Cromatina

Organización del ADN en general

➔ Las moléculas del ADN se ordenan para poder caber en un núcleo que tiene
unos pocos micrómetros y además el empaquetamiento del ADN tiene como
finalidad proteger y regular la expresión de los genes.
➔ En el primer nivel de compactación el ADN se enrolla alrededor de un núcleo
proteico, formando nucleosomas.
➔ La fibra nucleosómica luego se asocia al H1 y se pliega en hélice formando
un Solenoide o fibra de 30nm.
➔ La fibra de 30 nm o Solenoide se pliega en bucles asociado a proteínas no
histonicas que forman un esqueleto o andamiaje que luego a su vez se pliega
y se tornea en hélice para formar las cromátidas.
➔ Una molécula de ADN sólo está ordenada de un extremo a otro durante la
metafase, en la interfase a lo largo de la molécula de ADN hay segmentos
que están condensados.
➔ Aquellos segmentos que tengan genes que la célula esté utilizando van a
estar descondensado, mientras que aquellos segmentos que tengan genes
que la célula no está usando o no tengan genes se van a tener condensados.

Nucleosoma:

➔ El primer nivel de compactación de ADN es la formación de nucleosomas.

➔ En la formación de los nucleosomas el ADN se asocia a proteínas llamadas Histonas
que se agrupan en un conjunto de 8 proteínas y forma un Octámero o Núcleo Histonico.
➔ El ADN da aproximadamente 2 vueltas al rededor de este núcleo histonico y queda un
fragmento de ADN hasta el siguiente Octámero.
➔ Cada nucleosoma tiene en total unas 200Pb, de las cuales 146pb estan unidad al
octamero y 54pb froman el ADN espaciador

Histonas:

➔ El octámero que forma parte del nucleosoma está formado por 8 proteínas que son
histonas.
➔ Las Histonas son proteínas muy positivas y conservadas a lo largo de la evolución, en
casi todos los seres vivos las histonas son prácticamente iguales.
➔ Las histonas H2A, H2B, H3 y H4 son las que forman el octámero que contiene 2 copias
de cada una de estas.
➔ Las Histonas tienen un sector fibroso correspondiente al extremo amino al que se le
denomina Colas y estas tienen abundantes Lisinas y Argininas que son positivas y
interactúan con el esqueleto Pentosa-Fosfato que es negativo.
➔ La unión entre las Histonas y el ADN no se hace en ninguna secuencia en particular,
sino que sólo se genera por atracción de cargas, por enlaces iónicos (No Covalentes).
➔ Si las Histonas se unieran al ADN a una secuencia particular, dicha secuencia tendría
que estar repetida cada 200 Pb, esa es una de las ventajas de que la unión entre el
ADN y las histonas sea por el reconocimiento de cargas.
➔ También este tipo de unión neutraliza a los esqueletos Pentosa-Fosfato estabilizando a
la doble cadena.
 El papel de las Histonas en la regulación:

➔ Las histonas que forman parte del octámero tienen colas correspondientes al extremo
amino donde hay aminoácidos con cargas positivas que se asocian al ADN.
➔ Uno de estos aminoácidos es la Lisina (Se le agrega un grupo acetil) esta se neutraliza
y se libera del ADN dejando al nucleosoma con el ADN mas relajado, lo que va a
favorecer la transcripción.
➔ El ADN nunca esta sin nucleosomas, a no ser en sectores donde haya promotores o
secuencia de relajación donde tienen que interactuar otras proteínas.
➔ Cuando se va a transcribir un gen no se elimina las Histonas sino que se acetilan las
colas para que se liberen del ADN y el nucleosoma se pueda transcribir
➔ La acetilación de las Histonas en general activan la transcripción mientras que la
metilación de las Histonas inhiben la transcripción.
➔ Existen muchísimos mecanismos de modificación covalente post-traduccionales que
afecta la transcripción de los genes mediante el agregado covalente de grupos
acetilos, Metilos, Fosfatos en las colas de las Histonas.
 Segundo nivel de compactación:

➔ El segundo nivel de compactación es la fibra de 30nm o Solenoide.

➔ A la fibra nucleosómica se le asocian histonas H1 que convierten a los nucleosomas en
cromosomas.
➔ La Histona H1 tiende a acercar a los nucleosomas entre si y provocar un plegamiento
helicoidal que se denomina solenoide o fibra de 30nm.
➔ La fibra de 30nm es muy compacta y no se puede transcribir por lo que forma parte de
la heterocromatina o cromatina transcripcionalmente inactiva
➔ Luego el Solenoide continúa compactandose en bucles que se asocian al Scaffulo.

Fibra Nucleosómica:

➔ Una de las funciones de la Nucleasa es proteger al ADN lo que se pone en manifiesto si

se realiza un tratamiento con Nucleasa Micrococal.
➔ La Nucleasa Micrococal solo digiere el ADN que no se encuentra unido a las proteinas
(ADN desnudo).
➔ Si tenemos un fragmento de ADN desnudo y le hacemos un tratamiento con la Nucleasa
Micrococal observaremos que esta fragmenta al ADN en cualquier posición y por lo tanto
se obtienen fragmentos de cualquier longitud.
➔ Si hacemos un tratamiento de una fibra nucleosómica observaremos que la nucleasa
Micrococal solo puede digerir el ADN espaciador por lo que se observan fragmentos de
200pb o múltiplos de 200.
➔ Si hacemos un tratamiento con Nucleasa Micrococal en una fibra de 30 nm observaremos
que el ADN no puede ser digerido debido a que la Nucleasa no puede acceder al ADN
por su alto nivel de compactación.
➔ Una manera de saber si un gen se está utilizando o no en una célula es viendo luego de
un tratamiento con Nucleasa Micrococal si se encuentra o no al gen.
➔ Si el gen se estaba utilizando debería de estar descondensado y la nucleasa lo digirió, asi
que el gen no se va a encontrar.
➔ Si el gen se estaba utilizando estaba condensado así que la Nucleasa no lo pudo digerir y
por lo tanto el gen se va a encontrar.

Solenoide:

➔ El Solenoide o fibra de 30nm contiene regiones llamadas MARS y SARS que son sitios
de unión a proteínas.
➔ MARS son los sitios de unión a proteínas de la matriz nuclear, mientras SARS son sitios
de unión a proteínas del Scaffulo.
➔ La unión del ADN al Scaffulo determina que los bucles se forman a partir del plegamiento
de la fibra de 30nm.
➔ Cada Bucle constituye un fragmento o segmento o dominio de regulación independiente.
➔ La información contenida en un bucle puede utilizarse con independencia de la
información contenida en otro bucle.
➔ Se puede decir que se puede descondensar un bucle sin necesidad de descondensar
otro bucle.
 ➔ El Scaffulo se va a plegar para compactar más al ADN y se van a formar las cromátidas
del cromosoma metafísico que representa el máximo de compactación del ADN.
➔ Únicamente en la metafase se alcanza este nivel de compactación que es útil para la
separación de las cromátidas durante la anafase.
➔ Se puede decir que los cromosomas metafásicos son las unidades segregacionales de la
herencia.
➔ La organización del ADN implica no solo que este ocupe menos lugar sino que participa
en regular la expresión de los genes y la segregación de la información genética.
➔ Por ejemplo el ADN desnudo, la Fibra Nucleosómica y la acetilación de las histonas
proporcionan niveles bajos de compactación que forma la Eucromatina y que permiten la
transcripción de los genes.
➔ El solenoide o fibra de 30 nm y los niveles de organización superior conforman la
Heterocromatina que reprime la expresión de los genes.
➔ La organización en Bucles proporciona dominios de regulación independiente y la
organización en cromátidas facilita la segregación de la información genética durante la
división celular.

Organización del ADN:

➔ Los cromosomas metafásicos corresponden al máximo nivel de compactación del ADN.

➔ En la metafase los cromosomas se encuentran condensados de un extremo al otro y esta
máxima compactación es útil para la separación de las cromátidas que ocurre durante la
división celular.
➔ El nivel de compactación correspondiente al bucle, osea que permite la regulación
independiente de los diferentes bucles que por lo tanto constituyen dominios de regulación
independiente.
➔ La fibra de 30nm o Solenoide es un represor de la expresión de los genes.
➔ La fibra de 10nm permite la expresión de los genes y requiere que las histonas se
encuentren acetiladas y que no haya histonas en el promotor y las zonas reguladoras.
➔ El ADN desnudo es vulnerable al sufrir daños y además no puede regular la expresión de
los genes.
➔ En la interfase en cada cromosoma hay segmentos que se están utilizando y segmentos
que no se están utilizando.
➔ Los segmentos que se utilizan se deben descondensar y se encuentran como fibra de
10nm y constituyen la eucromatina.
➔ Los segmentos que no se utilizan se encuentran organizados en fibras de 30nm y forman
la heterocromatina donde las fibras de 30nm se pueden encontrar asociadas al Scaffulo o
no.
➔ Durante la interfase también se observa en el núcleo una mancha de ARN ribosómico que
es el nucleolo y que contiene ARN ribosómico que es el nucleolo y que contiene ARN
ribosómico que se utiliza para sintetizar a los ribosomas.
➔ En la metafase la molécula de ADN se encuentra en su máximo de compactación y se
observan los cromosomas metafásicos cada uno formado por 2 cromátidas unidas por el
centrómero.
➔ En algunos cromosomas se observa en el brazo corto una segunda constricción a la que le
sigue una masa de cromatina que es el satélite del cromosoma.
➔ Los cromosomas se pueden clasificar en metacéntricos, submetacéntricos, acrocéntricos y
telocéntricos.
➔ Cada cromosoma tiene un patrón de bandas único que permite su identificación.
➔ Mediante la técnica de FISH (Hibridación fluorescente in situ) se pueden utilizar sondas
fluorescentes que se unen a segmentos del cromosoma donde hay una secuencia que se
quiera identificar.
➔ La sonda se debe agregar con el cromosoma descondensado y luego cuando este se
condensa se observa la ubicación de la secuencia o gen que se quería identificar.
➔ Se puede usar la técnica de FISH para hibridar a todo un cromosoma y de esa manera
mediante distintos colores se puede identificar los diferentes cromosomas y la posición de
estos mediante metafase.