UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO

VILLARREAL

FACULTAD DE OCEANOGRAFIA PESQUERIA,

CIENCIAS ALIMENTARIAS Y ACUICULTURA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA

ALIMENTARIA

“AÑO DE LA UNIDAD, LA PAZ Y EL DESARROLLO”

INFORME DE PRACTICA N° 5
Título: Cromatografía
Asignatura:
QUIMICA ORGANICA PRACTICA
Docente:
Ing. Gamero Collado, Betty Eliseni
Apellidos y Nombres:

● MONDRAGON FERREYRA, RODRIGO ABRAHAM

● HUAMAN MALPARTIDA SALOME BRUNELLA

● CARBAJAL OVALLE KAREN YAJAIDA

● LOAYZA HERRERA XIOMARA YADHIRA

Semestre y Sección:
2do semestre “B”

LIMA – 2023
I. OBJETIVOS:

• Aplicar la técnica de cromatografía como técnica de separación y como criterio

parcial de identificación de colorantes.
• Separar una mezcla de colorantes mediante una cromatografía en columna

II.MARCO TEÓRICO:

La cromatografía es una técnica que permite separar los componentes de una mezcla. Esta
separación se logra utilizando un sistema bifásico: fase estacionaria donde se retienen los
compuestos a separar y fase móvil que desplaza de forma diferencial los compuestos a través
de la fase estacionara.

La mezcla a separar se deposita sobre la fase estacionaria y la fase móvil atraviesa el sistema
desplazando los componentes de la mezcla a distintas velocidades que dependen de la
afinidad de los mismos por cada una de las fases. Se denomina elución a la migración de los
componentes de la mezcla a lo largo de la fase estacionaria impulsados por la móvil.

Esta técnica se puede clasificar en: Cromatografía sobre papel, en capa fina (c.c.f.), en
columna (c.c.), en fase gaseosa (c.g.), Cromatografía de alta performance (HPLC) de acuerdo
a la técnica empleada y la naturaleza de las fases.
IV. EXPERIMENTACIÓN:

4.1. Materiales , reactivo y equipos:

• 2 vaso 100 ml

• Pipeta de 5 ml

• Probeta de 100 ml

• Bagueta

• Espátula

• Tubos de ensayo

• capilares

• Bombilla

• Papel filtro

• gradilla

• Balanza analítica

• Mechero
• Luna de reloj

• Agua destilada

• Acetona (propanona)

• Etanol

• Propanol

• Anaranjado de metilo

• Azul de metileno

• Caramelos de colores

• Mortero y pilón

4.2. PROCEDIMIENTO:

Actividad 1 : Cromatografía en papel de una mezcla de sustancias indicadoras de

pH.
 Preparación de la muestra:
Mezclar un volumen igual (5 mL) de azul de metileno y naranja de metilo (Dejar
reposar)
 Preparación de la fase fija o estacionaria
1. Corte el papel de filtro en tiras de 3 x 10 cm (según la cámara cromatográfica
a utilizar)

2. Mida 1,5 cm desde uno de los extremos de la tira de papel, trace una línea
suave con lápiz (línea de partida), no use lapicero.
 3. De la línea trazada, mida 12 cm hacia el otro extremo y trace una línea
paralela a la anterior.

4. En la parte superior de la tira anote los datos importantes como: Nombre del
alumno, muestra, solvente utilizado, fecha.

5. Sobre la línea de partida, señale el punto medio o lugar de siembra.

 Preparación de la cámara cromatográfica:

6. Mezclar (1-propanol – acetona – Agua en estas relaciones 4:1:1) o el solvente

indicado.

7. En un tubo de ensayo de ensayo de 2 x 15 cm aproximadamente colocar el

solvente de desarrollo y tapar.

 Sembrado de la muestra:

8. En uno de los puntos medios y con la ayuda de un capilar, deposite una gota
de la mezcla a analizar (azul de metileno y anaranjado de metilo). Espere que
cada gota seque antes de sembrar la siguiente. Repita por 4 veces
 9. Deje unos minutos para que se evapore el solvente de siembra (puede ayudarse
con corriente de aire) y luego introduzca la tira en la cámara (tubo de ensayo).

 Desarrollo de la cromatografía:

10. La zona de siembra no debe quedar sumergida en el solvente. Tapar el tubo y

no mover hasta que haya terminado el desarrollo.
11. Cuando la fase móvil haya ascendido unos 8-10 cm, retire el papel, marque el
frente del solvente (con lápiz) y déjelo secar.

12. Realice la misma experiencia para sólo uno de los colorantes (cualquiera) en
solución.
  Determinación de los Rf:

13. Extraiga el papel de filtro de la cámara y marque con una línea hasta donde
corrió el disolvente, deje secar. Con una regla mida la distancia por el
disolvente y cada una de las manchas. Observe y compare las 2 muestras
sembradas. Calcule los Rf. Según la formula indicada anteriormente.

V. RESULTADOS:

VI. CONCLUSIONES:

VII. DISCUSIÓN:

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: