TINCIONES DE MICROORGANISMOS
Gina Patricia Calderón Escobar 21462121077 (gicalderon49@uan.edu.co)
Alejandra García Barreto 21462214095 (magarcia98@uan.edu.co)
Yuliana Trujillo Velázquez 21462125615 (ytrujillo97@uan.edu.co)
RESUMEN
La presente practica de laboratorio tiene
como finalidad el uso correspondiente del
material nuevo presentado en la práctica, se
tiene precaución con las nuevas
herramientas del laboratorio y los nuevos
reactivos, distintas coloraciones y MARCO TEORICO
microorganismo atenuados, mediante los
cuales vamos a realizar la práctica. Se
tiene como paso inicial el uso adecuado de
los elementos de protección, el lavado de
manos el uso adecuado de guantes y la
mayor precaución con los experimentos
elaborados en práctica del laboratorio
Los estudiantes utilizaron el material del
laboratorio al realizar las tinciones
siguiendo los pasos de la docente a cargo
de la práctica y de la guía a seguir, donde
se tiene como objetivo la destreza al
realizar las tinciones en las diferentes
láminas portaobjetos. Como primer paso se
realizó la marca de la lámina portaobjetos,
como segundo paso donde se realizó la
diferente tinción para cada reactivo que
realizamos en la clase , el tercer paso se
fija la muestra con una técnica llamada
fijación de calor y en el quinto paso se
realiza las diferentes coloraciones
indicadas por la guía a seguir donde se
obtiene el tiempo y técnica al realizar, las
coloraciones con agua destilada y el uso
adecuado de las coloraciones la cantidad
indicada según la guía, y como sexto y
último paso se deja la muestra en la lámina
portaobjetos en reposo para obtener
resultado de observación en el
microscopio, donde se tiene que realizar
previamente el lavado de manos, no utilizar
el microscopio con guantes , sabiendo la
técnica y el uso adecuado se deja la lámina
con la muestra para basarnos y
concéntranos en la observación para el
reconocimiento de células y estructuras,
reconocimiento de bacterias Gram
positivas y las bacterias Gram negativas,
se realizó otra prueba con tinta china, con un
cultivo se realiza la técnica de lavado que
consistía en lavar suavemente y sin flujo
directo del agua de la llave para evitar
perder el extendido y escurra y seque el
frotis, después se observa en el microscopio.
Se obtiene los diferentes apuntes de las
muestras observada para el respectivo
informe del laboratorio, se limpia y se
organiza el laboratorio se realiza el lavado de
manos, donde se termina toda la práctica
del laboratorio.
Explique la importancia de las tinciones en
el estudio de los microorganismos: Las
tinciones en microbiología son de mayor
importancia ya que son útil en el laboratorio
para el diagnóstico de enfermedades
infecciosas, y determinar especies nuevas.
¿Cuál es el propósito y el procedimiento
para realizar una tinción simple? ¿Cuáles
son las tinciones simples más utilizadas:
La tinción simple es un procedimiento de
tinción rápido y sencillo en el cual se
emplea un solo colorante, por eso se
denomina simple. Se utiliza para
determinar la morfología y la organización
de las células presentes en una muestra.
Procedimiento: Paso 1: Colocar el
portaobjeto sobre un estante de tinción y
aplicar el colorante deseado. Dejar actuar
el tiempo correspondiente. Paso 2: Lavar
cuidadosamente el frotis del portaobjetos
con agua destilada de una botella, o
también con agua del grifo que fluya
lentamente, hasta que la escorrentía se
vuelva transparente. Por lo general esto
tarda de 5 a 10 segundos. Paso 3: Secar el
portaobjetos con toallas de papel
absorbente en un solo sentido y sin frotar.
Asegurarse de que la parte inferior del
portaobjeto quede limpia. Paso 4: Observar
el frotis teñido en el microscopio. Paso 5:
Finalmente, desechar todas las muestras
en un contenedor apropiado que esté
debidamente rotulado como “riesgo
biológico”. Existen varias tinciones básicas
que se pueden usar en el laboratorio de
microbiología. Las tinciones más utilizadas
son: Azul de metileno, Violeta de cristal,
Verde malaquita, Fucsina básica. Estas
tinciones funcionan bien en las bacterias
porque tienen iones de color (cromóforos)
con carga positiva (catiónicos). ¿Cuál es el
propósito y el procedimiento para realizar
una tinción compuesta? ¿Cuáles son las
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Gina Patricia Calderón Escobar 21462121077 (gicalderon49@uan.edu.co)
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tinciones compuestas más utilizadas? El RESULTADOS Y DISCUCIÓN

colorante utilizado pone de manifiesto
diferencias entre células bacterianas o Para iniciar con esta práctica de laboratorio se
entre partes de una misma célula.Tinción prepara adecuadamente y con mucho cuidado
de Gram, definida como una tinción todos los instrumentos para la elaboración del
diferencial, ya que utiliza dos colorantes y procedimiento y elaboración de tinciones y
clasifica a las bacterias en dos grandes uso de la observación en las diferentes
grupos: bacterias Gram negativas y laminas portaobjetos que se va realizar.
bacterias Gram positivas, Tinción de Ziehl-
Neelsen es la técnica comúnmente usada
en el diagnóstico rutinario de tuberculosis,
Tinción de Wirtz. Se basa en las
propiedades diferentes que poseen
esporas y células vegetativas. Tinción
negativa La tinción negativa fue
desarrollada para microscopia de luz con el
fin de rodear y delinear las bacterias no
teñidas u otros materiales biológicos.
Tinción de azul algodón de lactofenol
examen microscópico es de gran
importancia en micología para la
observación de las diferentes especies de
hongos. ¿Cuáles tinciones se utilizan para Figura 1: Antes de iniciar la practica se
la tinción de BAAR (Bacterias acido alcohol utiliza el instrumental adecuado con sus
resistentes)? Tinción de Ziehl-Neelsen esta respectivos elementos de protección para el
tinción permite diferenciar a las bacterias
uso adecuado del laboratorio.
en dos grupos: aquellos que son capaces
de resistir la decoloración con alcohol-ácido
y aquellos que no lo son.25 La sensibilidad
de esta tinción para identificar bacilos
ácido-alcohol resistentes es del 74%.
¿Cuáles tinciones se utilizas para observar
flagelos y endosporas? La tinción de Gram,
tinción de cápsulas se fundamentan en el F
contraste. Los colorantes tiñen el fondo de ig
la preparación mientras que la cápsula
u
queda incolora. y tinción de endospora,
r
es utilizada ampliamente para la
identificación de bacterias esporuladas, a 2: Se lava con agua, jabón y alcohol las
generalmente a géneros Bacillus y láminas portaobjetos las secamos con
Clostridium, algunas de las cuales son toallas desechables y de esta manera las
patógenas por naturaleza. láminas quedan listas para iniciar el
procedimiento.
OBJETIVOS
1. El objetivo del laboratorio es identificar por
medio de la tinción de gram si son positivas o
negativas y que estructuras, forma y tamaño
forman en el microscopio. También podemos
observar si son cocos, basilo y espirilo.

2. Podemos ver microscópicamente si hay un

proceso infeccioso y poder hallar una
solución para este proceso microbiana.
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Figura 3: La docente encargada de la
práctica se acerca con una jeringa de solución
salina donde se deja una pequeña cantidad de
gotas en la lámina dejando un medio líquido en el
frotis con los microorganismos.
Figura 4:
PREGUNTAS
Realice un análisis, correlacionando los resultados
obtenidos y los conceptos teóricos que soportan la
práctica. La discusión de resultados tiene un
componente altamente teórico y es necesario que
la información que soporte esta sección sea citada
y verificada en función de utilizar las referencias
pertinentes para el caso.
En su análisis resuelva:
1. ¿Por qué se observan diferencias en coloración
entre las cepas analizadas por tinción de Gram y
no se observan con la tinción simple de azul de
metileno?
Respuesta: Porque son tinciones distintas y en la
observación de la tinción simple el colorante
usado sirve solo para denotar la morfología
celular y en la tinción diferencial sirve diferencias
entre células bacterianas o entre partes de una
misma célula.
2. Explique cómo se verían las células bacterianas
en el procedimiento de tinción de Gram si se
cometieran los siguientes errores: a. Incubar el
decolorante demasiado tiempo
Respuesta: El decolorante tiende a ser muy
fuerte puede perder la muestra lo que puede
causar es que el decolorante sirve elimina el
cristal violeta de las grandes negativas al aplicar
demasiado puede alterar la muestra y se puede
confundir con unas gran positiva.
b. Incubar el decolorante poco tiempo
Respuesta: El decolorante es el encargado de
eliminar el cristal violeta de las Gran negativas al
aplicar y dejarlo poco tiempo no se va realizar la
decoloración y la safranina no va actuar de manera
adecuada dándole el color rosado de las Gran
negativas
c. No fijar por calor antes de teñir
Respuesta: Si no se fija la muestra con calor
ocasiona que la muestra no quede en su punto fijo
podemos decir que no se compacta y al tener
contacto con el medio liquido la muestra se va
perder o con los mismos colorantes y el agua,
quede limpia el porra objetos.
3. ¿De qué color se observarían las esporas si
no se calienta el verde de malaquita?
Respuesta: El verde de malaquita es un
colorante débilmente básico tiene una carga
débil por lo tanto se une débilmente a las
bacterias, si no se calienta observaríamos las
células vegetativas obtendríamos un color
rosado.
4. ¿Cuáles son las aplicaciones de las
tinciones utilizadas?
Respuesta: Tinción simple sirve para
observar la morfología de los
microrganismos.
Tinción diferencial sirve para observar
bacterias Gram negativas y Gram positivas.
5. ¿Qué se tiñe y que no se tiñe en la
tinción de cápsula?
Respuesta: Primero se utiliza tinta china se
fundamenta en crear un contraste entre el
fondo del preparado de la capsula
impenetrable del microrganismo. El fondo se
tiñe de oscuro y la capsula queda incolora se
esta manera se evidencia esta estructura.
BIBLIOGRAFIA
 https://www.ugr.es/~pomif/pom-
bac/pb-iii/pb-iii-3- gram.htm
 https://www.frro.utn.edu.ar/
repositorio/catedras/quim
ica/5_anio/biotecnologia/practico4
.pdf 4 | 13
 https://www.lifeder.com/cristal-violeta/
CONCLUCIONES
1-Mediante esta práctica de laboratorio
logramos obtener nuevos conocimientos
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sobre la tinción de microorganimos y su

morfología.

2-Se evidencio en el microscopio las

distintas y bacterias con las que todos
estaban trabajando en la práctica y las
diferencias entre una Gram positiva y una
Gram negativa.

3-Reforzamos el conomiento sobre lo

anteriormente visto en clase mediante el
orden y técnica en que se deben elaborar
las tinciones dándonos a conocer que para
cada tinción se observa diferentes
imágenes en el microscopio y sus
diferentes estructuras, tamaño y color.
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COLORACIÓN SIMPLE

Magnificación: 100 X

Nombre del microorganismo

Morfología celular
● Forma
● Arreglos
● Color de la célula
● Reaccion a la coloración
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COLORACIÓN SIMPLE

Magnificación: 100 X

Nombre del microorganismo

Morfología celular
● Forma
● Arreglos
● Color de la célula
● Reaccion a la coloración
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COLORACIÓN DE
ENDOSPORAS

Magnificación: 100 X

Nombre del microorganismo

Morfología celular
● Color de las esporas
● Color células vegetativas
● Localización de la
endospora
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Yuliana Trujillo Velázquez 21462125615 (ytrujillo97@uan.edu.co)

COLORACION

Magnificación: 100 X

Nombre del microorganismo

Morfología celular
● Forma
● Arreglos
● Color de la celula