UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO

FACULTAD CIENCIAS DE LA
SALUD MEDICINA

GENÉTICA
DOCENTE: Dr. Josué Acosta
INTEGRANTE: Inuca Deina
SEMESTRE: Cuarto “A”

RESUMEN DE LOS VIDEOS DE GENETICA

En la clase práctica de la cátedra de Genética, observamos en la clase la
función del ADN, la cual lleva nuestra información genética; además de ello
trasciende en la descendencia; dentro de la clase práctica destacamos la
extracción de ADN y la separación en geles de agarosa.
EXTRACCION DE ADN VEGETAL
Es un procedimiento que emplea un cuidadoso sistema ordenado, mediante el
cual se obtiene el ADN, a partir de un proceso largo con el uso de materiales
químicos y técnicas físicas.
Equipos
 Centrifuga
 Sistema Thermoblock
 Campana de extracción
Materiales
 Pipetas
 Puntas estériles
Reactivos
 Isopropanol (para la precipitación).
 Etanol al 70% para limpiar el precipitado.
 Tampón TE para re suspender el
ADN.
 CTAB (Bromuro de hexadeciltrimetilamonio)
 Cloroformo[ CITATION Pér15 \l 3082 ]
Procedimiento:
La extracción de un tejido vegetal comienza por la
recolección de una hoja de tomate joven; para empezar el proceso es
necesario lograr romper las paredes celulares para ello, se congela en
nitrógeno, se tritura la muestra congelada posteriormente se reduce a un polvo
fino. En este momento comienza la ruptura de la membrana plasmática,
comienza cuando se añade el tampón de extracción, este proceso debe ser
realizado en conjunto con el fin de evitar la degradación del DNA.
Para inhibir la acción de las nucleasas, se emplea Mg, para evitar la lisis celular
se pone en un baño térmico, se añade cloroformo con mucho cuidado, luego el
resultado de este procedimiento, se expone a la centrífuga a 13mil
revoluciones. Después de seguir puntualmente los pasos, la muestra final se
conserva en hielo durante 5 minutos y después de la centrifugación y agregar
etanol, se obtiene un precipitado que contiene el DNA. Para conservar la
muestra se mantiene en congelación que a largo plazo es de -20 C o 80 C.

IMPORTANCIA
Es muy importante el proceso de extracción de ADN, ya que mediante la
aplicación de técnicas moleculares y después de realizar los numerosos pasos
se llega a obtener una muestra exitosa con datos confiables, para el estudio.
En el video se puede observar claramente como la extracción, aislamiento, y
purificación de la muestra permite obtener moléculas de ADN, luego de realizar
todo el procedimiento empleando técnicas fisicoquímicas.
El ADN, es como un libro y en la portada luce el título del dueño; siendo único y
propio del individuo. En cada célula contiene nuestra información genética; en
donde se muestra si somos portadores de mutaciones o la presencia de
enfermedades; en la clínica el ADN se utiliza para analizar a pacientes que
padecen enfermedades, infecciosas, genéticas, y tipos de cáncer.
SEPARACIÓN DE ADN EN GELES DE AGAROSA
La electroforesis es un método para separar fragmentos de acuerdo su carga,
tamaño y forma. de ADN del mismo tamaño, en función de su secuencia. Para
ello se aplica a través del gel de agarosa un gradiente que va incrementando
las condiciones de desnaturalización. Conforme las moléculas de doble cadena
se desnaturalizan parcialmente hasta transformarse en moléculas de una
cadena, su movilidad electroforética varía.[ CITATION Nor06 \l 3082 ]
Materiales
 Guantes
 Micropipetas y puntas
 Microondas
 Cubetas de electroforesis
 Fuente de alimentación
 Captador de imágenes
Reactivos
 Agarosa
 Bromuro de Etidio 0.5 (µg/ml)
 Marcadores de pesos moleculares
 0.45 M Tris Base
 0.44 M Ácido bórico
 10 mM EDTA
 PH 8
 Tampón TBE compuesto por THIRS
Tampón de carga
 40% compuesto por sacarosa
 0.25% azul de bromofenol
 0.1 M EDTA. [ CITATION Inv16 \l 3082 ]
Esta técnica es eficaz para la separación de ADN, el ARN y las proteínas,
primero se debe tener claro los factores que interfieren como: tamaño de la
molécula, separación de macromoléculas como proteínas, concentración de
agarosa y conformación del ADN.[ CITATION Ben09 \l 3082 ].
Procedimiento:
El proceso de la separación en geles empleando la electroforesis, inicia cuando
se pesa la agarosa, luego se calienta la mezcla en microondas hasta que
hierva. Se vierte la solución en porta geles que servirá como molde para el gel,
para formar los posillos se coloca un peine, luego cuando el gel se solidifica y
se añade el tampón de carga
El tampón de carga tiene doble función, aumenta la densidad de la muestra y
permite observar el avance del gel por el colorante azul. Posteriormente se
pone la cubeta a electroforesis que, por las sales presentes permite el paso de
corriente de + a -, porque el ADN se encuentra cargado negativamente por los
grupos fosfatos; el voltaje empleado depende del tamaño del gel.
Luego se tiñe el gel con un colorante que se una al ADN, el bromuro de Etidio
un agente intercalarte y mutagénico; una tinción que emite fluorescencia. Al
finalizar se debe Iluminar con luz ultravioleta la muestra, donde se observan los
fragmentos de la muestra y se compara con un patrón
IMPORTANCIA
La electroforesis en gel, se halla entre los métodos más poderosos y
convenientes para la separación de macromoléculas. El realizar este
procedimiento de laboratorio con el fin de separar en fragmentos el ADN de
una muestra y estudiarlos de acuerdo al patrón, sirve de utilidad para evaluar
las proteínas de mieloma que puede detectar un anticuerpo monoclonal.

Trabajos citados
 Investigación. (12 de Abril de 2016). Electroforesis de ADN en gel de agarosa (IQOG-
CSIC). Obtenido de Electroforesis de ADN en gel de agarosa (IQOG-CSIC):
https://www.youtube.com/watch?v=nXeB1Ib13P8

 María, P. D. (23 de Febrero de 2015). Extracción de DNA | | UPV. Obtenido de

Universitat Politècnica de València UPV: https://www.youtube.com/watch?
v=nXeB1Ib13P8

 Pierce, B. A. (2009). Genética: Un enfoque conceptual. Buenos Aires- Bogota- Caracas -

México: Médica Panamericana.

 Vela, N. A. (2006). Glosario de Biotecnología. Mexico - Aguascalientes: Ascus.