UNIVERSIDAD PERUANA CAYETANO HEREDIA

FACULTAD DE ESTOMATOLOGIA
Roberto Beltrán Neira
Departamento Académico de Medicina, Cirugía y Patología Oral

CURSO:
HISTOLOGIA

TEORIA 1:
METODOS DE ESTUDIO DE LAS
CELULAS Y LOS TEJIDOS
 TIPOS DE CELULAS

EUCARIOTICAS
– Núcleo delimitado por
doble membrana
– Histonas asociadas a
DNA
PROCARIOTICAS
– Núcleo sin envoltura
– No histonas
TOMA DE MUESTRA

JSL
PREPARADOS HISTOLOGICOS

FASES:
1 FIJACION
2 INCLUSION
3 CORTE
4 COLORACION
 FIJACION
Evita autodestrucción por enzimas
(autolisis) o por bacterias.
Insolubiliza las proteinas
Endurece el tejido para preservar la
morfología y la composición
química
 FIJACION
Fijadores:
Formaldehido 10%(Aldehido
Fórmico, Formol )
FIJACION DOBLE. ME
Glutaraldehido (Aldehido
Glutárico) 2%- 6%
Tetraóxido de Osmio
 INCLUSION

Deshidratación
Batería de Alcoholes en
grado creciente
70%, 80%, 90% y Alcohol
Absoluto

Formol Deshidratación Deshidratado

 INCLUSION
Diafanizacion (Aclaramiento)
Líquidos usados: Xilol
Necesidad de un liquido miscible en agua y
parafina
Extrae los lípidos
Tejido se torna Translúcido

Deshidratado Aclarado
 INCLUSION
Inclusión Propiamente
Da consistencia firme a los tejidos
(cortes finos y uniformes)
Sustancias: Parafina (MO)
Resinas Epoxi:
Epon.(ME)
Muestra en parafina fundida (60
grados C)
La temperatura evapora el Xilol
 INCLUSION
Inclusión Propiamente
 CORTE
MICROTOMO
ESPESOR: MO => 3 -8 um

ME => 0,02 - 0,1 um

JSL
 CORTE
CRIOSTATO
Evita pasos antes de parafina, la congelación no inactiva las enzimas, no elimina lípidos

JSL
 COLORACION
FASES

A.- Extensión
agua (45grados C)

Lamina
porta Objetos
Muestra
 COLORACION
Desparafinización:
Xilol: Disuelve la
parafina.
Hidratación:
Bateria de Alcholes
de grado decreciente

Coloración Propiamente
 Coloración propiamente

El tejido es de por sí incoloro

Colorantes: son: - ácidos
- bases
Forman sales con los radicales
ionizables
Elementos (organelas,
moléculas, etc.)
Basófilo: Elemento que se tiñe
con colorantes básicos
Acidófilo: Elemento que se tiñe
con colorantes ácidos
 COLORANTES
Colorantes Elementos
Básicos: Hematoxilina Nucleoproteínas
Ácidas
Ribosomas
Azul de Metileno
Azul de Toluidina Glicoproteinas

Acidos: Eosina Proteínas

Fucsina Acida Citoplasmáticas
Orange G
TINCIÓN CON HEMATOXILINA Y EOSINA

La técnica básica en el
laboratorio de Histología
consta de dos etapas de
tinción: pase por
Hematoxilina y pase por
Eosina.

JSL
ACIDO PERYODICO DE SCHIFF (PAS)

Glicógeno, mucina, y
membranas basales…Rojo a
purpura
Hongos…….Rojo a purpura
Núcleo……...Azul

JSL
 TRICROMICA DE MASSON

NUCLEO……..…NEGRO
MUSCULO, CITOPLASMA Y
QUERATINA…ROJO
COLAGENO…...AZUL O VERDE

JSL
 SUDAN III

Tejido adiposo:
naranja

JSL
 METACROMASIA

Se usan para identificar los

Proteoglucanos.

Presentan metacromasia:
- Mucina
- Matriz del cartílago
- Gránulos de las células
cebadas

Contenido de los gránulos:

- Heparina
- Histamina
Azul de Toluidina
Tiñe los gránulos de color rojo
PROCESAMIENTO DE TEJIDOS DUROS
DIENTE
Descalcifica con Acido Nitrico al 10%
DESGASTE

JSL
HUESO

JSL
 Deshidratado de las muestras

A continuación volvemos a deshidratar los

cortes para preservarlos y hacer
duraderas las muestras

JSL
 Montaje de las muestras
Cubreobjetos
Una gota de medio adhesivo

JSL
 MICROSCOPIO OPTICO
PARTES: - Mecánica y Óptica
Optica
Condensador:
Proyecta un cono de luz
sobre el objeto
Objetivo:
Proyecta imagen aumentada
sobre el ocular
Determina el Límite de Resolución
Ocular:
Amplía mas
Proyecta la imagen sobre
- Retina
- Pantalla
- Placa fotográfica
 MICROSCOPIO OPTICO
Límite de Resolución
Mínima distancia que deben existir entre dos puntos
para que aparezcan individualmente, es de 0,2 um
Aumento Total

Aumento del X Aumento del = 1200X

Objetivo Ocular
 MICROSCOPIO ELECTRONICO
Resolucion: 1,0 nm

Usar un haz de electrones

en vez de rayos luminosos

UNIDAD REPRESENTACION VALOR

Micrómetro………………1um = 0,001mm
Nanómetro………………1nm = 0,001um
 Cromatina
Indice de Actividad Celular
Núcleo poco teñido Núcleo bien teñido

DNA poco DNA muy condensado

condensado
< superficie de
> superficie de contacto
contacto
< Actividad
 Actividad
INTERPRETACION DE IMAGENES

JSL
Muchas gracias