1

PRACTICA NO.1
PREPARACIÓN DE FROTIS MICROBIANO
Y OBSERVACIÓN BAJO MICROSCOPIO
ÓPTICO
Unidad Interdisciplinaria de Ingeniería Campus Guanjuato

Grupo: 2BV2 / Equipo 3

Carrera: Ingeniería en Biotecnología
Materia: Laboratorio de Técnicas
Docentes: Silvia Diaz Sandoval Microbilógicas.
Agustín Hilario Ramirez Rocha
Ana Laura Rodriguez Sotelo Cervantes Gutierrez Fernanda Isabel
Rocio Bustos Antonio Rosalio
Fecha de entrega: 13/09/2023 Rojas Vidal Ximena Alejandra
Silao de la Victoria a 13 de septiembre de Vazquez Sanchez Ximena
2023
 ÍNDICE 2

En que consintió la
práctica? Discusión

Resultados Conclusiones

Objetivos
Objetivos

Identificar la morfología de los cultivos microbianos mediante tincion

simple y diferencial
Llevar acabo acciones indicadas para poder operar un microscopio de
manera correcta
Observar cuales son las formas y técnicas correctas para preparar un
frotis microbiano
Analizar las partes que constituyen un microscopio
Identificar los diferentes materiales utilizados en el laboratorio tales
como el porta-objetos el asa bacterióloga empleados para la elaboración
de un frotis microbiano
 3
En que consintió la
práctica?

Los microorganismos no teñidos

muestran pocos detalles morfológicos y
es necesario teñir la célula para su
observación. Se realizó tinción diferencial
y simple con la ayuda de diferentes
colorantes para poder clasificarlos y así
obtener las características de los
microorganismos.
 4
En el primer paso antes de la coloración de las
bacterias, se preparó el frotis el cual consta de:

Desengrasar un portaobjetos.
Colocar una pequeña gota de agua destilada.
Esterilizar el asa bacteriológica.
Coger una muestra de la caja Petri, con la
misma.
Ingresar la muestra en el porta objetos con el
agua y hacer circulos para esparcir la
muestra.
Exponer a la flama 3 veces por 5 seg.
Dejar secar la muestra.
Hacer el proceso de la "Tinción de Gram".
 5

Tinción de Gram Durante el desarrollo de la practica, parte

vital de la misma, fue el uso del método
de la "tinción de Gram", ya que esta
consiste en:
Una técnica de laboratorio que se utiliza
rutinariamente en los estudios
microbiologicos de las bacterias. Es un tipo
de tinción diferencial empleada en
bacteriología para la visualización de
bacterias, sobre todo en muestras clínicas.
Esto con la finalidad de separar a las
bacterias en dos grandes grupos: Gram (+) y
Gram (-).
6
 7

Resultados
 Tabla de resultados. 8

TABLA 1:
Observación al
microscopio de
las muestras a
analizar (Escherichia
coli y Bacillus Subtilis)
 Tabla de resultados. 9

Microorganismo Observaciones Tipo de Tinción Imagen

TABLA 2:
Coloración: La Escherichia Coli con
Observación al
muestra se tiñe de Tinción Diferencial.
microscopio de Escherichia Coli. color violeta debido Colorantes Cristal
las muestras a
al cristal violeta. Violeta y Safranina.
analizar (Escherichia
Forma: Bacilos Gram Positivas (+).
coli y Bacillus Subtilis) Objetivo 100X. Aceite de inmersión.

con Tinción Diferencial.

Coloración: La
Bacillus Subtilis con
muestra se tiñe de
Tinción Diferencial.
color rojizo debido
Bacillus Subtilis Colorantes Cristal
al colorante de
Violeta y Safranina.
safranina.
Gram Positivas (+)
Forma: Bacilos Objetivo 100X. Aceite de inmersión.
 10

DISCUSIÓN
 Tinción Diferencial Gram 11

GRAM GRAM
NEGATIVO POSITIVO
Tinción Diferencial Gram 12
Tinción Simple 13
 14

Conclusión
 15

La bacteria Escherichia Coli a pesar de ser Gram Positiva en

las muestras se demostró en la bibliografía consultada que es
Gram negativa por el exceso de tiempo en el colorante.
Por otro lado, la bacteria Bacillus Subtilis mostro una
morfología coherente a la bibliografía consultada.
Conocer el procedimiento de las diferentes tinciones es de
suma importancia ya que los errores pueden llevar a una
mala interpretación de resultados morfológicos y bioquímicos
 16

El uso del microscopio es una parte fundamental

de la práctica por lo que conocer las partes del
dispositivo y como usarla de forma correcta ya
que importa la luz en cada uno de los objetivos, el
aumento se relaciona con el diámetro de
observación, el condensador tiene 3 formas de
usarlos y depende de la muestra que se observara
y finalmente la limpieza de este aparato es de
suma importancia por que afecta las
observaciones de las muestras.
 BIBLIOGRAFÍA
1.-Gram, C. (1884). The differential staining of Schizomycetes in tissue sections and in dried preparations. Fortschritte der Medizin, 2, 185-9. Disponible en
https://web.archive.org/web/20160610220109/http://www.asmusa.org/ccLibraryFiles/FILENAME/0000000235/1884p215.pdf.
Ormaechea, D. E. (2021, agosto 11). ¿En qué consiste la tinción de Gram? Blog Salud MAPFRE. https://www.salud.mapfre.es/pruebas-
diagnosticas/otras-pruebas-diagnosticas/tincion-de-gram/
La Pared bacteriana. (s/f). Edu.ar. Recuperado el 11 de septiembre de 2023, de http://www.biologia.edu.ar/bacterias/micro4.htm(S/f). Fbsbx.com.
Recuperado el 11 de septiembre de 2023, de https://cdn.fbsbx.com/v/t59.2708-
21/370661214_1041551170217214_4881428888170854430_n.pdf/Volumen-27-N
Tasaki, S., Nakayama, M., & Watanabe, S. (2017). Morphologies of Bacillus subtilis communities responding to environmental variation. Development
Growth & Differentiation, 59(5), 369–378. https://doi.org/10.1111/dgd.12383
Libretexts. (2022). Front matter. LibreTexts Español.
https://espanol.libretexts.org/Biologia/Microbiolog%C3%ADa/Microbiolog%C3%ADa_(OpenStax)/00%3A_Front_Matter
Pírez, M., & Mota, M. (2006). Morfología y estructura bacteriana. Temas de bacteriología y virología médica, 23-42.
TECNOLOGICAS, E. D. C. B. Y., & HISTOTECNOLOGIA, T (2015). IMPORTANCIA DE LAS TINCIÓN DE GRAM PARA LA IDENTIFICACIÓN DE LA
ESCHERICHIA COLI.
Realpe, M. E., Hernández, C. A., & Agudelo, C. I. (2002). Especies del género Bacillus: morfología macroscópica y microscópica. Biomédica, 22(2), 106-
109.
Rodriguez, G. (2002). Principales características y diagnóstico de los grupos patógenos de
¡GRACIAS!