"Cromatografía

"Cromatografía en
en papel"
papel"

Centro de Bachillerato Tecnológico Industrial y de Servicios No. 85

Módulo l: Asiste en las operaciones básicas del laboratorio de acuerdo con
los procesos estandarizados.
Submódulo No.3: Utiliza técnicas de separación y purificación con base a
procedimientos estandarizados.
Competencia profesional 8: Emplea técnicas de purificación de sustancias
químicas, siguiendo instrucciones y procedimientos de manera reflexiva y
aplicando las normas de seguridad.
Profesor: Miguel Ángel Viera Coello
Equipo No: 6
Grado y grupo: 2BLM
Especialidad: Laboratorista químico
Integrantes del equipo:
Aristeo Clara Ingrid
Jiménez Flores Melanie
Mora Hernández Greysi Camila
Pérez Castro Ariadna Rosalba
Salgado Cerón Danna Kristel
Toto Vences Pedro de Jesus
Parcial evaluado: Tercer parcial
Tema: Práctica 4. "Cromatografía de papel"
Fecha de entrega: 22/05/2022
 CROMATOGRAFÍA EN PAPEL

Teoría:

La cromatografía es un método de separación de mezclas, es ampliamente utilizado

en diversas ramas de la ciencia. Se puede utilizar para cuantificar, identificar y
separar los componentes de una mezcla. Para ello emplea el principio de la
retención selectiva, que consiste en el distinto comportamiento de los componentes
de una mezcla sobre un soporte y una fase líquida o gaseosa que fluye a través del
soporte.

Tipos de soporte:

- Papel
- Gas
- Líquido
- Resina

Propósito:

Separar los componentes de tintas comerciales utilizando técnicas cromatográficas.

Preguntas frecuentes:

1. ¿Qué función cumple el papel filtro en la cromatografía?

R= En la cromatografía sobre papel, las interacciones del soluto con el papel
hacen que los compuestos se desplacen a velocidades diferentes. A medida
que el disolvente asciende por el papel, encuentra la muestra que empieza a
viajar por el papel con el disolvente.
2. ¿Qué es la cromatografía en papel y para que sirve?
R= Permite la separación, identificación y determinación de constituyentes
químicos en mezclas complejas. Ningún otro método de separación es tan
poderoso y ampliamente aplicable.
3. ¿Qué ocurre cuando el disolvente corre por el papel filtro?
R= Los reactivos arrastran la tinta formando unas franjas de colores
difuminadas.
Conceptos:

En general, todos los tipos de cromatografía dependen de una serie de

instrumentos, compuestos químicos y determinada tecnología. Debido a ello, es
importante conocer algunos conceptos para poder entender el funcionamiento de
las técnicas cromatográficas:

• Fase estacionaria: Es una sustancia que se mantiene inmóvil mientras se

ejecuta la cromatografía.
• Fase móvil: Es la sustancia que se mueve durante la cromatografía. Puede
ser un líquido o un gas. La muestra que contiene el analito se administra en
la fase móvil.
• Analitos: Son las sustancias que se van a separar, cuantificar y/o identificar
utilizando la cromatografía, es decir, son las sustancias que se van a analizar.
• Muestra: Es la mezcla que se va a analizar. Puede estar constituida por uno
o varios analitos, y otros componentes que pueden no ser de interés, de los
que serán separados los analitos.
• Tiempo de retención: Es el tiempo que demora un analito en pasar desde
la columna o sistema por donde pase la fase móvil, hasta el detector (equipo
que puede dar una señal de detección utilizando alguna propiedad del
analito).
• Selectividad: Es la capacidad de diferenciar cada componente en la mezcla.
• Eluyente: También se refiere a la fase móvil cuando sale de la columna
cromatográfica.

Hipótesis:

Creemos que en esta práctica podremos observar como las muestras se arrastran
por el papel filtro y obtendremos una decoloración.
Material:

- 1 Gradilla
- 1 Matraz aforado de 100 mL
- 1 Papel filtro
- 1 Pipeta graduada de 5 mL
- 1 Piseta
- 1 Probeta de 100 mL
- 4 Tubos de ensayo
- 1 Vaso de precipitados de 250 mL
- 2 Tubos capilares
- 2 Frascos estériles

Muestras:

- Tinta negra
- Tinta roja
- Tinta azul
- Tinta verde

Reactivos:

- C2H5OH (Alcohol Etílico/Etanol 96%)

- NH4OH (Hidróxido de amonio)

Procedimiento:

- Preparación del NH4OH 1N

1. Realizar los cálculos necesarios para preparar 100 mL de NH4OH 1N
2. Tomar la cantidad necesaria de NH4OH con la pipeta volumétrica y colocarla
en el matraz aforado.
3. Aforar con agua destilada y mantener tapada la disolución hasta que
requieras utilizarla.
4. Después de utilizarla, rotúlala y guárdala, la utilizarás la práctica siguiente.
- Preparación del papel cromatográfo
5. Cortar el papel filtro de un tamaño adecuado al frasco a utilizar (recuerda que
debes tener las manos limpias, libres de polvo y grasa).
6. Trazar un margen de aproximadamente 2 cm de longitud en la parte inferior
y superior del papel.
7. Marcar tenuemente tres marcas equidistantes sobre la línea que esta como
margen inferior, aquí aplicarás las muestras de tinta.
- Elaboración de la micropipeta
8. Tomar un tubo capilar y calentar la parte central con el mechero, tomando los
extremos con las manos y girándolo.
9. Estirar el capilar hasta que se divida en dos trozos.
10. Dejar enfriar y con un golpe suave sobre el banco de trabajo despuntar las
micropipetas y la que presente un orificio menor, será la que utilizarás para
colocar la muestra.
11. Construye una micropipeta para cada muestra.
- Aplicación de la muestra
12. Numerar los tubos de ensaye del 1 al 3 y coloca las tintas en cada uno de
ellos.
13. Colocar en el cuarto tubo una mezcla de todas las tintas.
14. Colocar la muestra sobre el papel con la micropipeta.
- Separación e identificación de las tintas
15. Colocar en el frasco de boca ancha los disolventes: alcohol butílico, alcohol
etílico e hidróxido de amonio 2 N, en proporciones 3:1:1. No debe rebasar la
mezcla una altura de 1.5 cm y tapar el frasco por 5 minutos.
16. Enrollar el papel cromatográfico con las muestras y colocar dentro del frasco.
17. Dejar correr el cromatograma hasta que el eluyente llegue al margen
superior.
18. Sacar el cromatograma del frasco y dejarlo secar.
19. Desenrollar el cromatograma y delinear las manchas correspondientes a
cada una de las tintas.
20. Medir las distancias recorridas por el eluyente y por los componentes de las
tintas y calcula el Rf para cada una.
Evidencias fotográficas:

Tomar la cantidad Verter el NH4OH Solución de NH4OH

de NH4OH (6.6 mL). en el matraz aforado. aforada y etiquetada.

Preparación del Muestras vertidas en los tubos Tomar la cantidad

papel cromatográfo. de ensayo. alcohol butílico.

Tomar la cantidad. Aplicar la muestra. Cromatogramas en los frascos.

Separación e identificación de
las tintas.
Cálculo:

Solución de NH4OH

Datos:

Normalidad = 1

Moralidad = 1

Vsolución = 100 mL = 0.1 L

Peso molecular = 35 g/mol

Densidad = 880 g/L

Pureza = 30%

Fórmula: Vsoluto = (Pm) (L) (M) (100) ÷ (d) (%)

Sustitución: Vsoluto = (35 g/mol) (0.1 L) (1 M) (100) ÷ (880 g/L) (30%) = 6.6 mL

NH4OH = 6.6 mL

Resultados:

• Preparación del NH4OH 1N

• Preparación del papel cromatográfico
• Separación e identificación de las tintas

Observaciones:

Notamos la decoloración de las tintas a medida que el disolvente subía por el papel
filtro.

Conclusión:

Aprendimos a separar los componentes de las tintas comerciales por medio de la

cromatografía en papel.
Mejoras de actividades:

No logramos concluir por completo la práctica, nos quedamos en el paso no. 17/20
a falta de tiempo no logramos secar el cromatograma por lo tanto no calculamos el
Rf para cada una de las muestras; finalizamos esta práctica con una separación e
identificación de tintas.

Respecto a nuestro trabajo en equipo consideramos que mejoró, pero tuvimos

algunas fallas en las cuales desperdiciamos algo de tiempo, nos enfocaremos en
mejorar nuestra comunicación y organización.

Referencias bibliográficas:

Enciclopedia Concepto (s.f). Cromatografía. 05/22/2022. Editorial Etecé.

https://concepto.de/cromatografia/

Sgariglia M. (2010). Cromatografía: conceptos y aplicaciones. 05/21/2022.

https://repositoriosdigitales.mincyt.gob.ar/vufind/Record/CONICETDig_f3a02d9894
7fd2d0a85d15cbddd55b73

Valesco D. (2015) CROMATOGRAFÍA >12.7 OTROS TIPOS DE

CROMATOGRAFÍA. 05/21/2022.

https://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/cromatografia_altres.html#:~:text=La%
20cromatograf%C3%Ada%20en%20papel%20de,mezclas%20complejas%20de%
20compuestos%20similares.
 Practica No. 4
“cromatografía
Tomar un tubo capilar y Enrollar el papel
en papel”
calentar la parte central cromatográfico con las
con el mechero, muestras y colocar
tomando los dentro del frasco.
extremos con las
Realizar los cálculos manos y girándolo.
para preparar 100ml de
NH4OH 2N. Dejar correr el
cromatograma hasta que
Estirar el capilar hasta
el eluyente llegue al
que se divida en dos
margen
trozos.
Medir con ayuda de una superior.
pipeta la cantidad
necesaria de NH4OH y
colocarlo en un matraz Dejar enfriar y con un
volumétrico. golpe suave sobre el Sacar el cromatograma
banco de trabajo del frasco y dejarlo
despuntar las secar.
micropipetas Desenrollar el
Aforar con agua cromatograma y
destilada y tapar la delinear las manchas
disolución hasta que correspondientes a
requieras utilizarla . Construye una
cada una de las tintas.
Después de utilizarla, micropipeta para cada
rotúlala y guárdala muestra

Medir las distancias

Cortar el papel filtro de Numerar los tubos de recorridas por el
tamaño del frasco a ensayo del 1 al 3 y eluyente y por los
utilizar colocar las tintas en componentes de las
cada uno de ellos. tintas y calcula el Rf
Colocar en el cuarto para cada una.
tubo una mezcla de
Trazar un margen de todas las tintas
2cm de longitud en la
parte inferior
y superior del papel Lavar y desinfectar
Colocar la muestra materiales empleados y
sobre el papel con la área de trabajo
micropipeta.
Marcar tenuemente tres
marcas equidistantes
sobre la línea que esta Colocar en el frasco 1ml
como de cada disolvente
margen inferior, aquí C₄H₁₀O, C2H5OH, Fin
aplicarás las muestras NH₄OH 2N y tapar el
de tinta. frasco por 5 minutos