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qumica.
Todos los laboratorios tienen sus instrumentos para trabajar. Para realizar los
experimentos correctamente, los laboratorios de qumica usan los siguientes
instrumentos. Ahora que los sabes, seguramente podrs realizar con tus
alumnos mejores prcticas experimentales.
La clasificacin del Instrumental de Laboratorio se presentan como aparatos y
utensilios. Los aparatos se clasificaron de acuerdo a los mtodos que estos
utilizan en: Aparatos basados en mtodos mecnicos y en aparatos basados en
mtodos electromtricos. Los utensilios a su vez se clasificaron de acuerdo a su uso en: Utensilios de sostn,
utensilios de uso especfico, utensilios volumtricos y en utensilios utilizados como recipientes o simplemente
"recipientes".
Nombre y dibujo
Funcin
Tipo de material
3.- Fiola
Generalmente de
vidrio pero tambin
hay de plstico y
metal.
4.-Frasco de reactivo
Permite: guardar sustancias para almacenarlas
los hay mbar y transparentes los de color mbar
se utilizan para guardar sustancias que son
Material de vidrio.
alteradas por la accin de la luz del sol, los de
color transparente se utilizan para guardar
sustancias que no son afectadas por la luz solar
7.-Probeta milimetrada
8.- Pipeta
9.-Pera de decantacin
De vidrio o metal.
13.-Rejilla de asbesto
14.-Cucharilla de combustin
Se utiliza para realizar pequeas combustiones
de sustancias, para observar el tipo de flama, De metal.
reaccin, etc.
15.-Pinza de madera
17.- Matraz
18.-Luna de reloj
19.-Portaobjetos
20.-Crisoles
23.-Gradilla
24.-Pinza
25.-Escobillas de cerdas
Segn el dimetro se utilizan luego de los
experimentos de fsica, qumica o pruebas de
De metal.
laboratorio para lavar: tubos de ensayo, buretas,
vasos de precipitado, erlenmeyer, etc...
26.-Tripode
Se utiliza cuando no se tiene el soporte universal
para sostener objetos con firmeza. Es
ampliamente utilizado en varios experimentos. La
finalidad que cumple en el laboratorio es solo una,
ya que su principal uso es como herramienta de De metal.
sostn a fin de evitar el movimiento. Sobre la
plataforma del trpode se coloca una malla
metlica para que la llama no d directamente
sobre el vidrio y se difunda mejor el calor.
1.
2.Nos dice cuanta cantidad de la sustancia que nos interesa est presente en la muestra. La concentracin es proporcional a la
absorbancia, segn la Ley Beer-Lambert: a mayor cantidad de molculas presentes en la muestra, mayor ser la cantidad
de energa absorbida por sus electrones.
Abs = K C L
Abs: absorbancia
K: coeficiente de extincin molar
C: concentracin
L: distancia que viaja la luz a travs de la muestra. (normalmente es de 1 cm)
La cubeta promedio, que guarda la muestra, tiene dimensiones internas de un centmetro (L). La ecuacin describe una lnea
recta, donde el origen es cero. Si L es constante (1.0 cm) y se conoce el valor de K, podemos calcular C en base a Abs:
Abs / K L = C
El espectrofotmetro mide la absorbancia de una muestra en los espectros de luz ultravioleta y visible (200 a 850 nm). El
largo de onda es determinado por un prisma que descompone el rayo de luz de acuerdo al largo de onda escogido. Luego la
luz pasa por una hendidura que determina la intensidad del haz. Este haz atraviesa la muestra y llega a un tubo fotogrfico,
donde es medido. La cantidad de luz que atraviesa la muestra es el porcentaje (%) de tramitancia. Podemos usar esta unidad
o cambiarla a absorbancia usando la siguiente ecuacin.
%T = - Log Abs.
El espectrofotmetro nos puede dar ambos valores a la misma vez, ahorrando la necesidad de hacer los clculos.
(Tramitancia= cantidad de luz que atraviesa la mezcla).
Una caracterstica del instrumento es la necesidad de "blanquear" el aparato antes de cada lectura. Esto se hace colocando
una cubeta con una solucin control que tenga todos los componentes de la reaccin menos la sustancia que va a ser
medida en el instrumento y ajustando la lectura a cero absorbancia. El propsito de esto es eliminar el registro de
absorbancia (background) que puedan presentar los dems componentes de la reaccin a ese largo de onda particular. Todas
las molculas presentan absorbancia porque todas interfieren con el paso de la luz. Slo que la absorbancia ser ptima a un
largo de onda de luz especfico para cada tipo de sustancia.
Cubetas
Las cubetas son unos viales de plstico transparente o cuarzo que dejan pasar la luz. Los mejores para trabajos
de investigacin son las de cuarzo porque su interferencia al paso de la luz es mnima. Son ms costosas inicialmente pero
bien tratadas pueden ser reusables. Las de plstico vienen con distintas caractersticas. Por lo general son desechables,
aunque pueden reusarse. El tipo de cubeta plstica a usar depende del rango de luz en el que se van a analizar las muestras.
Vienen unas para luz visible, que son las ms econmicas, y otras para el rango de visible a ultravioleta. Estas son ms
verstiles.
Ambos tipos de cubetas deben manejarse con cuidado para evitar rallazos sobre la superficie por donde pasa la luz. Si la
cubeta est rallada, los rayos de luz que incidan en la zona se difractan y no pasan por la muestra, por lo que puede dar
lecturas de absorbancia errneas. Esto es especialmente crtico cuando queremos determinar concentracin en una muestra.
Antes de tomar una lectura, debemos observar que la cubeta no tenga rallazos ni est sucia. Si se ven marcas de polvo u
otro tipo de sucio la cubeta debe limpiarse con papel tis (Kimwipes). Si la cubeta se manipula mucho, debemos sostenerla
Pipetas y pipeteadores
Usamos las pipetas para medir volmenes de lquidos de forma ms precisa que
con una probeta. Y son ms verstiles, sobre todo al manejar volmenes
pequeos.
Las pipetas de bulbo son tiles para medir volmenes que no requieren de
mucha precisin. Antes se usaban pipetas "Pasteur" de cristal a las que se les
aditaba un bulbo de goma que se usaba para succionar el lquido. Ahora vienen
en plstico desechable de una sola pieza y se consiguen con o sin calibracin.
Las pipetas volumtricas vienen en distintos tamaos, desde 1 ml hasta 200 ml,
y con distintas formas, de acuerdo al uso que se les d. Tambin vienen en
distintos materiales como boro silicato y plstico, desechables o reusables,
estriles o sin esterilizar. Algunas pueden ser esterilizadas en horno o autoclave. Para llenarlas se pueden usar bulbos
de caucho, bombas manuales o elctricas, o equipos de llenado. Las bombas elctricas y los equipos de llenado son muy
tiles si se est trabajando con mltiples muestras, pues minimizan la fatiga del tcnico.
Las micropipetas son extremadamente tiles en los laboratorios de biotecnologa. Estas permiten medir con precisin
volmenes tan pequeos como 0.1 l hasta 1 ml. Estas requieren de unos pipeteadores especiales que deben
der tratados con mucho cuidado para evitar que se descalibren. Los pipeteadores vienen de distintos tipos. La mayora
pueden servir muestras individuales. Pero vienen los que pueden servir muestras mltiples, por medio de multicanales:
pipetas que sirven 8 o 12 muestras a la vez. Estas son muy tiles al hacer pruebas de ELISA, donde se practican diluciones
seriadas mltiples, o para preparar reacciones de varias muestras distintas a la vez. Se usan en conjunto con platos de fosas
mltiples.
Las puntas de micropipetas vienen con distintas caractersticas de acuerdo al uso que se les d. Vienen con punta ancha,
estrecha o aplanada, con o sin filtros contra aerosoles, estriles o sin esterilizar y pueden ser esterilizadas en autoclave.
Aparatos de electroforesis
Estos son unas cmaras que contienen un circuito elctrico expuesto a un lquido electroltico, llamado amortiguador. El
aparato se usa para separar mezclas de molculas grandes de acuerdo a su carga y/o su tamao. La tcnica consiste en
inocular la muestra en un medio semislido, la fase estacionaria, que se somete a un campo elctrico, en una cmara donde
en un extremo se encuentra un filamento que acta como polo positivo, y en el extremo opuesto hay otro filamento formando
el polo negativo. Las molculas con cargas netas positivas se movern hacia el
polo negativo y las de carga negativa se irn hacia el polo positivo. Luego de la
muestra ser tratada apropiadamente dependiendo del tipo de electroforesis, las
molculas que viajen hacia uno de los polos se separarn por tamao, viajando
ms en la fase estacionaria las molculas ms pequeas. El tipo y
concentracin de la fase estacionaria depender del tipo de molculas que nos
interesa correr.
Centrfugas
Son muy tiles para precipitar clulas y molculas. Vienen en distintos tamaos y con
distintas capacidades en el manejo de muestras. Este aparato somete la muestra a fuerzas
de aceleracin que obligan a las molculas a concentrarse en el fondo del envase utilizado,
separndolas del medio en que se encuentran. Incluso, bajo ciertos mtodos se puede
generar un gradiente de concentraciones dentro del mismo tubo, separando distintas
molculas a distintos niveles o fases dentro del tubo. Con ayuda de jeringas, se puede
perforar la pared del tubo y extraer del mismo slo aquella fase donde se encuentren las
molculas de inters.
Entre las centrfugas que usaremos durante el semestre estn la centrfuga refrigerada,
que nos va a permitir separar clulas de los medios de cultivo. El rotor de esta centrifuga
puede sostener tubos de 50 ml, pero puede ser intercambiado por rotores que sostienen
botellas de cultivo.
La micro centrfuga es una versin ms pequea de la descrita anteriormente. Es compacta, se coloca sobre la mesa y
procesa muestras de hasta 2 ml. Es muy til para precipitar ADN y otras sustancias que se trabajan en volmenes pequeos.
Equipo de cromatografa
En
de
de
de
de
El solvente sube por capilaridad por la superficie impregnada con las muestras. Los componentes de la mezcla comenzarn a
migrar, segn el grado de afinidad que tengan por el solvente y/o la fase estacionaria. Mientras ms afn sea algn
componente a la fase mvil, ms rpido se mover y ms lejos llegar en su migracin sobre la fase estacionaria.
En la cromatografa de columna se pueden separar volmenes ms grandes de muestras. Tambin tiene una fase
estacionaria que consiste de un tubo conteniendo un material que separa la mezcla analizada. Los amortiguadores que se
usan para lavar la columna constituyen la fase mvil. El empaque de las columnas puede separar molculas por su tamao,
por sus interacciones inicas o por interacciones hidrofbicas. El tipo de empaque a usar depender de las propiedades de la
muestra.
Existen otros tipos de cromatografa ms sofisticados, que se usan en laboratorios de investigacin y en procesos de
manufactura en varios tipos de industrias. Nosotros nos limitaremos a los descritos anteriormente.
Microscopio
El microscopio
es un instrumento que permite observar
objetos que son demasiado pequeos para ser vistos a simple vista. El tipo ms comn y el primero que se invent es
el microscopio ptico. Se trata de un instrumento ptico que contiene dos o ms lentes que permiten obtener
una imagen aumentada del objeto y que funciona por refraccin. La ciencia que investiga los objetos pequeos utilizando este
instrumento se llama microscopa.
La pureza de los reactivos es fundamental para la exactitud que se obtiene en cualquier anlisis. En el laboratorio se dispone
de distintos tipos de reactivos (slidos, lquidos o disoluciones preparadas) tal y como se comercializan.
Reactivos slidos
Reactivos lquidos
Disoluciones preparadas
En general, las casas comerciales ofrecen un mismo producto con varias calidades. Es importante que cuando
seleccionemos un reactivo su calidad est en concordancia con el uso que se le va a dar.
Clasificacin
En el laboratorio de anlisis se utilizan reactivos de calidad analtica que se producen comercialmente con un alto grado de
pureza. En las etiquetas de los frascos se relacionan los lmites mximos de impurezas permitidas por las especificaciones
para la calidad del reactivo o los resultados del anlisis para las distintas impurezas. Dentro de los reactivos analticos pueden
distinguirse tres calidades distintas:
Reactivos para anlisis (PA): Son aquellos cuyo contenido en impurezas no rebasa el nmero mnimo de sustancias
determinables por el mtodo que se utilice.
Reactivos pursimos: Son reactivos con un mayor grado de pureza que los reactivos "para anlisis" .
Reactivos especiales: Son reactivos con calidades especficas para algunas tcnicas analticas, como cromatografa lquida
(HPLC), espectrofotometra (UV)
Hay reactivos que tienen caractersticas y usos especficos como los reactivos calidad patrn primario, que se emplean en
las tcnicas volumtricas, o los patrones de referencia.
Todo envase de reactivos debe llevar obligatoriamente, de manera legible e indeleble, una etiqueta bien visible que contenga
las distintas indicaciones que se muestran en las siguientes figuras:
Los pictogramas, las frases R de RIESGO y las frases S de SEGURIDAD aparecen en las etiquetas del producto informando
sobre la peligrosidad del mismo
PICTOGRAMAS DE PELIGROSIDAD