Practica No.

“Determinación cuantitativa de hidrocarburos aplicando la técnica de la cromatografía”

Objetivo: Lograr hacer una cromatografía en papel y columna

Introducción:

La cromatografía es un método químico que permite separar los componentes que integran
una mezcla, distribuyéndolos en dos fases. Una de las fases es estacionaria (sus elementos se
encuentran en reposo), mientras que la otra es móvil (sus elementos se mueven). Esta técnica
posibilita la separación de los componentes para su posterior análisis. A nivel general, lo que
se hace es mover la mezcla sobre un soporte, haciendo que las sustancias se ubiquen en
distintos lugares. Las sustancias que se mantienen en movimiento forman la fase móvil,
mientras que aquellas que se van separando integran la fase estacionaria.

❖ Cromatografía en papel: Se constituye simplemente por una tira de papel filtro donde
se depositan unas pocas gotas de la muestra y se evapora disolvente. Una vez secado,
las sustancias.
❖ Cromatografía en columna: La fase móvil contiene los compuestos disueltos que, poco
a poco, saldrán de la columna cromatográfica y se recogerán en fracciones.
❖ Cromatografía en placa fina:A medida que la mezcla de disolventes asciende, se
produce un reparto diferencial de los componentes de la mezcla.
❖ Cromatografía de partición: La separación de los componentes de la mezcla se produce
por diferencias de polaridades entre la fase estacionaria y la móvil, siendo las dos fases
líquidas inmiscibles.
❖ Cromatografía de adsorción: La fase estacionaria es un sólido y la móvil es líquido y
puede estar formada por un solvente o una mezcla de ellos. Algunos componentes de
la mezcla se retendrán con mayor fuerza que otros para proceder a separar los
componentes de la muestra.
❖ Cromatografía de intercambio iónico: Dentro de esta clase de cromatografía de
intercambio iónico, podemos distinguir entre las de intercambio catiónico y las de
intercambio aniónico.
❖ Cromatografía de exclusión molecular: La base de este tipo de cromatografía es la de
separar los componentes según su tamaño molecular en estado disuelto.
❖ Cromatografía de gases: La muestra se volatiliza y se inyecta en la cabeza de un
mechero de una columna cromatográfica. La elución se produce por el flujo de una
fase móvil de gas inerte.

El análisis cuantitativo empleando cromatografía de gases se basa en la comparación del área

o altura de los picos del analito en la muestra con el área o altura de los picos de estándares de
concentración conocida de esta sustancia. Para la calibración el método más sencillo es
preparar disoluciones patrón de diferente concentración, obtener los cromatogramas y
representar altura o ara de pico.

Instrumentales:

❖ 1 mortero con pistilo

❖ 1 piseta
❖ 1 pipeta graduada de 10ml
❖ 1 pipeta graduada de 1ml
 ❖ 1 papel filtro
❖ 3 vasos de precipitado de 50ml
❖ 1 jeringa se succión
❖ 1 bureta graduada de 25ml
❖ 1 vasos de precipitado de 100ml
❖ 2 vasos de precipitado de 250ml
❖ 1 soporte universal
❖ 1 pinzas para bureta

Reactivos:

❖ Muestras
• Hexano
• Tolueno
• Benzeno
❖ Reactantes
❖ No se necesitaran

Equipos:

❖ Campana de extracción

Materiales traídos de casa:

❖ Hojas verdes
❖ Plumas

EPP ( Equipo de Protección Personal):

❖ Bata de laboratorio
❖ Guantes de nitrilo
❖ Botas de seguridad
❖ Lentes de protección

Procedimientos:

A) Lavar y secar bien el instrumental

B) Preparar el sistema para el uso de la bureta
(Dibujo)
1. Preparación de solvente
• Tomar muestras de tres hidrocarburos: hexano, tolueno y benceno
• Poner la cantidad deseada de cada compuesto en el mismo vaso de
precipitado de 100ml
• Agitar un poco
2. Cromatografía en papel para hoja verde y tinta
• Lava las hojas verdes que se tienen de muestras y trocéalas.
• Coloca los fragmentos en el mortero, añade la mezcka de los
hidrocarburos y machaca bien las hojas hasta que se decoloren.
• Decantar lo que se trituro
• El líquido obtenido se pondrá en un vaso de precipitado de 250ml y se
agregara un poco más de la solución de hidrocarburos
• Cortar en dos nuestro papel filtro
 •Una parte del papel se deberá poner en el vaso con lo el líquido de las
hojas y se asegura que lleguen al fondo
• Deja la tira de papel dentro del vaso y esperar mayor tiempo posible,
esto puede ser con ayuda de un lápiz
• Con la tinta se repite casi lo mismo, la diferencia es que la tinta se
pondrá directa en el papel y este se pondrá en un vaso de precipitado
con la solución de hidromasaje
• Nos aseguramos que este también toque el fondo, pero que la
solución de hidrocarburos no toque la muestra de tinta
• Y también se deja reposando
• Una vez terminados estos procedimientos se llevara ambos papeles a
la estufa de secado tanto tiempo como se pueda
3. Cromatografía en columna
• En una pipeta graduada de 25ml, revisar que está sea desmontable
de la parte de la llave (algunas son de rosca y otras solo se tiene que
jalar para desmontar)
• Se meterá un groso de algodón (solo poco , esto es para que
obstruya la salida del líquido)
• Se depositara encima del algodón el almidón o la arena,
aproximadamente unos 10cm
• Terminando esto, la mezcla de hidrocarburos antes hecha, se vaciara
y se abrirá la llave se pasó , poner un vaso de precipitado de 50ml
debajo , dejar reposar y ver si sale alguna gota , se dejará para que la
mezcla se separe
• Si le logra observar una separación, el líquido se debe dejar caer en
un vaso hasta que se vea que se termine, y el segundo en caer se
debe poner en otro vaso, lo mismos para el último
4. Cromatografía de gases
• Se toma la muestra y se debe poner en el inyector del equipo
• Inyectar la muestra y esperar a que el cromatógrafo muestre el análisis
(Nota: Este procedimiento se hará de manera teórica debido a que el
equipo no funciona actualmente)