram negativo, se
pueden hacer simultáneamente varias lecturas, como producción
de ácido sulfhídrico, fermentación de glucosa, acidez a partir
de lactosa y/sacarosa y producción de gas.
Con esta lectura y alguna otra reacción, como la
producción de oxidasa, se tiene en muchos casos una buena
orientación inicial sobre la posible identidad de la bacteria.
Hay sistemas miniaturizados manuales (p.ej api) y
automatizados (p.ej Vitek, Micro Scan o Phoenix) que a través
de una combinación de pruebas, proveen un bionúmero que
confrontado en una base de datos nos da la identificación más
probable. También hay en el mercado discos y tabletas con
sustratos que con la utilización de un inóculo bacteriano denso
pueden detectar reacciones enzimáticas sin que exista
desarrollo de la bacteria.
55
ALMACENAMIENTO.
MEDIO DE TEMPERATURA DE TEMPERATURA VIABILIDAD EN

CULTIVO ALMACENAMIENTO DE USO EL FLUJO
LAMINAR
AGAR SANGRE 2 – 8 ºC 33 – 37 ºC 10 - 30
BASE MINUTOS
AGAR 2 – 8 ºC 33 – 37 ºC 10 - 30
CHOCOLATE MINUTOS
AGAR E. M. B. 2 – 8 ºC 33 – 37 ºC 10 - 30
MINUTOS
AGAR 2 – 8 ºC 33 – 37 ºC 10 - 30
MacConkey MINUTOS
AGAR 2 – 8 ºC 33 – 37 ºC 10 - 30
CHROMOBRIT MINUTOS
AGAR THAYER 2 – 8 ºC 33 – 37 ºC 10 - 30
MARTIN MINUTOS
AGAR MANITOL 2 – 8 ºC 33 – 37 ºC 10 - 30
SALADO MINUTOS
AGAR MUELLER 2 – 8 ºC 33 – 37 ºC 10 - 30
HINTON MINUTOS
AGAR SANGRE 2 – 8 ºC 33 – 37 ºC 10 - 30
(COLUMBIA) MINUTOS
EQUIPO.
PROCEDIMIENTO MANUAL.
MUESTRA.
Muestra de orina.
Muestra de sangre.
Herida operatoria.
Tracto respiratorio inferior.
56
SIEMBRA DE MUESTRA DE ORINA.
PREPARACIÓN.

a. Asa calibrada de platino o descartable de 0.001mL, 0.01
mL
b. Estufa de 35 – 37° C
c. Mechero Bunsen o Cabina de Flujo laminar
d. Guantes de látex
e. Contenedor de material contaminado
f. Pinza estéril
g. Propipeta o pipetor automático
h. Medios de cultivo
1. Placas con agar sangre de carnero (AS)
2. Placas con agar Mc Conkey (McC)
PROCEDIMIENTO.
a) Mantener las muestras en refrigeración (4° C) hasta su

procesamiento por cultivo.
b) Los cultivos deben realizarse en una cabina de
bioseguridad o cerca del mechero Bunsen.
c) Las placas con AS y McC que se utilizarán en el urocultivo
deben estar a temperatura ambiente. Rotular las placas.
d) Si el asa calibrada no es descartable, esterilizar el
asa de siembra flameándola en el mechero Bunsen hasta
que se ponga rojo vivo. Dejar enfriar el asa contando
hasta 20.
e) Tomar el frasco con la muestra de orina, abrir la tapa y
flamear la boca del frasco en el mechero Bunsen.
f) Tomar la muestra de orina con el asa de siembra estéril
introduciéndola y sacándola del frasco en forma vertical.
Tapar el frasco con la muestra.
g) Inocular en el centro de la placa con AS a partir del
cual se extiende la muestra, hacia delante y hacia atrás.
h) Luego, sin quemar el asa, el inoculo se disemina
uniformemente con trazos perpendiculares a la siembra
inicial en toda la placa.
i) Proceder de la misma forma para el agar Mc Conkey.
j) Esterilizar el asa de siembra en el mechero.
57
k) Concluida la siembra, cerrar la placa y colocarla con la

parte que tiene el medio de cultivo hacia arriba. Incubar
la placa de AS y Mc Conkey a 35 - 37° C en condiciones
aeróbicas por 24 horas.
LECTURA.
A. Realizar la evaluación a las 24 horas, si no hay

crecimiento bacteriano dejar incubar hasta las 48 horas.
B. La evaluación consiste en el recuento de colonias y se
multiplica por el factor de dilución para obtener las UFC
por mL.
INTERPRETACIÓN
a. En pacientes sin sonda vesical, la cuenta significativa

de bacterias en orina es la presencia de más de 105 UFC /
mL de un solo germen.
b. Los recuentos intermedios (103 - 104 UFC / mL) indican
infección si el procedimiento de recolección de orina fue
realizado correctamente.
c. Generalmente, el aislamiento de tres o más especies
bacterianas indica que la muestra se ha contaminado por
recolección inadecuada o demora en la siembra.
d. En pacientes con sonda vesical, cuentas bacterianas
menores de 105 UFC / mL pueden tener significado, así
también se pueden encontrar bacteriurias polimicrobianas
hasta en casi 15% de enfermos.
e. En pacientes sin catéter se puede comprobar si el
procedimiento de obtención de muestra fue realizado
correctamente observando la frecuencia con la cual se
informan recuentos de colonias intermedias entre 103 -
104 UFC / mL. En pacientes sin infecciones del tracto
urinario, el recuento es nulo o se reduce a pocas colonias.
f. En muestras obtenidas por punción suprapúbica, el
desarrollo de una sola colonia en el medio de cultivo
indica infección del tracto urinario.
58
SIEMBRA DE MUESTRA DE SANGRE.
PREPARACIÓN.

a. Estufa de 35 – 37° C
b. Mechero Bunsen o Cabina de Flujo laminar
c. Jeringa estéril
d. Guantes de látex
e. Alcohol al 70%
f. Contenedor de material contaminado
g. Medios de cultivo
1. Medio bifásico Ruiz Castañeda o monofásico
2. Agar sangre de carnero de carnero (AS).
3. Agar Mc Conkey (McC)
4. Se puede incluir otros medios (ejm. manitol
salado)
PROCEDIMIENTO.
a. Incubar el frasco de hemocultivo a 35 – 37° C hasta por 7

días.
b. Bañar la superficie de agar con el caldo inclinando el
frasco suavemente.
c. Examinar visualmente y con luz transmitida los frascos de
hemocultivo después de 12 y 24 horas de incubación.
d. La observación de turbidez o lisis de los glóbulos rojos
es indicativa de crecimiento bacteriano; entonces se
realizará una coloración Gram y un subcultivo. En los
medios bifásicos el desarrollo también se puede evidenciar
en la fase sólida mediante la formación de colonias
e. Si no se observa lisis de los glóbulos rojos o turbidez
en el caldo, o colonias en la fase sólida, continuar
observando todos los días para ver si aparecen signos de
crecimiento, hasta siete días después de haber iniciado
el procedimiento.
59
SUBCULTIVO.
a. Los subcultivos deben realizarse en cabina o cerca de un

mechero de Bunsen.
b. Realizar subcultivos ciegos dentro de las 12 y 24 horas
de incubación.
c. Para realizar los subcultivos desinfectar la superficie
de la tapa del frasco con alcohol de 70%.
d. Con una jeringa estéril, extraer a través del tapón de
jebe la muestra de sangre.
e. Inocular una gota de la muestra del hemocultivo en un
extremo de la superficie de las placas de agar sangre,
agar MacConkey y colocar cuidadosamente una gota sobre
una lámina portaobjetos para hacer un frotis y coloración
Gram.
f. Utilizando el asa de siembra y tomando como referencia
central el inoculo de la muestra, realizar la siembra por
dispersión agotamiento en los cuatro cuadrantes de la
placa, con el propósito de obtener colonias aisladas.
g. Incubar las placas de AS y agar McC a 35 - 37° C por 24
horas.
h. Observar la lámina coloreada y buscar la presencia de
bacterias.
i. Si no hay crecimiento a las 24 horas seguir incubando
hasta por 48 horas.
j. Si no hubiera desarrollo bacteriano, repetir el
procedimiento al 5° y 7° día.
LECTURA DE SUBCULTIVOS.
a. A las 24 horas observar el crecimiento de colonias. Si no

se observa desarrollo, incubar 24 horas más.
60
b. Cuando se ha confirmado crecimiento bacteriano por

subcultivo, se puede descartar el frasco de hemocultivo
siguiendo los procedimientos de bioseguridad.
c. En algunos casos el frasco de hemocultivo debe ser
retenido para mayor estudio.
d. En la interpretación de los resultados deben considerarse
los datos clínicos individuales.
Staphylococcus coagulasa negativo, corinebacterias y

especies de Bacillus son contaminantes frecuentes y a menudo
se aislan en sólo una de tres muestras. Si no hay leucocitos
y el paciente no tiene factores de riesgo para bacteremia por
estos gérmenes como inmunosupresión, prótesis, líneas de
acceso vascular e historia de adicción a drogas intravenosas
se puede concluir que la presencia de estos gérmenes se debe
a contaminación.
Se informará el resultado de cada frasco de hemocultivo
individualmente.
SIEMBRA DE MUESTRA DE HERIDA OPERATORIA.

PREPARACIÓN.

a. Estufa de 35 – 37° C.
b. Cabina de Flujo laminar o mechero Bunsen.
c. Guantes de látex.
d. Contenedor de material contaminado.
e. Medios de cultivo.
1. Agar sangre de carnero
2. Agar Mc Conkey
3. Pueden incluirse otros medios (ejm. Manitol
salado, agar Columbia CNA con 5% de sangre de
carnero, etc.)
61
PROCEDIMIENTO.
a. Realizar los cultivos en una cabina de bioseguridad o

cerca del mechero Bunsen.
b. Utilizar placas con medios de cultivo cuando éstas hayan
alcanzado la temperatura ambiente.
c. Inoculación de la muestra:
i. Muestra de aspirado purulento: Con una pipeta pasteur
inocular una gota de la muestra en un extremo de la
superficie de la placa de agar sangre de carnero, agar
Mc Conkey y/o otros medios.
ii. Hisopado de secreción: Frotar rotando el hisopo sobre
la superficie de los medios de cultivo tratando que
toda su superficie haga contacto con el agar,
empezando con el agar sangre de carnero, Mc Conkey y/o
otros medios.
d. Esterilizar el asa de siembra en el mechero de Bunsen
hasta que se ponga rojo vivo.
e. Dejar enfriar el asa contando hasta 20.
f. Utilizando el asa de siembra y tomando como referencia
dispersión agotamiento en cuatro cuadrantes de la placa,
con el propósito de obtener colonias aisladas (Véase
Figura 8).
g. Incubar las placas de AS a 35° C por 24 horas y el agar
McC en condiciones aeróbicas y por 24 horas.
h. Esterilizar el asa de siembra en el mechero.
i. Concluida la siembra, cerrar la placa y colocarla con la
parte que tiene el medio de cultivo hacia arriba.
j. Incubar las placas a 35 – 37° C por 24 - 48 horas en
condiciones aeróbicas.
62
LECTURA.
A las 24 horas observar el crecimiento de colonias. Si no

se observa crecimiento seguir incubando hasta las 48 horas.
SIEMBRA DE MUESTRA DEL TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR.
ASPIRADO TRAQUEAL:
PREPARACIÓN.

a. Estufa de 35 – 37° C
b. Mechero Bunsen o Cabina de Flujo laminar
c. Guantes de látex
d. Mascarilla
e. Contenedor de material contaminado
1. Agar sangre de carnero (AS)
2. Agar Mc Conkey (McC)
3. Pueden incluirse otros medios (ejm. Manitol
salado, agar cetrimide, etc.)
PROCEDIMIENTO.
CULTIVO.
a. Seleccionar la porción de la muestra más purulenta o que

contenga sangre.
b. Utilizando un hisopo estéril o una pipeta Pasteur,
inocular la muestra en un extremo de la superficie de las
placas con los medios de cultivo.
c. Utilizando el asa de siembra y tomando como referencia
63
dispersión agotamiento en cuatro cuadrantes de la placa,

con el propósito de obtener colonias aisladas.
d. Incubar las placas con los medios de cultivo a 35 – 37° C
por 24 a 48 horas.
e. Si no hay crecimiento a las 24 horas seguir incubando
hasta por 48 horas.
FROTIS.
a. Seleccionar la porción más purulenta de la muestra que

contenga sangre.
b. Suavemente extenderla en la lámina portaobjetos.
c. Dejar secar el frotis al aire, de preferencia dentro de
una cabina de flujo laminar.
d. Fijar con metanol y colorearlo por Gram.
e. Usar bajo aumento (10x) para examinar el frotis y la
determinación de polimorfonucleares y células escamosas.
LECTURA A LAS 24 HORAS.
Si no hubiera crecimiento incubar por 24 horas más.
El propósito de llevar a cabo el control de calidad en el

laboratorio de microbiología es asegurar al médico y al
paciente un diagnóstico confiable y oportuno mediante el
monitoreo de la exactitud, precisión, calidad de los reactivos
y pruebas realizadas, así como el desempeño laboral del
personal de laboratorio.
64
CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD.
Los colorantes y reactivos usados para la identificación

bacteriana deben probarse inmediatamente después de la
preparación y periódicamente para evaluar las características
de tinción esperadas y la correcta reactividad de los medios
apropiados con cepas referenciales o de reactividad conocida.
Debe llevarse un registro del control de calidad de los
medios de cultivo, colorantes y reactivos en el que se incluya:
fecha, número de control o lote, control positivo y negativo
utilizado, resultados de la prueba y nombre de la persona que
realizó la prueba. Los registros deben estar a disposición de
todo el personal del laboratorio.
Es necesario llevar registros de temperatura y de
mantenimiento de los equipos para documentar el correcto
funcionamiento de los mismos y demostrar que los hallazgos de
laboratorio constituyeron realmente determinaciones válidas.
Para asegurar la confiabilidad del diagnóstico
microbiológico de las infecciones intrahospitalarias se
realiza la verificación del cumplimiento de las
especificaciones contenidas en el presente Manual de
Procedimientos.
Se verifica el cumplimiento de la frecuencia programada
para controlar el estado de calibración de los equipos y los
medios de medición.
En caso de identificarse disconformidades en la
aplicación de las especificaciones, se informa al personal
responsable del laboratorio, quien decide la adopción de
medidas correctivas necesarias y la identificación de las
causas.
LOS MEDIOS DE CULTIVO SE TRANSPORTARÁN A UN LABORATORIO

MICROBIOLÓGICO DE REFERENCIA PARA SU IDENTIFICACIÓN.
65
FORMATO DE LABORATORIO DE IDENTIFICACIÓN BACTERIANA.

Nombre: Edad: Sexo:
Id: D.M._#_0001 <- DEPARTAMENTO de MICROBIOLOGÍA_#_0001.
CULTIVO BACTERIANO
Orina Sangre Herida Operatoria T. R. I.
Nº Muesta Tipo de Paciente Medio utilizado Resultado

Muestra

Muestra

Muestra
Observaciones:
Validado por:
___________________________
66
VALIDACIÓN.

INSERTOS DE LOS MEDIOS DE CULTIVO.
BIBLIOGRAFÍA.
Koneman E, Allen S, Dowell V, Sommers H. Diagnóstico

microbiológico. 3a ed Buenos Aires. Editorial Médica
Panamericana. 1992.
OPS. Vol IV Manual de prevención y control de infecciones
hospitalarias. Serie HSP/Manuales Operativos Paltex. N°13,
USA. 1996.
Reisner B, Woods G, Thomson R, Danse L, García L , Shimizu R.
Specimen processing. En: Murray PR, Baron EJ, Pfaller MA,
Tenover FC. Yolken RH. Manual of Clinical Microbiology. 7a ed.
Washington DC: American Society for Microbiology; 1999. pp 64
– 104.
Introducción a la microbiología clínica / Horacio Lopardo ...
[et al.]; coordinación general de Horacio Lopardo. - 1a ed
adaptada. - La Plata: Universidad Nacional de La Plata, 2016.
Libro digital, PDF
67
T I N C I Ó N
D E G R A M
FUNDAMENTO.
Es la tinción diferencial que clasifica grupos de bacterias

en bacterias GRAM POSITIVAS y bacterias GRAM NEGATIVAS. Es de
gran utilidad en el área de microbiología ya que, de muestras
entrantes se puede conocer de forma rápida las características
de la muestra y hacer una diferenciación de los potenciales
microorganismos causantes de una infección.
Este principio se basa en la pared celular de las bacterias.
Las de las bacterias GRAM NEGATIVAS está hecha de una capa
fina de peptidoglicano y una membrana celular externa, por
otro lado, la pared de las bacterias GRAM POSITIVAS es una
capa gruesa de peptidoglicano, pero no con una membrana celular
externa.
Las bacterias GRAM POSITIVAS, al tener una mayor cantidad
de peptidoglicano, retienen con mayor fuerza la tinción, en
cambio, las bacterias GRAM NEGATIVAS, no pueden retenerlo.
DEFINIFICIÓN Y TERMINOLOGÍA.
1. Tinción: Teñir o dar color.
2. Gram: Técnica de diferenciación de bacilos, en honor a
Hans Christian Gram.
3. Peptidoglicanos: Cadena de aminoazúcares.
4. Microorganismos: Organismos extremadamente pequeños.
5. Infección: Invasión y multiplicación de agentes patógenos
en los tejidos de un organismo.
TINCIÓN.
68
ALMACENAMIENTO.
REACTIVOS A TEMPERATURA AMBIENTE, SI SE REFRIGERAN (2 –

8 ºC), NO CONGELAR.
EQUIPO.
MANUAL: -
MUESTRA.
EXTENDIDO EN FRESCO (SANGRE, LÍQUIDOS, ORINA, FLUIDOS).
PREPARACIÓN.

a. Portaobjetos.
b. Hisopos.
c. Muestra del paciente en fresco.
d. Microscopio.
e. REACTIVOS:
i. CRISTAL VIOLETA.
ii. YODO – LUGOL.
iii. ALCOHOL – ACETONA.
iv. SAFRANINA.
f. Puente o soporte.
g. Sanitas o toallas de papel.
h. Mechero.
PROCEDIMIENTOS.
1. Con un hisopo estéril, se raspará la muestra en fresco

con una gota de solución salina y se colocará sobre un
portaobjetos limpio.
69
2. Se llevará al mechero encendido para fijar la muestra al

portaobjetos.
3. Una vez fijado se colocará el reactivo 1: CRISTAL VIOLETA.
Se debe abarcar todo el portaobjetos. Con el cronómetro,
se contará 1 minuto exacto.
4. Una vez pasado el minuto, se lavará a chorro indirecto,
que las gotas bajen por el pulgar. Retirado el exceso de
colorante se aplicará el reactivo 2: YODO – LUGOL. Se
abarcará todo el portaobjetos y se contará 1 minuto
exacto.
5. Pasado el tiempo, retiraremos el sobrenadante con agua de
la llave y aplicaremos el reactivo 3: ALCOHOL – ACETONA.
Esperaremos 15 segundos y lavaremos con abundante agua,
justo como en el punto 3.
6. Una vez retirado el exceso, aplicaremos el reactivo 4:
SAFRANINA por 1 minuto, una vez pasado el tiempo lavaremos
con abundante agua.
7. Dejaremos secar a temperatura ambiente y leeremos en el
microscopio a x100, con una gota de ACEITE DE INMERSIÓN.
La muestras son útiles para su uso en:

i. Líquidos estériles.
j. Biopsias para cultivo.
k. Abscesos.
l. Hisopados.
m. Crecimiento de colonias aisladas en medios de
cultivo.
Las bacterias GRAM POSITIVAS se observan de color: AZUL OBSCURO

A MORADO.
Las bacterias GRAM NEGATIVAS se observan de color: ROSA A ROJO.
VALIDACIÓN.

70
INSERTO DE LOS REACTIVOS.
BIBLIOGRAFÍA.
López-Jácome LE, Hernández-Durán M, Colín-Castro CA, et al.

Las tinciones básicas en el laboratorio de microbiología.
Investigación en Discapacidad. 2014;3(1):10-18. Disponible en:
https://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf
Casasola Bado, María J. La importancia de realizar una correcta
tinción de Gram en la identificación bacteriana. Rev. Colegio
de Microb. Quím. Clín. De Costa Rica. 2022;27(2):1 - 10.
Disponible en: http://revista.microbiologos.cr/wp-
content/uploads/2022/08/Volumen-27-N%C2%BA2-Arti%CC%81culo-
3-89-98.pdf
71
INMUNOLOGÍA
72
O B J E T I V O
D E L
M A N U A L

procesos y métodos en relación al área de inmunología, con el
objetivo de llevar un control sobre los procedimientos que

departamento de inmunología utilizarán pruebas rápidas de
detección cualitativa y semicuantitativa.

departamento clínico de inmunología.

73
A N T Í G E N O
P R O S T Á T I C O T O T A L
FUNDAMENTO.
El Antígeno Prostático Específico o P. S. A. es producida

por la próstata. Tiene funciones de proteasa, preferentemente
sobre las semenogelinas, proteínas producidas en la vesícula
seminal.
La P. S. A. Total es útil en el seguimiento de los
pacientes que padecen cáncer, ya que puede funcionar como un
marcador de la patología ya mencionada. Esta concentración es
elevada en la sangre, muy frecuentemente elevada en hombres
con cáncer de próstata.
1. Antígeno: Sustancia que, tras aparecer en el organismo,
induce una respuesta inmunitaria.
2. Complejo: Compuesto de diversos elementos.
3. Coloidal: De coloide. Mezclas no homogéneas. Partículas
muy pequeñas con una fase dispersantes.
4. Látex: Suspensión natural de composición compleja.
5. Partícula: Cuerpo material de pequeñas dimensiones que
constituyen la materia.
P. S. A, quien está presente en el suero, reaccionar con

las partículas de látex coloidal que están conjugadas con los
anticuerpos monoclonales, los cuales son específicos contra el
P. S. A. A la unión se le llama complejo, esto provoca que las
partículas coloidales – anticuerpos – P. S. A. migren en un
proceso cromatográfico hacia la zona de reacción, en donde hay
anticuerpos contra el P. S. A. que reaccionarán con otro
complejo de partículas de látex coloidal – anticuerpos – P. S.
A. Originando una línea rosa o rojo vino.
74
ALMACENAMIENTO.

2 – 30 ºC ENVUELTO ES
TIRA REACTIVA O ATEMPERAR USABLE HASTA
“SPINREACT” TEMPERATURA LA FECHA DE
AMBIENTE CADUCIDAD.
EQUIPO.

VELOCIDAD”.
MUESTRA.

gel separador.
PREPARACIÓN.
f. Suero en tubo amarillo o rojo.

g. Placas reactivas “SPINREACT” de Ensayo
Inmunocromatográfico para la detección del Antígeno
Específico Total.
h. Centrifugadora “VE-4000 PLUS CENTRÍFUGA DE BAJA
VELOCIDAD”.
i. Cronómetro (el teléfono celular servirá).
j. Gradilla o soporte para el tubo.
75
2. PROCEDIMIENTOS.
1. Se utilizará tanto un tubo amarillo como un tubo rojo

para la separación del suero. Una vez obtenida la muestra
se centrifugará en cuanto haya coagulación.
2. Se tomará un sobre con una placa “SPINREACT” al momento
que se procese la muestra.
abriremos por completo el sobre contenedor de la placa
“SPINREACT”, colocándola en una superficie plana.
4. Se rotularán los datos del paciente con un sharpie.
5. Con una pipeta, suministrar 4 gotas en la abertura
señalada con una flecha.
6. Se deberá esperar 5 minutos para la revelación de las
líneas.
a. Pasados los 5 minutos, una concentración baja de HCG
puede dar un resultado positivo. NO INTERPRETAR

Complejo de partículas de látex coloidal – anticuerpos –

P. S. A.
El control consiste en la línea azul de la zona de

suficiente y que los reactivos migran correctamente. La no
76
aparición de la línea se considera un control negativo en el

procedimiento y será considerado no válido.



se deberá repetir la prueba con otra placa.
VALOR NORMAL 4 ng/mL

VALOR POSIBLE PATOLÓGICO > 4 ng/nL.
5. LIMITACIONES.
a. Test es cualitativo, no debe hacerse ninguna

interpretación cuantitativa.
b. Añadir correcta cantidad de suero. Si se agrega menos
podría no realizarse la cromatografía por falta de
muestra. Si se agrega más, puede diluirse el reactivo
y terminar provocando una línea tenue o débil.
c. El tiempo debe ser el adecuado.
d. Algunas veces puede dar falsos positivos. En este
caso se debe comprobar el resultado con otro método
diferente, de igual o mejor sensibilidad.
77

e. Pacientes que tengan anticuerpos de ratón. Cualquier
Resultados se complementan con historia y revisión clínica.
Acetaminofeno > 200 mg/L
Ácido Acetilsalicílico > 200 mg/L
Ácido Ascórbico > 200 mg/L
Ampicilina. > 200 mg/L
Atropina > 200 mg/L
Fenilpropanolamina > 200 mg/L
Ácido salicílico > 200 mg/L
Urea > 40 mg/mL
Ácido úrico > 100 ug/mL
Proteína (BSA) > 200 mg/mL
Estriol > 0.02 mg/mL
Pregnadiol > 0.02 mg/mL
Bilirrubina > 0.02 mg/mL
Cafeína > 200 mg/L
Ácido Gentísico > 200 mg/L
Glucosa > 20 mg/mL
78
FORMATO DE LABORATORIO DE UNA PRUEBA DE P. S. A.

Nombre: Edad: Sexo:
Id: D.I._#_0001 <- DEPARTAMENTO de INMUNOLOGÍA_#_0001.
ANTÍGENO PROSTÁTICO ESPECÍFICO TOTAL
Plasma SUERO Orina
Color de tubo: Rojo / Amarillo [GEL].
POSITIVO
NEGATIVO

Observaciones:
Validado por:
_________________________________
79
VALIDACIÓN.

INSERTO DE LA PLACA REACTIVA.
BIBLIOGRAFÍA.
Luis Carlos Sánchez-Martínez, César Armando Paredes-Solís,

Octavio Francisco Hernández-Ordóñez, Itzel Rigel Sánchez-
Ruvalcabaa. El antígeno prostático específico: Su papel en el
diagnóstico del cáncer de próstata. Rev Med Inst Mex Seguro
Soc [Internet]. 2013;51 (2):124–6. Disponible en:
https://www.medigraphic.com/pdfs/imss/im-2013/im132a.pdf
Uribe Arcila, Juan Fernando. Cáncer de Próstata. ¿Qué es el
antígeno prostático específico?. (La biología del PSA).
Revista Urología Colombiana. Sociedad Colombiana de Urología.
Vol. XVI, núm. 3, diciembre, 2007, pp. 37-46. Disponible en:
http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=149120470006
80
T O X I N A
H E L I C O B A C T E R P Y L O R I
FUNDAMENTO.
La Helicobacter pylori es una bacteria que vive en la

superficie del estómago. Su presencia en aumento puede indicar
el padecimiento de enfermedades gastrointestinales, cáncer
estomacal y gastritis crónica.
Los pacientes que tienen esta bacteria, desarrollan
anticuerpos que pueden ser detectados. Muchas veces las
gastritis son asintomáticas, pero no siempre se presenta así.
El patógeno es muy bien conocido porque provoca úlceras
gástricas o duodenales, pero también está ligado a cánceres y
linfomas.
1. Cualitativo: Descriptivo.
2. IgG: Inmunoglobulina G.
3. Inmovilizar: Detener el movimiento completamente.
4. Migrar: Mover de un lugar de origen a otro completamente
nuevo.
5. H. pylori: Bacteria en forma de espiroqueta.
Inmunoprueba cualitativa basada en un dispositivo de

membrana, para la detección de anticuerpos H. pylori en sangre
total, suero, o plasma. El IgG anti – humano se inmoviliza en
la región correspondiente a la línea de prueba. La muestra se
agrega al pozo de la placa reaccionando con el antígeno
recubierto de partículas en la prueba. La mezcla migra
cromatográficamente a lo largo de la placa, interactuando con
el IgG anti – humano inmovilizado.
81
ALMACENAMIENTO.

PLACA 2 – 30 ºC
REACTIVA O ATEMPERAR No más de una
“INNOVACON” TEMPERATURA hora
AMBIENTE
BUFFER 2 – 30 ºC
O ATEMPERAR -
TEMPERATURA
AMBIENTE
EQUIPO.

VELOCIDAD”.
MUESTRA.

gel separador.
PREPARACIÓN.

b. Sangre total en tubo con E. D. T. A. Lila.
c. Placas reactivas “INNOVACON” de prueba de Helicobacter
pylori.
d. Centrifugadora “VE-4000 PLUS CENTRÍFUGA DE BAJA
VELOCIDAD”.
82
e. Cronómetro (el teléfono celular servirá).

f. Gradilla o soporte para el tubo.
2. PROCEDIMIENTOS.
1. PARA SUERO: Se utilizará tanto un tubo amarillo como

un tubo rojo para la separación del suero. Una vez
obtenida la muestra se centrifugará en cuanto haya
coagulación.
2. PARA SANGRE TOTAL O PLASMA: Se utilizará un tubo con
anticoagulante, ya sea E. D. T. A, Citrato de Sodio,
Na o Li heparinizado y Oxalato de Sodio.
3. Se tomará un sobre con una placa “INNOVACON” al momento
que se procese la muestra.
abriremos por completo el sobre contenedor de la placa
“INNOVACON”.
5. Se vaciarán dos gotas del suero, plasma o sangre total
en el pocillo de muestras (S).
6. Se añadirá una gota de solución TAMPÓN al pozo de la
placa (S).
7. Se deberá esperar 10 minutos para la revelación de las
líneas.
8. Pasados los 10 minutos, una concentración baja de HCG
puede dar un resultado positivo. NO INTERPRETAR PASADOS
LOS 15 MINUTOS.

el límite (15 MINUTOS), el resultado será inválido y se deberá
rehacer el estudio.
COMPLEJO DE ANTICUERPOS H. pylori.
83


positivo aún si la línea “(T)” es menos tenue que la
otra”.


4. INTERVALOS DE REFERENCIA
POSITIVO 2 LÍNEAS [C Y T]
NEGATIVO 1 LÍNEA [C]
5. LIMITACIONES.
a. No se debe usar en pacientes que sean asintomáticos.
b. Es solamente una prueba cualitativa, no debe
considerarse como una técnica cuantitativa.
c. Solo indicará presencia de anticuerpos.
84
d. Muestras muy hemolizadas producen resultados no

válidos.
e. Resultado positivo muestra la presencia únicamente de
anticuerpos IgG contra la Helicobacter pylori.
f. Resultado negativo no muestra la presencia de
anticuerpos IgG contra la Helicobacter pylori o
presencia de bajas concentraciones del anticuerpo.
g. Debe existir más información clínica para el
diagnóstico.
6. VALORES.
80 – 100% de individuos con signos y síntomas de otras

enfermedades gastrointestinales han dado positivo a la
infección por H. pylori.
7. SUSTANCIAS INTERFERENTES.

Hemoglobina. > 1,000 mg/dL
Bilirrubina. > 1,000 mg/dL
Albúmina sérica. > 2,000 mg/dL
Triglicéridos (suero / > 600 mg/dL
plasma)
85
FORMATO DE LABORATORIO DE PRUEBA DE Helicobacter pylori.

Nombre: Edad: Sexo:
Id: D.I._#_0001 <- DEPARTAMENTO de INMUNOLOGÍA_#_0001.
Helicobacter pylori
Plasma SUERO Sangre Total
Color de tubo: Rojo / Amarillo [GEL] / Tubo Lila con [E. D. T. A.]
POSITIVO
NEGATIVO

Observaciones:
Validado por:
_________________________________
86
VALIDACIÓN.

BIBLIOGRAFÍA.
Fock KM, Katelaris P, Sugano K, Ang TL, Hunt R, Talley NJ, et

al. Second Asia-Pacific consensus guidelines for Helicobacter
pylori infection. J Gastroenterol Hepatol. 2009
Oct;24(10):1587-600.
De M. Helicobacter pylori [Internet].

Worldgastroenterology.org. [citado el 9 de noviembre de 2022].
Disponible en:
https://www.worldgastroenterology.org/UserFiles/file/guideli
nes/helicobacter-pylori-spanish-2021.pdf
87
88
O B J E T I V O
D E L
M A N U A L

procesos y métodos en relación al área de líquidos y desechos,
con el objetivo de llevar un control sobre los procedimientos
que serán puestos en práctica con diferentes muestras

departamento de líquidos y desechos utilizarán muestras dentro
de frascos estériles correctamente rotulados.

departamento clínico de hematología.

89
U R O A N Á L I S I S
FUNDAMENTO.
El examen general de orina (EGO) es una examen de rutina,

rápido, de bajo costo y fácil acceso en los servicios de salud
para la población. Además, proporciona información importante
para el diagnóstico de diversas enfermedades como infecciones
del tracto urinario, diabetes y enfermedades renales. Este
examen comprende de: el examen físico, el examen químico y el
análisis microscópico del sedimento urinario.
El EGO apoya al diagnóstico y seguimiento terapéutico de
enfermedades renales y otras como la diabetes, enfermedades
hepáticas y otras autoinmunes.
En el EGO se evalúa el aspecto físico-químico y el
microscópico. El examen físico-químico evalúa las propiedades
organolépticas y mediante tiras reactivas examinamos: la
densidad, pH, glucosa, proteínas, bilirrubina, urobilinógeno,
hemoglobina, cuerpos cetónicos y nitritos. El examen
microscópico del sedimento urinario, evalúa la presencia o
ausencia de células, bacterias y cristales. Los parámetros
físico-químicos y microscópicos pueden orientar al diagnóstico
de muchas patologías como la infección urinaria, enfermedad
renal, diabetes.
1. URO: Referente a la orina.
2. EGO: Iniciales del Examen General de Orina.
3. Renal: Referente al riñón.
4. Examen microscópico: Observación de la muestra bajo un
microscopio.
5. Sedimento: Precipitado consecuente de un proceso de
centrifugación.
90
El contraste óptico de los elementos de un sedimento es

muy pequeño en el microscopio óptico, que por otra parte sería
adecuado para la observación de preparaciones fijadas y
coloreadas. Para los sedimentos, la iluminación habitual de
estos microscopios no es la más conveniente. Para alcanzar una
mejor definición y contraste es aconsejable descender el
condensador. La utilización de filtros de color, colocados
debajo del condensador, pueden ayudar al poner de relieve los
detalles de estructuras presentes en el sedimento, sin
necesidad de tinción. El filtro debe ser de un color
complementario con el del elemento que se desea acentuar. Para
estructuras azules se utilizará un filtro amarillo, para
estructuras rojas, un filtro verde; para una preparación con
una tinción corriente, el mejor filtro es el amarillo ácido
pícrico o gris amarillento. Para suprimir los objetos
fuertemente teñidos o para resaltar aún más, detalles
internos, se debe utilizar un filtro del mismo color.
LUZ POLARIZADA.
La inclusión de dos cristales polaroides (polarizador y

analizador) convierten al microscopio corriente de campo claro
en un microscopio polarizante. Este método de iluminación
resulta especialmente válido para la identificación de
sustancias anisotrópicas (de doble refracción), como los
cuerpos grasos ovales en la orina. Asimismo, esta técnica
permitiría realizar un diagnóstico diferencial correcto entre
ciertos cristales (oxalato calcico monohidrato) y los hematies
del sedimento de orina. Los hematies no son visibles con los
polaroides cruzados, mientras que, sobre el fondo oscuro, los
cristales destacan intensamente por su policromía.
TIRA REACTIVA.
En general consisten en pruebas diagnósticas de fácil

estandarización y fácil realización. Las más frecuentemente
utilizadas son las tiras reactivas multistix, que registran
ph, proteínas, glucosa, sangre, pigmentos biliares,
91
leucocitos, y nitritos. El método de las tiras reactivas

consiste en introducir, durante unos segundos, la zona
reactiva de la tira en una muestra de orina recién emitida.
Los resultados se leen a los 60 segundos comparando las
alteraciones de los respectivos segmentos analíticos con una
escala colorimétrica patrón. La fiabilidad de las tiras es
grande. La sensibilidad de estas tiras para la determinación
de sangre oculta puede ser muy grande, pues micro hematurias
muy moderadas en las que se encuentran pocos hematíes, en la
observación microscópica del sedimento, dan claramente una
reacción positiva. En caso de hemoglobinuria, lógicamente las
tiras reactivas dan positivo a sangre, debiendo acudir al
estudio microscópico del sedimento, para realizar el
diagnóstico diferencial con la hematuria.
Las tiras detectoras de leucocitos en orina, se basan en
su reacción con las esterasas que se encuentran en los
leucocitos. Son muy útiles, sobretodo cuando se utilizan con
orinas recién emitidas, ya que los leucocitos de otra forma se
lisan rápidamente. Una reacción positiva al nitrito es aquella
en la que aparece una coloración rosa después de introducir la
tira en la orina.
Esta reacción se basa en el cambio de color que produce
el paso de nitrato urinario a nitrito, producido por los
enzimas de los gérmenes que más frecuentemente se encuentran
en la orina: Escherichia coli, Proteus, Klebsiella, Pseudomona
aeruginosa. Detectan bacteriurias significativas, esto es, más
de 100.000 col por cc de orina. Este rápido test podría tener,
entre otras aplicaciones, evitar la realización de pruebas
diagnósticas invasivas (cistoscopia, cistomanometría, biopsia
prostática...), en pacientes en los que el test fuera positivo
y retrasarlo para fechas cuando el mismo se halla negativizado,
con el tratamiento antibiótico correspondiente.
ALMACENAMIENTO.
REACTIVO TEMPERATURA DE TEMPERATURA VIAVILIDAD

ALMACENAMIENTO DE USO UNA VEZ
ABIERTO
TIRA REACTIVA 2 – 30 ºC 15 – 30 ºC HASTA SU
“SPINREACT” FECHA DE
CADUCIDAD
INDICADA
92
EQUIPO.

VELOCIDAD”.
MUESTRA.
MUESTRA DE ORINA, LA PRIMERA DE LA MAÑANA.
PREPARACIÓN.
1. Frascos plásticos transparente de boca ancha con
capacidad de 30 mL.
2. Bolsa pediátrica recolectora de orina.
3. Papel toalla.
4. Marcador de vidrio.
5. Guantes descartables.
6. Tubos cónicos con capacidad de 15 mL.
7. Gradilla para tubos.
8. Papel toalla.
9. Marcador de vidrio.
10. Guantes descartables.
11. Tiras reactivas para orina.
2. PROCEDIMIENTOS.
EXAMEN FÍSICO DE ORINA.
1. Verificar que el frasco esté bien identificado y

completamente tapado.
2. Agitar en forma circular sobre la mesa de trabajo.
3. Observar color y aspecto.
4. Anotar lo observado
93
EXAMEN QUÍMICO DE ORINA.
1. Identificar el tubo cónico.

2. Agitar la muestra de orina en forma circular sobre la mesa
de trabajo.
3. Verter la orina en el tubo cónico.
4. Introducir la tira reactiva en la orina.
5. Eliminar el exceso de orina colocando la tira sobre un
papel absorbente.
6. Esperar el tiempo recomendado por el fabricante para su
lectura.
7. Anotar los resultados.
SEDIMENTO URINARIO.
1. Centrifugar durante 5 minutos a 2,500 rpm.

2. Descartar el líquido sobrenadante.
3. Suspender el sedimento urinario golpeando ligeramente con
la mano.
4. Colocar una gota de sedimento entre un porta y un
cubreobjeto.
5. Observar la preparación con el objetivo 10x para lograr
una visión general del sedimento.
La tira reactiva nos da un indicio de los analitos

presentes en la orina que pueden estar alterados, es muy
importante corroborar los resultados del reactivo mediante un
examen microscópico del sedimento urinario.
94
Como control se debe considerar que, si se ha de teñir la

muestra en el portaobjetos, el reactivo no tenga sobrenadantes
y esté correctamente homogenizado.
La limpieza de los genitales debe ser adecuada, los
frascos no deben estar sucios y el tiempo de entrega al
laboratorio debe ser óptimo. La toma de medicamentos debe ser
notificada previamente con el fin de tener en cuenta esta
variable que pueda interferir con los resultados.
Las tiras reactivas deben ser estables y no deben estar
caducadas, tampoco se es correcto cortar las tiras reactivas
o leerlas después del tiempo estimado. Los portaobjetos, para
el examen microscópico deben estar limpios. El uso de una
centrifugación inadecuada puede alterar los resultados.
EXAMEN FÍSICO DE ORINA.
La orina debe ser amarilla y no debe presentar turbidez.
EXAMEN QUÍMICO DE ORINA.
pH: 5 – 6, Densidad: 1.005 – 1.010, Leu: 0 por uL, Nit:

Negativos, Prot: 0 mg/dL, Glu: 0 mg/dL, C. Cet: Negativos,
Urobil: < 1 mg/dL, Bil: Negativo y Sangre: 0 er/uL.
EXAMEN MICROSCÓPICO DE ORINA.
Cél. Epit. Esc: Esc – Mod, Cél. Epit. Red: No deben

observarse, Erit: No se observan, Leu: 0 – 5 c/ Camp, Cil: No
se observan, Fil. Muc: No se observan, Crist: Oxalatos, Uratos,
Fosfatos: Esc – Mod, Lev: No se observan, Parás: No se
observan, Bact: No se obs – Esc.
95
FORMATO DE LABORATORIO DE UROANÁLISIS.

Nombre: Edad: Sexo:
Id: D.L.D._#_0001 <- DEPARTAMENTO de LÍQUIDOS Y DESECHOS_#_0001.
EXAMEN GENERAL DE ORINA

ORINA
Color de tubo: Recipiente estéril.
EXAMEN FÍSICO.
PARÁMETRO MUESTRA REFERENCIA
Color
Turbidez
EXAMEN QUÍMICO.
pH
Densidad
Leucocitos
Nitritos
Proteínas
Glucosa
Cuerpos cetónicos
Urobilinógeno
Bilirrubina
Hb
EXAMEN MICROSCÓPICO.
Células Epiteliales Escamosas
Células Epiteliales Redondas
Leucocitos
Glóbulos rojos
Filamentación mucoide
Cilindros
Cristales
Levaduras
Parásitos
Bacterias
Validado por:
____________________
Firma del responsable
96
VALIDACIÓN.

INSERTO DE LAS TIRAS REACTIVAS DE ORINA.
BIBLIOGRAFÍA.
Salinas J. EL ESTUDIO DE LA ORINA. LUIS CIFUENTES DELATTE EN

EL PASO DEL ARTE A LA CIENCIA [Internet]. Isciii.es. [citado
el 10 de noviembre de 2022]. Disponible en:
https://scielo.isciii.es/pdf/urol/v61n10/03.pdf
ARISPE QUISPE, MELANY S, CALLIZAYA LAURA, MARIANELA K. LAURA
YANA, ADRIANA A. MENDOZA MENDOZA, MILENA Z. MIXTO CANO,
JHOSELINE L. VALDEZ BALTAZAR, BRENDA D. MENDOZA OCAMPO, ELIA.
MAGARIÑOS LOREDO, WALTER. TORRICO ARZADY, BERNARDO, editor.
Importancia del examen general de orina, en el diagnóstico
preliminar de patologías de vías urinarias renales y
sistémicas, en mujeres aparentemente sanas [Internet]. Vol. 7.
REVISTA CON-CIENCIA; 10 DE MAYO DE 2019. Disponible en:
http://www.scielo.org.bo/pdf/rcfb/v7n1/v7n1_a09.pdf
Lynch, M. J. Métodos de Laboratorio, Segunda Edición, Año 1988.
Angel G. y Angel M. Interpretación clínica de laboratorios,
quinta edición, Colombia, 1996.
97
P R U E B A D E
E M B A R A Z O E N O R I N A
FUNDAMENTO.
La GONADOTROPINA CORIÓNICA HUMANA o en sus siglas: hCG,

es una hormona glucoproteica que es secretada en el desarrollo
de la placenta post fertilización. En un embarazo, el hCG puede
ser detectado en orina, plasma o suero entre 7 a 10 días
después de la concepción.
Los niveles del hCG aumentan exponencialmente en función
a las semanas de embarazo.
1. H. C. G: Gonadotropina coriónica humana.
2. Fertilización: Unión del óvulo con un espermatozoide
humano.
3. Inmunoensayo: Prueba que usa antígenos y anticuerpos, su
unión. Para identificar o medir ciertas sustancias.
4. Cromatografía: Método analítico que permite separación de
gases o líquidos de una mezcla por adsorción selectiva en
un medio adsorbente.
5. Anticuerpos: Proteína segregada por las células
plasmáticas en respuesta a un antígeno.
Inmunoensayo rápido cromatográfico. Detecta

cualitativamente la presencia de la HCG en orina, suero o
plasma. La tira utiliza dos líneas para indicar los resultados;
la de prueba utiliza anticuerpos (entre ellos el monoclonal
hCG). La línea de control se compone de anticuerpos
policlonales de cabra y partículas coloidales de oro. La
muestra migra por acción capilar por la membrana reaccionando
con las líneas que se tornan de un color vino.
98
ALMACENAMIENTO.

2 – 30 ºC
TIRA REACTIVA O ATEMPERAR -
“MONLAB” TEMPERATURA
AMBIENTE
EQUIPO.

VELOCIDAD”.
MUESTRA.

gel separador.
PREPARACIÓN.

b. Tiras reactivas “MONLAB” de prueba de embarazo en sangre.
c. Centrifugadora “VE-4000 PLUS CENTRÍFUGA DE BAJA
VELOCIDAD”.
d. Cronómetro (el teléfono celular servirá).
e. Gradilla o soporte para el tubo.
99
2. PROCEDIMIENTOS.
1. Una vez tomada la muestra, se deberá abrir el frasco

estéril con el mayor cuidado posible.
2. Se tomará un sobre con una tira “MONLAB” al momento que
se procese la muestra.
3. Destaparemos el frasco estéril y abriremos por completo
el sobre contenedor de la tira “MONLAB”.
4. Identificaremos las flechas que indican la parte de la
tira que entrará en contacto con la orina.
5. Se sumergirá la tira durante 15 seg en la orina, una vez
pasado el tiempo, se dejará sobre el envoltorio de la
tira.
6. Se deberá esperar 5 – 10 minutos para la revelación de
las líneas.
a. Pasados los 10 minutos, una concentración baja de
HCG puede dar un resultado positivo. NO INTERPRETAR

ANTICUERPOS DE hCG.
100




POSITIVO = / > 10 mIU/ml.
NEGATIVO < 10 mIU/ml.
5. LIMITACIONES: La tira puede marcar falsos positivos

cuando:
a. Hay presencia de enfermedad trofoblástica.
b. Neoplasias.
c. Tumores testiculares.
d. Cáncer de próstata.
e. Cáncer de mama.
f. Cáncer de pulmón.
101

a. Niveles de hCG se encuentran por debajo del nivel de
sensibilidad de la prueba (10 mIU/ml).
b. Pacientes que tengan anticuerpos de ratón. Cualquier
c. Resultados se complementan con historia y revisión
clínica.
6. VALORES: Negativo en mujeres sanas no gestantes y varones

sanos. Mujeres saludables embrazadas tienen hCG presentes
en:
a. ORINA.
b. PLASMA.
c. SUERO.
La cantidad de hCG presente variará de acuerdo al tiempo de

gestación.
Acetaminofeno > / = 20 mg/dL
Ácido Acetilsalicílico > / = 20 mg/dL
Ácido Ascórbico > / = 20 mg/dL
Atropina > / = 20 mg/dL
Bilirrubina > / = 2 mg/dL
Triglicéridos (suero / > / = 1,200 mg/dL
plasma)
Cafeína > / = 20 mg/dL
Ácido Gentísico > / = 20 mg/dL
Glucosa > / = 2 g/dL
Hemoglobina > / = 1 mg/dL
Bilirrubina (suero / plasma) > / = 40 mg/dL
102
FORMATO DE LABORATORIO DE UNA PRUEBA DE EMBARAZO EN ORINA.

Nombre: Edad: Sexo:
PRUEBA DE EMBARAZO
Plasma Suero ORINA
Color de tubo: Recipiente estéril.
POSITIVO
NEGATIVO

Observaciones:
Validado por:
_________________________________
103
VALIDACIÓN.

BIBLIOGRAFÍA.
Velázquez Nelson. La hormona gonadotrofina coriónica humana:

Una molécula ubícua y versátil. Parte I. Rev Obstet Ginecol
Venez [Internet]. 2014 Jun [citado 2022 Nov 01] ; 74( 2
): 122-133. Disponible en:
http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0048
-77322014000200006&lng=es.
Barrera D, Chirinos M, García-Becerra R, Zubirán S, Rincón D.
Mecanismos de regulación de la síntesis y secreción de la
gonadotropina coriónica humana (hCG) durante el embarazo
[Internet]. Medigraphic.com. [citado el 1 de noviembre de
https://www.medigraphic.com/pdfs/revinvcli/nn-
2008/nn082g.pdf
104

Manual de Procesos Normalizados - PORFIRIO CENTENO

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MANUAL DE PROCESOS ANALÍTICOS - NORMALIZADOS. MDC – P.A.N. V. 1.

Realizado por: Q. Porfirio Centeno. Validado por: Dpto. De Calidad

AUTOR: Q. PORFIRIO CENTENO ARENA

II. MANUAL DE QUÍMICA ANALÍTICA – 31.

III. MANUAL DE MICROBIOLOGÍA – 52.

IV. MANUAL DE INMUNOLOGÍA – 72.

V. MANUAL DE LÍQUIDOS Y DESECHOS – 88.

Se tiene como propósito la recopilación de procedimientos,

Todos los procedimientos descritos en el apartado del

El químico de base será quien procese la muestra en su

Todas las muestras que llegan al departamento deberán tratarse

Este estudio es de gran utilidad para el diagnóstico del

PRINCIPIO DE LA PRUEBA ANALÍTICA.

1. MÉTODO DE DETECCIÓN DE CORRIENTE DIRECTA CON ENFOQUE

El detector se encarga del conteo de los eritrocitos y de

2. HEMOGLOBINA FOTOMÉTRICA LIBRE DE CIANURO PARA LA

Se utiliza el lauril sulfato de sodio para medir la

3. CITOMETRÍA DE FLUJO FLUORESCENTE

Técnica usada para analizar las células que pasan a través

fluorescente. Posteriormente, la muestra pasa por una celda de

REACTIVO TEMPERATURA TEMPERATURA PERIÓDO DE

ANALIZADOR HEMATOLÓGICO “SYSMEX” XN – L 350.

Tubo con E. D. T. A. color: LILA.

1. MATERIALES, REACTIVOS Y OTROS PRODUCTOS.

Se enciende por orden: IMPRESORA, COMPUTADOR, UNIDAD

identificado el número y los datos del paciente, se pulsará el

1. Se realiza la extensión de la muestra utilizando un

1. Una vez seco, el extendido se lleva al microscopio.

Los resultados se imprimen de forma automática, en base a

Los resultados del equipo se comparan con los del conteo

Constan de 2 y 3 niveles. Preparación estabilizada.

CONTROL DE CALIDAD ANALÍTICA.

MÉTODO DE CALIDAD PARA VIGILAR LA VARIACIÓN DIARIA MEDIANTE

1. X – BAR: Se introduce una muestra que se analiza dos

MÉTODO DE CALIDAD PARA VIGILAR LA VARIACIÓN DIARIA MEDIANTE

1. X – BARM: Calcula una media ponderada de 20 muestras de

Para el control de calidad se utilizan 3 tipos de control

TIPO DE CONTROL VENTAJAS DESVENTAJAS

RESULTADOS, VALORES E INTERVALOS DE REFERENCIA.

2. VALORES NORMALES e INTERVALOS DE REFERENCIA.

FORMATO DE LABORATORIO DE UNA CITOMETRÍA HEMÁTICA.

La validación de los resultados es responsabilidad del

MANUAL DE USO DEL EQUIPO SYSMEX XNL – 350 Y DEMÁS LÍNEA.

1. López-Santiago N. La biometría hemática. Acta Pediatr

Los reticulocitos son células de la línea hematopoyética

PRINCIPIO DE LA PRUEBA ANALÍTICA.

Consiste en la tinción de los reticulocitos con azul de

Los ácidos nucleicos de los reticulocitos y de los

REACTIVO TEMPERATURA TEMPERATURA PERIÓDO DE

AUTOMATIZADO: ANALIZADOR HEMATOLÓGICO “SYSMEX” XN – L

Tubo con E. D. T. A. color: LILA.

1. MATERIALES, REACTIVOS Y OTROS PRODUCTOS.

Se enciende por orden: IMPRESORA, COMPUTADOR, UNIDAD

Al aparecer el computador dentro del software, se debe

I. Mezclar 80 mL de solución salina con 20 mL de citrato

1. En un tubo de ensaye de cristal se colocan 150 microlitros

9. Una vez seco, el extendido se lleva al microscopio.

11. Se colocará el extendido sobre la platina.

Los resultados se imprimen de forma automática, en base a

Los resultados del equipo se comparan con los del conteo

CONTROL DE CALIDAD ANALÍTICA.

MÉTODO DE CALIDAD PARA VIGILAR LA VARIACIÓN DIARIA MEDIANTE

3. X – BAR: Se introduce una muestra que se analiza dos

MÉTODO DE CALIDAD PARA VIGILAR LA VARIACIÓN DIARIA MEDIANTE