Universidad Nacional de Asunción

Facultad de Ciencias Químicas

Ingeniería de Alimentos

Laboratorio de Microbiología de alimentos

Informe de las prácticas 1, 2 y 3: Manejo y uso del microscopio. Preparación, fijación

y coloración simple. Preparación, fijación y coloración de Gram

• Alumnas:
- Liz Arévalos
- Leissa Espinola

• Fecha: 01/09/2021

• Día: Miércoles
1. Objetivos
- Conocer las partes y funcionamiento de un microscopio óptico para utilizarlo
correctamente en las prácticas de laboratorio.
- Aprender las técnicas de preparación de frotis, fijación y coloraciones simples
utilizadas en el estudio microscópico de cultivos microbianos
- Estudiar Técnica de tinción diferencial que permite clasificar las bacterias en Gram
positivas y Gram negativas, según el tipo de coloración que adquieran

2. Metodología
Para la preparación, fijación y coloración simple se siguió el siguiente procedimiento:
(Martínez, 2020)

Colocar una pequeña gota de agua destilada en el

centro del portaobjetos para posteriormente
depositar una pequeña cantidad del cultivo sólido a
examinar, mediante un asa de platino

Utilizando el asa extender el cultivo y secar la

preparación con calor suave al hacer pasar el
portaobjetos con la preparación por la llama del
mechero unas 3 o 4 veces

Dejar enfriar para evitar la precipitación del

colorante

Añadir el colorante violeta de genciana a la

preparación y dejarlo actuar durante 1 minuto, lavar
con agua destilada para arrastrar el exceso de
colorante y dejar secar al aire

Observar al microscopio con el objetivo de x 40

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Para la preparación, fijación y coloración de Gram se realizó el siguiente procedimiento:

Extensión. Desecación. Fijación

Teñir la preparación con cristal violeta durante 1

minuto

Sin lavar, reemplazar el colorante por la solución de

lugol, deja actuar durante 30 segundos y lavar con
agua destilada

Decolorar con solución decolorante-cetona durante

30 segundos para luego lavar con agua destilada

Teñir con safranina y dejar actuar durante 3 minutos,

enjuagar con agua destilada y dejar secar. Observar al
microscopio con el objetivo de x 40

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3. Resultados
Tinción simple

Característica Preparación coloreada

Cultivo: sólido
Aumento total: 400

Forma del microorganismo Bacilar (Escherichia coli)

Tinción de Gram
Característica Preparación coloreada
Cultivo: sólido
Aumento total: 400

Forma del microorganismo Bacilar (Escherichia coli)

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4. Conclusión
De acuerdo a los procedimientos realizados, se ha logrado realizar correctamente la
preparación, fijación y coloración para la tinción simple y la tinción de Gram, siendo
posible observar al correspondiente microorganismo a través del microscopio óptico.
También se logró el correcto reconocimiento de las respectivas partes del microscopio
óptico compuesto, así como su funcionamiento para la observación de los microorganismos
en el campo.

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5. Bibliografía

Martínez, K. (2020). Manual de laboratorio de Microbiología de Alimentos.