Banco de Sangre

Universidad del Noreste
2021
Área de Ciencias Químico Biológicas
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO
LICENCIATURA EN:
Químico Farmacéutico Biólogo.
ASIGNATURA: Banco de Sangre.
ELABORÓ: M.E. Rodolfo Guadalupe Vilchis Aguirre.

QFB. Efrén Roberto Hernández Flores.
2021
INTRODUCCIÓN
La información contenida en el presente Manual de

Prácticas de laboratorio, pretende ser un medio didáctico
que facilite a los docentes y alumnos a planificar, organizar
y desarrollar de manera eficaz sus actividades teórico
prácticas, al vincular los saberes de la asignatura que se
manifiestan en el aula, con las actividades del saber hacer,
que se desarrollan en el laboratorio.
Ante los acelerados cambios tecnológicos y

socioeconómicos que estamos viviendo y siendo la
Universidad un lugar privilegiado para la producción del
conocimiento, es de suma importancia ampliar la relación
de la teoría con la práctica durante todo proceso educativo,
para el cumplimiento de la competencia a lograr,
manifestada en el perfil de egreso de los alumnos.
El Manual de prácticas de laboratorio fue elaborado por

docentes expertos del área de Ciencias Químicas de la
Universidad del Noreste, que garantizan el desarrollo fiel del
plan de estudios y del programa de su asignatura por
competencias, fruto de su experiencia docente y que han
sabido adaptar sus prácticas de laboratorio a la realidad del
contexto, por lo que se puede considerar como el resultado
de un proceso de innovación y desarrollo del curriculum (1).
(1) Area Moreira Manuel. Universidad de La Laguna. España

https://tecnologiaedu.us.es/cuestionario/bibliovir/tema4.pdf.
2021
REGLAMENTO DE LABORATORIO ACQB
REGLAMENTO DE LABORATORIO ACQB
1.-Uso restringido de los laboratorios sólo para práctica o

investigación.
2.-En el desarrollo de actividades de laboratorio, usar sin

excepción:
 Bata de laboratorio (algodón y manga larga)
 Zapato cerrado, sin tacón y suela corrida
 Lentes de seguridad, según convenga
3.-Actividades prohibidas:
 Jugar
 Introducir y consumir alimentos
 Fumar
 Mala disposición de residuos
4.-Al término de la sesión de laboratorio:

 No dejar encendidos equipos de laboratorio
 Checar válvulas de gas
 Limpieza del área de trabajo
5.-Sobre la seguridad en el laboratorio:

 Del extintor, solo en caso necesario
 De regaderas y lavaojos solo en caso necesario
 Adecuado y supervisado de reactivos químicos,
material de cristalería y equipo de laboratorio
2021
ASIGNATURA: BANCO DE SANGRE
MANUAL DE PRÁCTICAS DE: BANCO DE SANGRE
INDICE
Semana 2
PRACTICA N° 1
Prueba de tipificación de isoantígenos humanos
Semana 3
PRACTICA N° 2
Determinación de Rh y Du
Semana 4
PRACTICA N° 3
Prueba de Coombs
Semana 5
PRACTICA N° 4
Pruebas de detección de anticuerpos irregulares
Semana 6
PRACTICA N° 5
Prueba de compatibilidad
Semana 7
PRACTICA N°6
Prueba de reacciones febriles
Semana 8
PRACTICA N°7
Determinación del antígeno de superficie de hepatitis B
Semana 9
PRACTICA N°8
Determinación cualitativa de anticuerpos anti HCV
Semana
PRACTICA N°9 10
Determinación cualitativa de anticuerpos anti HIV
Semana
PRACTICA N°10 11
Determinación cualitativa de anticuerpos antitreponema
Semana
PRACTICA N°11 12
Determinación cualitativa de anticuerpos antichagas
2021
ASIGNATURA: ___Banco de Sangre__________
NOMBRE DE LA PRÁCTICA DE: PRUEBA DE TIPIFICACIÓN DE ISOANTÍGENOS

HUMANOS
No. DE PRÁCTICA: ____1_____ No. DE SESIONES: ___1___
No. DE INTEGRANTES MÁXIMO POR EQUIPO: ______2______
COMPETENCIA A LOGRAR:
Evalúa la seguridad y confiabilidad de un hemoderivado mediante el análisis y

caracterización de los principales componentes sanguíneos de acuerdo a la
Normatividad y Marco Legal vigente, para prevenir los riesgos asociados a la
transfusión sanguínea.
MATERIAL
CANTIDAD DESCRIPCIÓN ESPECIFICACIONES OBSERVACIONES
10 Tubos de Ensaye 13*100
3 Pipetas Pasteur
1 Bulbo para Pipeta
1 Gradilla
1 Placa de
Porcelana
REACTIVOS
1 Frasco de 0.9%
Solución Salina
1 Anti-A
1 Anti-B
1 Anti-AB
1 Anti-D
1 Anti-A1 Lectina
1 Células A1
1 Células A2
1 Células B
Células O
EQUIPO
1 Centrifuga
2021
.
METODOLOGÍA:
METODO EN PLACA
1.-Para ello de la muestra directa se tomarán 1 o 2 gotas de eritrocitos con la pipeta

Pasteur y se colocarán en 4 pocillos de la placa de porcelana.
2.-Posteriormente se añadirán 2 gotas de los antisueros a probar: anti- A; anti-B;

anti-AB, y anti-D.
3.-Se mezclan con aplicadores, se observa y se anota la aglutinación .
4.- Realizar la lectura de los resultados en un periodo de tiempo de 10 minutos. No

realizar la lectura de los resultados después de que hayan transcurrido los 10 minutos
ya que pueden dar falsos resultados.
METODO EN TUBO
1.-Se procede a centrifugar la muestra(s) tomada, a 1200 rpm por 5 min.; se separa
el suero en un tubo de ensaye.
2.- Del coagulo, se obtiene mediante succión con pipeta Pasteur procurando entrar
por el costado del tubo, una porción considerable de eritrocitos y se vacía en otro
tubo de ensaye de 13*100 para poder realizar una suspensión eritrocitaria al 5%.Es
imprescindible formar una solución al 5% (tomatosa) con la finalidad de no favorecer
la aparición del fenómeno de prozona.
3.- De dicha suspensión se toman dos gotas y se añade n a cuatro tubos de ensaye de
13*100 a los que se les añadirán dos gotas respectivamente de antisueros: anti-A,
anti-B, anti-AB, anti-D y si es requerido para identificar el subgrupo de A, anti - A1
lectina.
2021
4.- En otros cuatro tubos de 13*100 se les añaden dos gotas de células conocidas;
A1, A2, B, O, posteriormente se le adiciona dos gotas de suero problema en cada
tubo, procurando tomar dichas muestras con pipetas Pasteur del mismo calibre,
evitando con esto el fenómeno de prozona.
5.- Se procede a centrífugar las muestras a 3400 rpm/15 segundos o en su defecto a

1000 rpm/1min.
6.- Se observa la aglutinación, se interpretan los resultados y se reporta por cruces

(desde una + hasta 4+).
7.- Realizar su reporte y entregarlo.
CUESTIONARIO.
1.- Mencione Usted los beneficios, ventajas de la realización de la prueba de

tipificación de grupos sanguíneos en tubo.
2.- ¿Qué pasa cuando la concentración antigénica no es la correcta?
3.- Mencione Usted la utilidad de la SSF al 0.085% o 0.9%
4.- Mencione Usted la Utilidad de la fuerza centrífuga en estas pruebas

2021
BIBLIOGRAFÍA:
1.- Stites, Daniel p., Abba terr. INMUNOLOGÍA BASICA Y CLÍNICA. 9ª Edición,
Editorial El Manual Moderno. México, 1998. P 289 -300.
2.- Linares, Jesús. INMUNOHEMATOLOGÍA Y TRANSFUSIÓN. 3ª edición, Editorial

Criotrip Impresiones. Caracas, Venezuela. 1987. P. 35 -60.
2021
NOMBRE DE LA PRÁCTICA DE: Determinación de Rh y Du


MATERIAL
3 Pipetas Pasteur
1 Bulbo para Pipeta
1 Gradilla
1 Placa de
Porcelana
REACTIVOS
1 Frasco de 0.9%
Solución Salina
1 Anti-A
1 Anti-B
1 Anti-AB
1 Anti-D
1 Anti-A1 Lectina
1 Células A1
1 Células A2
1 Células B
Células O
EQUIPO
1 Centrifuga
2021
.
METODOLOGÍA:
Después de haber determinado en el punto anterior el grupo sanguíneo del paciente,

la determinación del Rh se procedió a realizarse con el Anti -D. , siendo éste ya sea
positivo de acuerdo al grado de aglutinación o bien negativo por ausencia de dicha
reacción. En el caso de haber dado negativo se procede a comprobar la au sencia de
la variable débil del Rho. Aquí aplicamos la prueba de COOMBS INDIRECTO .
Se incuba el tubo conteniendo el Anti-D a 37°c por un término de 15 min. Cuando

menos, se puede añadir un segundo tubo control, añadiendo dos gotas de la muestra
problema previamente preparada al 5% con dos gotas de albúmina al 22%, ambas se
incuban. Después de la incubación se procede a centrifugar las dos muestras y se
observa el grado de aglutinación. Se procede a realizar tres lavados cuando mínimo a
ambas muestras con solución salina al 0.9%, después de cada lavado se procede a
decantar quedándonos solo con el botón de rojos. Después del último lavado se
añaden dos gotas del suero de coombs y se centrifuga a 2400rpm/15seg o bien a
1000rpm. /1min. Los lavados se centrifugan a 2400rpm/2min o 1000rpm/3min.
Después de haber centrifugado se observa el grado de aglutinación reportándose por

cruces. Si aun así el resultado continúa negativo se procede a añadir dos gotas del
control de coombs previamente preparado, centrifugándose también a 2400rpm/15
seg. o bien a 1000rpm/1min/. Se observan resultados y se reportan.
PREPARACIÓN DE CÉLULAS DE CONTROL DE COOMBS O SENSIBILIZADAS .
En el caso de que el resultado sea negativo, al añadir el contro l de coombs,

aparecerá una aglutinación la que puede ser medida en cruces. Solo si es negativo el
resultado se le agregará dicho reactivo.
El control de coombs se prepara de la siguiente manera:
1. A un tubo de ensayo se le agregan 6 ml. de solución salina al 0.9% y se le

añadirán dos gotas del reactivo ANTI-D, se mezclaran por inversión veinte veces.
2. Se extraen 3 ml. De la suspensión anterior y se le agregan 3 ml. De solución

salina al 0.9%.
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3. Se mezcla por imnversión nuevamente el tubo por 20 veces.
4. Se agregara un paquete de eritrocitos del grupo O Rh positivo, de manera de

que las concentración final sea al 5%.
5. Se procede a incubar el tubo a 37°C por 30 minutos.
6. Después de la incubación se procede a realizar tres lavados a la suspensión

formada.
7. Después del último lavado se reconstituye la suspensión al 5 %. Quedando lista

la solución para valorar y consumir el reactivo de SUERO DE COOMBS
CUESTIONARIO.
1.- ¿Cuántos antígenos constituyen el sistema Rho?
2.- ¿Cuál fue el antígeno que identificó? ¿Por qué razón no se tiene que identificar los
demás?
3.- ¿En qué cromosoma se encuentra el gen del Rho, y dónde el del sistema ABO?
4.- ¿A qué se refiere la sigla Du, qué significa?
5.- ¿Cómo detectamos la variante Du?
6.- ¿Qué tipo de anticuerpo es el Anti-D?
7.- ¿Qué consecuencias trae consigo el Anti-D en personas sensibilizadas?

2021
BIBLIOGRAFÍA:
1.- LINARES, JESÚS, INMUNOHEMATOLOGÍA Y TRANSFUSIÓN PRINCIPIOS Y

PROCEDIMIENTOS. 1º EDICIÓN. EDITORIAL CROMOTIP. CARACAS, VENEZUELA.
1986. PP.91-98.
2.- STITES, DANIEL, P., TERR, ABBA, I., PARSLOW, TRISTRAM, G., INMUNOLOGÍA
BÁSICA Y CLÍNICA. 10a EDICIÓN. EDITORIAL EL MANUAL MODERNO. MÉXICO
2002. PP. 321-322.

2021
NOMBRE DE LA PRÁCTICA DE: PRUEBA DE COOMBS


MATERIAL
3 Pipetas Pasteur
1 Bulbo para Pipeta
1 Gradilla
1 Termómetro
REACTIVOS
1 Frasco de 0.9%
solución salina
1 Albúmina humana
1 Antiglobulina 22%
humanao Suero
de Coombs
1 Control de
1 Coombs
EQUIPO
1 Centrifuga
1 Baño serológico
.
2021
METODOLOGÍA:
COOMBS DIRECTO
1.- En un tubo de ensaye colocar dos gotas de eritrocitos al 5%.
2.- Lavar cuatro veces con S.S. al 0.9%.
3.- Después del último lavado decantar completamente la solución salina escurriendo
todo con una gasa o papel absorbente
4.- Añadir dos gotas del suero de coombs y mezclar, centrifugar a 3400 r.p.m. durante
15 segs. O en su defecto a 1000 r.p.m. durante un minuto.
5.- Observar la aparición de aglutinación la que tendrá que ser valorada por cruces.
Nota: SI LA PRUEBA ES NEGATIVA DEJAR INCUBAR A TEMPERATURA

AMBIENTE POR 5-10 MINUTOS. VOLVER A CENTRIFUGAR Y LEER.
6.- Volver a centrifugar a 3400 rpm. O en su defecto a 1000 rpm. Durante un minuto.
Observar el grado de aglutinación y reportar.
7.- Si el resultado es negativo añadir dos gotas de células de control de coombs.

Centrifugar y observar igual que el punto 6.
2021
METODOLOGÍA:
COOMBS INDIRECTO
1.- En un tubo de ensaye añadir dos gotas de suero en estudio.
2.- Agregar una o dos gotas de eritrocitos O Rho positivos previamente lavados y
suspendidos al 5%.
3.- Agregar dos gotas de albúmina bovina al 22%.
4.- Mezclar, centrifugar a 3400 r.p.m./ 15 segs. O en su defecto a 1000 r.p.m./ 1 min.
5.- Leer la aglutinación e incubar los albuminosos a 37° C durant e 15 a 30 minutos.
6.- Centrifugar a 3400 r.p.m./ 15 segs. O a 1000 r.p.m. durante un minuto. Observar.
7.- Lavar cuatro veces los tubos albuminosos con S.S. al 0.9%, centrifugando a 3400
r.p.m. durante 2 minutos o en su defecto a 1000 r.p.m. durante cuatr o minutos.
8.- Después del último lavado absorber toda la salina y agregar dos gotas del suero
de coombs, mezclar y centrifugar a 3400 r.p.m. durante 15 segs o en su defecto a
1000 r.p.m. durante un minuto.
9.- Observar los resultados. En el caso de que re sultara negativo agregar 2 gotas del
control de coombs (células sensibilizadas) a los que contienen la antiglobulina
humana. Centrifugar a 3400 r.p.m. / 15 segs. O a 1000 r.p.m.. durante un minuto.
10.- Observar el grado de aglutinación y reportar.

2021
CUESTIONARIO.
1.- ¿Qué origina la enfermedad hemolítica del recién nacido?
2.- ¿Qué detecta la prueba de Coombs directa?
3.- ¿Qué detecta la prueba de Coombs indirecta?
4.- Mencione por lo menos cuatro factores que podrían afectar las pruebas de
Coombs en sus resultados y de su explicación.
5.- ¿Qué tipo de antiinmunoglobulina utilizó en su determinación?
6.- ¿Cómo cree que se obtiene el suero de coombs en cantidades industriales?
7.- ¿Dónde ocurre la unión de la A.G.H. al anticuerpo en estudio ?
8.- ¿De cuántos anticuerpos requiere la prueba para que esta sea considerada
positiva en el eritrocito?
BIBLIOGRAFÍA:
2021
( De acuerdo a APA )

3.- IMSS SIGLO XXI. TOPICOS SELECTOS DE MEDICINA TRANSFUSIONAL. Editorial

gráfico. 1º Edición. México. 2003.
4- LINARES, JESÚS, G. INMUNOHEMATOLOGÍA Y TRANSFUSIÓN. 1° EDICIÓN.

CROMOTRIP C.A., VENEZUELA. 80-96.

2021
NOMBRE DE LA PRÁCTICA DE PRUEBAS DE DETECCIÓN DE ANTICUERPOS

IRREGULARES
No. DE PRÁCTICA: ___4______ No. DE SESIONES: ___1___

MATERIAL
3 Pipetas Pasteur
1 Bulbo para Pipeta
1 Gradilla
1 Termómetro
REACTIVOS
1 Frasco de 0.9%
solución salina
1 Células O
1 Albúmina humana 22%
1 Antiglobulina
humana
1 Control de
1 Coombs
EQUIPO
1 Centrifuga
1 Baño serológico
.
2021
METODOLOGÍA:
1.- Marque un tubo de prueba para cada vial de Identisera Diana y en el caso de que
se realice, un tubo adicional para autocontrol autólogo.
2.- Coloque 2-3 gotas del suero o plasma a probar dentro de cada tubo.
3.- Invierta suavemente cada vial de Identisera Diana varias veces para permitir una
completa suspensión de las células rojas.
4.- Adicione 1 gotas de células rojas Identisera Diana a los tubos apropiadamente
marcados. Si un control autológo se esta corriendo en paralelo, adicione 1 gota de
una suspensión salina del 2-4% de células rojas autólogas al tubo apropiado. Mezcle
completamente el contenido de cada tubo.
5.- Centrifugue cada tubo. Examine el sobrenadante para la hemólisis. Suspenda

suavemente cada botón de células rojas y examine la aglutina ción. Registre sus
resultados.
6.- Agregue el potenciador, si se utiliza, a cada tubo en la cantidad especificada por

el inserto del fabricante del producto. NOTA: Si se desea, todos los tubos se pueden
incubar a temperatura ambiente (18-30°C) por 5-30 min., centrifugue y examine la
aglutinación antes de la adición del potenciador o incubación a 36 -38°C
7.- Mezcle el contenido de cada tubo completamente. Incube a 36 -38°C por 30-60
min. NOTA: Dependiendo del potenciador empleado, los tubos se pueden incuba r por
periodos cortos de tiempo. Consulte las instrucciones del fabricante para un tiempo
de incubación óptimo.

suavemente cada botón de células roja y examine aglutinación. Re gistre sus
resultados.
9.- Lave las células rojas un mínimo de 3 veces con salina, tenga cuidado para
decantar completamente después de cada lavado.
10.- Agregue la Anti-globulina – Humana a cada tubo en la cantidad especificada por

el fabricante.

suavemente cada botón de células rojas y examine aglutinación. Registre sus
2021
resultados. Las reacciones negativas se pueden examinar con una ayuda óptica.
12.- Confirme la validez de todas las reacciones negativas o débilmente positivas con
células rojas control antiglobulina sensibilizadas con IgG.
Tiempo sugerido de Centrifugación: 15-30 seg. a 900-1000x g o el tiempo apropiado

para la centrifugación utilizada , que produzca una reac ción lo suficientemente fuerte
del anticuerpo con las células rojas antígeno positivas y que al mismo tiempo permita
una fácil suspensión de las células antígeno negativas.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
PRUEBA POSITIVA: Aglutinación de cualquiera de las células rojas Identisera Diana

en cualquier fase, o hemólisis en las fases de potenciación o de salina, constituyen un
resultado positivo.
PRUEBA NEGATIVA: Ausencia de aglutinación y hemólisis a lo largo del

procedimiento de prueba indica que el suerote prueba no contiene anticuerpos
detectables para cualquiera de los antígenos presentes en el reactivo.
BIBLIOGRAFÍA:
2021


2021
NOMBRE DE LA PRÁCTICA DE PRUEBA DE COMPATIBILIDAD


MATERIAL
3 Pipetas Pasteur
1 Bulbo para Pipeta
1 Gradilla
1 Termómetro
REACTIVOS
1 Frasco de 0.9%
solución salina
1 Albúmina humana
1 Antiglobulina 22%
humanao Suero
de Coombs
1 Control de
1 Coombs
EQUIPO
1 Centrifuga
1 Baño serológico
.
2021
METODOLOGÍA:
PRUEBA CRUZADA MAYOR
*MEDIO ALBUMINOSO:
1.- En un tubo de ensaye agregar 2 gotas del suero del receptor, 2 gotas de glóbulos
rojos del donador al 5% y 2 gotas de albúmina bovina al 22%.
2.- Centrifugar a 3400 RPM/15 seg o en su defecto a 1000 RPM/1 minuto.
3.- Observar aglutinación o su ausencia mediante movimientos finos a contra luz y anotar
resultados.
4.- Incubar a 37ºc durante 15 minutos.
resultados.
7.- Lavar de 3 a 4 veces con SSF. al 0.9% llenar hasta 1 cm. por debajo de la boca del tubo.
después de cada decantado remover el botón con SSF al 0.9% y llenar con SSF. esto para
obtener un adecuado lavado, los lavados se efectúan a 3400 RPM/2 min o a 1000 RPM/4 min.
8.- Añadir 2 gotas de suero de Coombs o antiglobulina humana.
9.- Centrifugar a 3400 RPM/15 segundos o en su defecto a 1000 RPM/1 minuto.
resultados
11.- Añadir 2 gotas de células sensibilizadas control de Coombs.

2021
METODOLOGÍA:
PRUEBA CRUZADA MENOR
*MEDIO ALBUMINOSO:
1.- En un tubo de ensaye agregar 2 gotas del eritrocito al 5% del receptor, 2 gotas de
suero del donador y 2 gotas de albúmina bovina al 22%.
resultados.
resultados.
resultados
11.- Añadir 2 gotas de celulas sensibilizadas control de Coombs.
METODOLOGÍA:
PRUEBA CRUZADA MAYOR
2021
*MEDIO SALINO:
1.- En un tubo de ensaye agregar 2 gotas del suero del receptor, 2 gotas de glóbulos
rojos del donador al 5%.
resultados.
4.- Incubar a temperatura ambiente de laboratorio durante 15 min.
resultados.
PRUEBA CRUZADA MENOR
*MEDIO SALINO:
1.- En un tubo de ensaye agregar 2 gotas de eritrocitos al 5% del receptor, 2 gotas de

suero del donador.
resultados.
resultados.
PRUEBA AUTOCONTROL
*MEDIO ALBUMINOSO:
suero del receptor y 2 gotas de albúmina bovina al 22%.
2021
resultados.
resultados.
resultados
11.- Añadir 2 gotas de celulas sensibilizadas control de Coombs.
PRUEBA AUTOCONTROL
*MEDIO SALINO:
suero del receptor

2021
resultados.
resultados.
CUE S TI O N AR I O .
1 . - ¿T ip o s d e a n t i cu e rp o s d e t e ct a d o s p o r e st a s p ru e b a s?
2 . - ¿Q u é p ro t e ín a ( s) d e l co m p le m e n t o e s d e t e ct a d o (s ) p o r e s t a p ru e b a ?
3 . - ¿a qu é se le l l a m a n a n t icu e rp o s ir re gu la re s?
4 . - ¿a qu é se le l l a m a n a n t icu e rp o s in m u n e s?
5 . - ¿Q u é si gn if ica a lo in m u n i za c ió n o iso in m u n i za c ió n ?
6 . - ¿Q u é t ip o d e le s io n e s o re a cc i o n e s se p u e d e n p ro vo ca r p o r la f a l t a d e
re sp o n sa b i l id a d d e l qu ím ico a l n o re a li za r e st a p ru e b a ?
7 . - ¿P a ra qu é si r ve la a d ic ió n d e a lb ú m in a b o vin a a l 2 2 %?
8 . - ¿Cu á l e s la f u n ció n d e lo s la va d o s co n S S F?
BIBLIOGRAFÍA:

2021
NOMBRE DE LA PRÁCTICA DE PRUEBA DE REACCIONES FEBRILES
No. DE INTEGRANTES MÁXIMO POR EQUIPO:______2______
3.- IMSS SIGLO XXI. TOPICOS SELECTOS DE MEDICINA TRANSFUSIONAL . Editorial

2021

MATERIAL
1 Micropipeta de
100 µL
1 Micropipeta de
10µL
1 Micropipeta de
25µL
2 Pipetas Pasteur
1 Placa serológica de
vidrio, excavada o
circundada
REACTIVOS
1 ANTÍGENOS
FEBRILES Bioclin
o Bigaux o Bio
Rad
EQUIPO
1 Microscopio
METODOLOGÍA:
1.- Se coloca en una placa serológica de vidrio excavada o delimitada, 40 microlitros

de suero (0.04 ML de suero) problema dentro de los círculos para determinación. La
misma cantidad es para seis pocillos del mismo.
2.- Añadir una gota con gotero calibrado, los respectivos antígenos dentro de los seis
círculos a examinar, conteniendo previamente la cantidad de suero depositada. Los
2021
antígenos a probar son: TÍFICO O, TÍFICO H, PARATÍFICO A, PARATÍFICO B,
PROTEUS OX 19, BRUCELLA ABORTUS.
3.- Mezclar con un aplicador sin salir del área circunscrita de la placa de aglutinación,
hasta obtener una solución homogénea.
4.- Mezclar por rotación durante 4 minutos.
5.- Observar al microscopio en el objetivo de 10X.
6.- En el caso de que se presentara alguna positivida d en cualquiera de los antígenos

a probar, se deberán hacer diluciones del suero problema de la siguiente manera:
20 microlitros (0.02 ml) 10 microlitros (0.01 ml) 5 microlitros (0.005 ml) más el
antígeno a probar (una gota con gotero calibrado).para separar el número requerido
para las pruebas (Nro. de pruebas más 2 controles).
CUESTIONARIO.
1.- ¿Cuál fue la dilución de sus problemas? Y de acuerdo con ese resultado que
podemos concluir acerca de los anticuerpos que usted determinó.
2.- ¿De dónde provienen los antígenos TIFICO O, Y TIFICO H?
3.- ¿De dónde provienen los Antígenos PARATIFICO A Y B?
4.- ¿La determinación del Ag Proteus OX 19, QUE IMPORTANCIA TIENE para el
diagnóstico febril?
BIBLIOGRAFÍA:

2021
NOMBRE DE LA PRÁCTICA DE Determinación del antígeno de superficie de

hepatitis B

2021

MATERIAL
1 Micropipeta de
100 µL
REACTIVOS
1 Dispositivo de
Prueba
EQUIPO
METODOLOGÍA:
Cuidados:
• SOLAMENTE PARA USO DIAGNÓSTICO IN VITRO.
• No comer ni fumar mientras se manipulan las muestras.
• Utilizar guantes mientras se manipulan las muestras. Lavarse las manos después de
manipular las muestras.
• Evitar la formación de aerosoles o salpicaduras con las muestras.

2021
• Limpiar los derrames de muestras utilizando un desinfectante apropiado.
• Descontaminar todas las muestras, sistemas de prueba y los materiales

potencialmente contaminados, así como desecharlos en un contenedor para residuos
peligrosos biológico-infecciosos.
• No utilizar los sistemas de prueba si el sobre metálico se encuentra dañado o si el

sello está roto.
Procedimiento
1.- Antes de realizar la prueba se deben ambientar los sistemas de prueba
(llevarlos a temperatura ambiente de 15 a 30ºC, hasta que equilibren esta
temperatura) si es que se almacenaron en refrigeración.
2.- Sacar los sistemas de prueba que se vayan a utilizar de los sobres metálicos
que los contengan y colocarlos sobre una superficie seca y plana.
3.- Con una micropipeta adicionar 100 µL de suero o plasma en la ventana de

muestra del sistema de prueba. Letra (S).
4.- Conforme al sistema de prueba comienza a funcionar se observa que un color

púrpura se mueve a través de la ventana de resultados del sistema de prueba.
METODOLOGÍA:
5.- Realizar la lectura de los resultados en un periodo de tiempo de 5 a 20 minutos.

No realizar la lectura de los resultados después de que hayan transcurrido los 20
minutos ya que pueden dar falsos resultados.
INTERPRETACION DE RESULTADOS
RESULTADO NEGATIVO
2021
La presencia de una sola banda coloreada en la región control (Letra C) indica un
resultado negativo.
RESULTADO POSITIVO
La presencia de dos bandas coloreadas una en la región de control (Letra C) y otra en

la región de prueba (Letra T), sin importar cuál aparezca primero, indica un resultado
positivo.
RESULTADO INVALIDO
Si no aparece una banda colorida en la región de control (Letra C), o resultado de la
prueba debe ser invalidado aunque aparezca una línea en la región de prueba (Letra
C). La ausencia de ésta banda es indicativo de que se produjo un error en el
procedimiento al momento de realizar la prueba o de que los reactivos de la pr ueba
sufrieron deterioro.
EN ÉSTE CASO SE DEBE REPETIR LA PRUEBA.
BIBLIOGRAFÍA:


2021
NOMBRE DE LA PRÁCTICA DE Determinación cualitativa de anticuerpos anti HCV

2021
MATERIAL
1 Micropipeta de
100 µL
REACTIVOS
1 Dispositivo de
Prueba
EQUIPO
METODOLOGÍA:
Cuidados:
• SOLAMENTE PARA USO DIAGNÓSTICO IN VITRO.
• No comer ni fumar mientras se manipulan las muestras.
• Utilizar guantes mientras se manipulan las muestras. Lavarse las manos después de
manipular las muestras.
• Evitar la formación de aerosoles o salpicaduras con las muestras.
• Limpiar los derrames de muestras utilizando un desinfectante apropiado.

2021
• Descontaminar todas las muestras, sistemas de prueba y los materiales
potencialmente contaminados, así como desecharlos en un contenedor para residuos
peligrosos biológico-infecciosos.
• No utilizar los sistemas de prueba si el sobre metálico se encuentra dañado o si el

sello está roto.
Procedimiento
1.- Antes de realizar la prueba se deben ambientar los sistemas de prueba (llevarlos a
temperatura ambiente de 15 a 30ºC, hasta que equilibren esta temperatura) si es que
se almacenaron en refrigeración.
2.- Sacar los sistemas de prueba que se vayan a utilizar de los sobres metálicos que
los contengan y colocarlos sobre una superficie seca y plana.
METODOLOGÍA:
3.- Con una micropipeta adicionar 100 µL de suero o plasma en la ventana de
muestra del sistema de prueba. Letra (S), ó 1 gota de sangre total y agregar 4 gotas
de diluyente.
4.- Conforme al sistema de prueba comienza a funcionar se observa que un color

púrpura se mueve a través de la ventana de resultados del sistema de prueba.
5.-Realizar la lectura de los resultados en un periodo de tiempo de 5 a 20 minutos. No

realizar la lectura de los resultados después de que hayan transcurrido los 20 minutos
ya que pueden dar falsos resultados
RESULTADO NEGATIVO
2021
La presencia de una sola banda coloreada en la región control (Letra C) indica un
resultado negativo.
RESULTADO POSITIVO
La presencia de dos bandas coloreadas una en la región de control (Letra C) y otra en

la región de prueba (Letra T), sin importar cuál aparezca primero, indica un resultado
positivo.
RESULTADO INVALIDO
Si no aparece una banda colorida en la región de control (Letra C), o resultado de la

prueba debe ser invalidado aunque aparezca una línea en la regió n de prueba (Letra
C). La ausencia de ésta banda es indicativo de que se produjo un error en el
procedimiento al momento de realizar la prueba o de que los reactivos de la prueba
sufrieron deterioro.
EN ÉSTE CASO SE DEBE REPETIR LA PRUEBA
BIBLIOGRAFÍA:


2021
NOMBRE DE LA PRÁCTICA DE Determinación cualitativa de anticuerpos anti HIV

MATERIAL
2021
1 Micropipeta de
100 µL
REACTIVOS
1 Dispositivo de
Prueba
EQUIPO
METODOLOGÍA:
1.- Rotule un recipiente por muestra. No se debe utilizar el recipiente más de una vez.
2.- Cuando comience a agregar las soluciones y la muestra al recipiente, espere el tiempo
necesario para que la solución se absorba a la membrana antes de continuar el próximo paso.
3.- Las soluciones y las muestras deberá ser agregadas únicamente en el centro del recipiente.
4.- Agregar 3 gotas de solución buffer al recipiente.
5.- Agregue una gota de la muestra utilizando la pipeta incluida en el kit.
6.- Agregue dos gotas de solución buffer al recipiente.
7.- Agregue dos gotas de solución de lavado al recipiente.
8.- Agregue dos gotas de conjugado PROTEINA A-GOLD al recipiente.
9.- Agregue tres gotas de solución de lavado al recipiente.

2021
10.- Lea los resultados a los diez minutos de iniciar el ensayo.7.- Lavar de 3 a 4 veces con
SSF. al 0.9% llenar hasta 1 cm. por debajo de la boca del tubo. después de cada decantado
remover el botón con SSF al 0.9% y llenar con SSF. esto para obtener un adecuado lavado,
los lavados se efectúan a 3400 RPM/2 min o a 1000 RPM/4 min.
METODOLOGÍA:
RESULTADO POSITIVO
La presencia de dos círculos rojos en el centro del recipiente de ensayo demuestra

una reacción positiva. Cualquier grado de coloración rosado deberá considerarse
positivo.
RESULTADO NEGATIVO
La presencia de un círculo rojo indica una reacción negativa.

2021
RESULTADO INVALIDO
La no presencia de un círculo rojo o el color rojo presente en toda la superficie del no

recipiente es indicativo de un resultado no interpretable. Si aparece un color rosado
en la superficie de la membrana (centro del recipiente), esto puede ser el resultado de
muestras lipémicas o la presencia de particulado en la muestra. La muestra deberá
ser diluida una parte de muestra por tres partes de buffer, y se deberá repetir el
ensayo.1.- En un tubo de ensaye agregar 2 gotas del suero del receptor, 2 gotas de
glóbulos rojos del donador al 5%.
BIBLIOGRAFÍA:


2021
NOMBRE DE LA PRÁCTICA DE Determinación cualitativa de anticuerpos anti-

treponema

MATERIAL
1 Micropipeta de
100 µL
1 Placa serólogica
de vidrio o placa
excavada
2021
REACTIVOS
1 Suero humano
1 Solución salina
fisiológica al 0.9%
1 Antígeno no
treponémico
(cardiolipina,
lecitina, colesterol
de Buey).
EQUIPO
1 Microscopio
METODOLOGÍA:
1.- Agregar 50 microlitros del suero problema a un área circular o excavada de una placa
sexológica de vidrio.
2.- Añadir una gota con gotero calibrado del antígeno a la muestra de suero previamente
depositada.
3.- Mezclar con aplicador.
4.- Rotar por cuatro minutos la placa.
5.- Al término de éste tiempo observar al microscopio la floculación

.
6.- En caso de dar positivo realizar diluciones con el suero problema y la solución salina de tal
modo, que tengamos diluciones 1:2, 1:4, 1:8, 1:16.
7.- Depositar 50 microlitos de las diluciones previamente desarrolladas, en una placa de vidrio.
8.- Depositar una gota del antígeno.
9.- Mezclar con aplicador de madera.
10.- Rotar la placa por cuatro minutos en agitador mecánico o manual en forma circular.
2021
11.- Observar al microscopio la floculación y reportar la máxima dilución.
BIBLIOGRAFÍA: ( De acuerdo a APA )


3.- IMSS SIGLO XXI. TOPICOS SELECTOS DE MEDICINA TRANSFUSIONAL. Editorial

2021
NOMBRE DE LA PRÁCTICA DE Determinación cualitativa de anticuerpos anti-

Chagas

MATERIAL
1 Micropipeta de
100 µL
1 Placa serólogica
de vidrio o placa
excavada
REACTIVOS
2021
1 Suero humano
1 Solución salina
fisiológica al 0.9%
1 Antígeno no
treponémico
(cardiolipina,
lecitina, colesterol
de Buey).
EQUIPO
1 Microscopio
METODOLOGÍA:
Preparación del Test
Todos los componentes deben estar a temperatura ambiente incluyendo las bandejas de
desarrollo, los peines, los reactivos y las muestras; el test debe ser llevado a cabo a
temperatura ambiente (22º-26ºC).
Preparación de la bandeja de desarrollo
1.- Coloque la bandeja de desarrollo en una incubadora a 37ºC durante 20 minutos o déjela a
temperatura ambiente (22º-26ºC) durante 3 horas
2.- Cubra la mesa de trabajo con un papel absorbente que será descartado como residuo que
constituye peligro biológico al finalizar el test.
3.-Mezcle los reagentes agitando la bandeja de desarrollo
Nota: no quite la cubierta de aluminio de la bandeja de desarrollo.

Rompa el papel aluminio utilizando la punta descartable de la pipeta o el perforador,
solamente cuando las instrucciones del test lo indiquen.
Preparación del peine
Cuidado: Para asegurar el correcto funcionamiento del test, NO toque los dientes del
peine.
2021
1.- Quite el empaque de aluminio del peine por el borde con muescas y retire el peine.
2.- Podrá utilizar el peine y la bandeja de desarrollo en su totalidad o solo una parte. Para
utilizar parte del peine:
a) Determine el número de dientes que necesitara para examinar las muestras y controles.
Requiera de un diente por cada test. Cada diente muestra el numero de código “81” del kit,
para posibilitar la identificación del diente suelto.
b) Doble el peine y pártalo en forma horizontal o córtelo con la tijera para separar el numero de
dientes requeridos
c) La parte del peine no utilizado debe ser regresada al empaque de aluminio. Cierre bien el
empaque y manténgalo a temperatura 2º-8ºC
3.- Extraiga 10µl de muestra con la pipeta. Perfore el papel de aluminio de uno de los pocillos
de la fila A de la bandeja de desarrollo con la punta de la pipeta o con el perforador, coloque la
muestra en la parte inferior del pocillo. Mezcle rellenando y expulsando la solución
repetidamente. Deseche la punta de la pipeta.
4.- Repita el paso número 3 para las muestras, incluyendo el control positivo y negativo
suministrado con el kit. Utilice un nuevo depósito en la fila A y cambie las puntas de la pipeta
para cada muestra control.
a) Inserte el peine (con la cara impresa mirando hacia Ud.) dentro de los pocillos de la fila A
que contiene muestras y controles.
Mezcle: quite e inserte el peine dentro de los pocillos varias veces.
b) Deje el peine en la fila A durante 10 minutos exactamente.

Configure el cronometro. Mezcle dos veces más durante la incubación. Un poco antes de
finalizar los 10 minutos perfore el papel aluminio de la fila B utilizando el perforador. No abra
más pocillos de los necesarios.
c) Al cabo de 10 minutos, quite el peine de la fila A. absorba el líquido adherido de las puntas
puntiagudas de los dientes con papel absorbente limpio. No toque la superficie frontal de los
dientes.
Primer lavado (Fila B)
5.- Inserte el peine dentro de los pocillos de la fila B. Agite: quite el peine vigorosamente e
insértelo en los pocillos durante 10 segundos por lo menos para obtener un lavado adecuado.
Repita esta acción varias veces durante el transcurso de 2 minutos; mientras tanto, perfore el
papel aluminio de la fila C. al cabo de 2 minutos, quite el peine y absorba el liquido adherido
con en el paso 4c
2021
Reacción con el conjugado (Fila C)
6.- Inserte el peine dentro de los pocillos C. Mezcle los peines varias veces. Configure el
cronometro en 10 minutos. Mezcle como en el paso 4b. perfore el papel de aluminio de la fila D.
Al cabo de 10 minutos, quite el peine y absorba el líquido adherido.
Segundo lavado (Fila D)
7.- Inserte el peine dentro de los pocillos de la fila D. agite en forma repetida durante 2 minutos.
Mientras tanto perfore el papel aluminio de la fila E. Al cabo de 2 minutos quite el peine y
absorba el líquido adherido.
Tercer lavado (Fila E)
8.- Inserte el peine dentro de los pocillos de la fila E. Agite en forma repetida durante 2 minutos.
Mientras tanto perfore el papel de aluminio de la fila F. Al cabo de 2 minutos, quite el peine y
absorba el líquido adherido.
Reacción de color (Fila F)
9.- Inserte el peine dentro de los pocillos de la fila F. Mezcle como en el paso 4a. Configure el
cronometrador para 10 minutos. Mezcle como en el paso 4b. Al cabo de 10 minutos, quite el
peine.
Reacción final (Fila E)
10.- Inserte el peine nuevamente en la fila E
Al cabo de 1 minutos, quítelo y déjelo secar al aire.
Eliminación de residuos
Deseche las bandejas de desarrollo, las puntas de la pipeta, el papel absorbente y los guantes
como residuos que constituyen peligro biológico.
Interpretación de resultados
La sola aparición del punto superior (control interno) indica que la muestra no es
reactiva a los antígenos contra T. cruzi.
Un punto circular inferior indica la presencia de anticuerpos contra T. cruzi.

2021
BIBLIOGRAFÍA: ( De acuerdo a APA )

1.- Wendel S, Brener Z, Camargo me, Rassi a. Chagas Disease ( American
Trypanosomiasis): its impacto on tranfusion and clinical medicine. ISBT, Brazil
92, Sao Paulo, Brazil1992.
2. - Kierszenbaum F. Chagas Disease and the autoinmunity hypothesis . Clin.

Microbiol.Rev. 12 (2): 210-223. 1999
3. - Schamunis GA.. Trypanosoma cruzi, the etiologic agent of Chagas Disease:

Status in the blood supply in endemic and nonendemic countries. Transfusion
31: 547-557 1991
2021

Banco de Sangre

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Universidad del Noreste

MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

ASIGNATURA: Banco de Sangre.

ELABORÓ: M.E. Rodolfo Guadalupe Vilchis Aguirre.

La información contenida en el presente Manual de

Ante los acelerados cambios tecnológicos y

El Manual de prácticas de laboratorio fue elaborado por

(1) Area Moreira Manuel. Universidad de La Laguna. España

REGLAMENTO DE LABORATORIO ACQB

REGLAMENTO DE LABORATORIO ACQB

1.-Uso restringido de los laboratorios sólo para práctica o

2.-En el desarrollo de actividades de laboratorio, usar sin

4.-Al término de la sesión de laboratorio:

5.-Sobre la seguridad en el laboratorio:

ASIGNATURA: BANCO DE SANGRE

MANUAL DE PRÁCTICAS DE: BANCO DE SANGRE

ASIGNATURA: ___Banco de Sangre__________

NOMBRE DE LA PRÁCTICA DE: PRUEBA DE TIPIFICACIÓN DE ISOANTÍGENOS

No. DE PRÁCTICA: ____1_____ No. DE SESIONES: ___1___

No. DE INTEGRANTES MÁXIMO POR EQUIPO: ______2______

Evalúa la seguridad y confiabilidad de un hemoderivado mediante el análisis y

1.-Para ello de la muestra directa se tomarán 1 o 2 gotas de eritrocitos con la pipeta

2.-Posteriormente se añadirán 2 gotas de los antisueros a probar: anti- A; anti-B;

3.-Se mezclan con aplicadores, se observa y se anota la aglutinación .

4.- Realizar la lectura de los resultados en un periodo de tiempo de 10 minutos. No

5.- Se procede a centrífugar las muestras a 3400 rpm/15 segundos o en su defecto a

6.- Se observa la aglutinación, se interpretan los resultados y se reporta por cruces

7.- Realizar su reporte y entregarlo.

1.- Mencione Usted los beneficios, ventajas de la realización de la prueba de

2.- ¿Qué pasa cuando la concentración antigénica no es la correcta?

3.- Mencione Usted la utilidad de la SSF al 0.085% o 0.9%

4.- Mencione Usted la Utilidad de la fuerza centrífuga en estas pruebas

2.- Linares, Jesús. INMUNOHEMATOLOGÍA Y TRANSFUSIÓN. 3ª edición, Editorial

ASIGNATURA: ___Banco de Sangre__________

NOMBRE DE LA PRÁCTICA DE: Determinación de Rh y Du

No. DE INTEGRANTES MÁXIMO POR EQUIPO: ______2______

Evalúa la seguridad y confiabilidad de un hemoderivado mediante el análisis y

Después de haber determinado en el punto anterior el grupo sanguíneo del paciente,

Se incuba el tubo conteniendo el Anti-D a 37°c por un término de 15 min. Cuando

Después de haber centrifugado se observa el grado de aglutinación reportándose por

PREPARACIÓN DE CÉLULAS DE CONTROL DE COOMBS O SENSIBILIZADAS .

En el caso de que el resultado sea negativo, al añadir el contro l de coombs,

El control de coombs se prepara de la siguiente manera:

1. A un tubo de ensayo se le agregan 6 ml. de solución salina al 0.9% y se le

2. Se extraen 3 ml. De la suspensión anterior y se le agregan 3 ml. De solución

4. Se agregara un paquete de eritrocitos del grupo O Rh positivo, de manera de

5. Se procede a incubar el tubo a 37°C por 30 minutos.

6. Después de la incubación se procede a realizar tres lavados a la suspensión

7. Después del último lavado se reconstituye la suspensión al 5 %. Quedando lista

1.- ¿Cuántos antígenos constituyen el sistema Rho?

4.- ¿A qué se refiere la sigla Du, qué significa?

5.- ¿Cómo detectamos la variante Du?

6.- ¿Qué tipo de anticuerpo es el Anti-D?

7.- ¿Qué consecuencias trae consigo el Anti-D en personas sensibilizadas?

1.- LINARES, JESÚS, INMUNOHEMATOLOGÍA Y TRANSFUSIÓN PRINCIPIOS Y

ASIGNATURA: ___Banco de Sangre__________

NOMBRE DE LA PRÁCTICA DE: PRUEBA DE COOMBS

No. DE INTEGRANTES MÁXIMO POR EQUIPO: ______2______

Evalúa la seguridad y confiabilidad de un hemoderivado mediante el análisis y

2.- Lavar cuatro veces con S.S. al 0.9%.

Nota: SI LA PRUEBA ES NEGATIVA DEJAR INCUBAR A TEMPERATURA

7.- Si el resultado es negativo añadir dos gotas de células de control de coombs.

ASIGNATURA: _Banco de Sangre________

No. DE PRÁCTICA: __1_ No. DE SESIONES: _1___

No. DE INTEGRANTES MÁXIMO POR EQUIPO: 2

ASIGNATURA: _Banco de Sangre________

No. DE INTEGRANTES MÁXIMO POR EQUIPO: 2

ASIGNATURA: _Banco de Sangre________

No. DE INTEGRANTES MÁXIMO POR EQUIPO: 2

ASIGNATURA: _Banco de Sangre________

No. DE PRÁCTICA: _4__ No. DE SESIONES: _1___

No. DE INTEGRANTES MÁXIMO POR EQUIPO: 2

ASIGNATURA: _Banco de Sangre________

No. DE INTEGRANTES MÁXIMO POR EQUIPO: 2

No. DE PRÁCTICA: _6__ No. DE SESIONES: _1___

No. DE INTEGRANTES MÁXIMO POR EQUIPO:2

ASIGNATURA: _Banco de Sangre________