Dpto.

Ciencia y Tecnología
Semestre: __I verano____

Num. Lab #: _______

Fecha: MM/DD/YEAR

CROMATOGRAFIA DE PAPEL

Grupo # : ______
1._________
2. _________
3._________

CHEM 1111 CRN-_____

Día y Hora: ______
Prof. D. Alers
I. OBJETIVOS:
Familiarizarnos con la técnica de cromatografía de papel como medio de
separar compuestos químicos de una mezcla.

II. MATERIALES:

A. Materiales y Equipos

1. Papel de cromatografía, papel blanco de computadora o papel de filtro

de café (15 x 2 cm3).
2. Vaso plástico pequeño de 207 mL,
3. Tijera
4. Cuatro pedazos de papel absorbente.
5. Cinta adhesiva transparente
6. Regla
7. Vaso de medicina, gotero o jeringa (5 o 10 mL).

B. Reactivo

1. Alcohol/Acetona (1:1)
2. Tinta de bolígrafo
3. Lápiz de colores

III. TEORIA
La cromatografía es una técnica usada en química para separar los
componentes de una mezcla. es un método físico de separación para la
caracterización de mezclas complejas cuyo objetivo es separar los distintos
componentes, la cual tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia. Es
usada ampliamente en laboratorios farmacéuticos, químicos e investigación.
La técnica consiste en separar los componentes de una mezcla usando un
disolvente liquido compatible con la muestra a separar. Consiste en dos
fases; papel que será la fase estacionaria y la móvil es el liquido o solvente
que se utiliza (en este caso será alcohol y acetona 1:1). Comprende un
conjunto de técnicas que tienen como finalidad la separación de mezclas
basándose en la diferente capacidad de interacción de cada componente en
otra sustancia.
Términos empleados en cromatografía
 Analito es la sustancia que se va a separar durante la cromatografía.
 Fase móvil es la fase que se mueve en una dirección definida. Puede ser
un líquido (cromatografía de líquidos o CEC). un gas (cromatografía de
gases) o un fluido supercrítico (cromatografía de fluidos supercríticos).
La muestra que se está separando/analizando (formada de analito/s y el
disolvente) se inyecta en la fase móvil que se mueve a través de la
columna. En el caso de la cromatografía líquida de alta
resolución, HPLC, la fase móvil es un disolvente no polar como
el hexano (fase normal) o bien algún disolvente polar (cromatografía de
fase reversa).
 Fase estacionaria es la sustancia que está fija en una posición durante la
cromatografía. Un ejemplo es la capa de gel de sílice en la cromatografía
en capa fina.
 Cromatografía analítica se emplea para determinar la existencia y
posiblemente también la concentración de un analito en una muestra.
 Fase enlazada es una fase estacionaria que se une de forma covalente a
las partículas de soporte o a las paredes internas de la columna.
 Cromatograma es el resultado gráfico de la cromatografía. En el caso de
separación óptima, los diferentes picos o manchas del cromatograma se
corresponden a los componentes de la mezcla separada.

Cromatograma con picos no resueltos (separados).

 Cromatograma con dos picos resueltos.

En el eje X se representa el tiempo de retención, y en el eje Y una señal

(obtenida, por ejemplo, a partir de un espectrofotómetro, un espectrómetro
de masas o cualquier otro de los diversos detectores) correspondiente a la
respuesta creada por los diferentes analitos existentes en la muestra. En el
caso de un sistema óptimo, la señal es proporcional a la concentración del
analito específico separado.
 Cromatógrafo es el equipo que permite una separación
sofisticada. Por ejemplo, un cromatógrafo de gases o un
cromatógrafo de líquidos.
 Cromatografía es el método físico de separación en el cual
los componentes que se van a separar se distribuyen entre
dos fases, una de las cuales es estacionaria (fase
estacionaria) mientras la otra (la fase móvil) se mueve en
una dirección definida.
 Eluyente es la fase móvil que atraviesa la columna.
 Serie eluotrópica es una lista de disolventes clasificados
según su poder de dilución.
 Fase inmovilizada es una fase estacionaria que está
inmovilizada sobre partículas de soporte, o en la pared
interior del tubo contenedor o columna.
Cromatograma correspondiente a una cromatografía líquida en fase
reversa para compuestos fenólicos
 Cromatografía preparativa se usa para purificar suficiente
cantidad de sustancia para un uso posterior, más que para análisis.
 Tiempo de retención es el tiempo característico que tarda un
analito particular en pasar a través del sistema (desde la columna
de entrada hasta el detector) bajo las condiciones fijadas. Véase
también: Índice de retención de Kovats
 Muestra es la materia que va a ser analizada en la cromatografía.
Puede consistir en un simple componente o una mezcla de varios.
Cuando la mezcla es tratada en el curso del análisis, la fase o fases
que contienen los analitos de interés es llamada
igualmente muestra mientras el resto de sustancias cuya
separación no resulta de interés es llamada residuo.
 Soluto es cada uno de los componentes de la muestra que va a ser
separado.
 Disolvente es toda sustancia capaz de solubilizar a otra,y
especialmente la fase móvil líquida en cromatografía de líquidos.
 Capacidad de carga Es la cantidad máxima de muestra que puede
ser separada en una sola carga.
 Capacidad de fraccionamiento Es el número máximo de
componentes que pueden ser separados en una sola operación.
 Selectividad Es la capacidad de poder discriminar y distinguir
entre dos componentes.
En la Cromatografía de papel se utiliza un papel absorbente
que permita separar la muestra a medida que entra en contacto con
el disolvente, como se ilustra a continuación. La cromatografía clásica
 es la de clorofila de las plantas, donde se identifican los componentes
químicos de los pigmentos que le dan color verde (clorofila) y en las
flores a las plantas.

Por otro lado, también se realizan cromatografía usando tinta

o tintes vegetales. Se usa la misma técnica donde se coloca la
muestra en el papel absorbente y se espera que ocurra la separación,
como se ilustra a continuación.

CALCULE EL Rf (FACTOR DE CORRELACION) DE CADA BANDA DE LA

CROMATOGRAMA

El cromatograma representa las bandas o manchas que se originan del

recorrido de cada muestra. Sin embargo, es necesario medir matemáticamente
las distancias recorridas para calcular el factor de Correlación o Rf. La ecuación
a usar es la siguiente:

X distancia que se mueve el componente

Rf = ( Y distancia que se mueve el disolvente ¿
 Fig. 1.0 Calculo del Rf

La X se identifica en el cromatograma como LA ZONA CLARA y la zona

donde termina el cromatograma forma parte del conjunto total de trazado. Es decir,
se mide todo el trazado desde su punto de origen, como se ilustra en el ejemplo
dado. Las medidas se hacen en cm, pero como son iguales cancelan. El resultado
final NO tiene unidades.

IV. PROCEDIMIENTO:

***Adjunto videos simulados virtuales que les servirán de guía.

(142) CROMATOGRAFÍA EN PAPEL - YouTube

(142) Cromatografía en papel - YouTube

https://www.youtube.com/watch?v=ASHaCoswGtQ

https://www.youtube.com/watch?v=sndgYGGlJMs
 Fig. 2.0
1. Cortar un pedazo de papel de 12 x 4 cm
2. Marcar un punto con el bolígrafo aproximadamente a 1.0 cm en uno de
los terminales del papel, según se ilustra en la Fig. 2.0.
3. Anadir 1.0 mL de la mezcla de alcohol/acetona-1:1, en un vaso plástico.
4. Dejarlo por espacio de 15-20 min hasta que la macha en el papel se
observe haya dejado de subir en el papel.
5. Luego sacarlo del vaso y dejarlo secar.
 6. Montarlo en un papel blanco y pegar los extremos con cinta adhesiva.
7. Medir X y Y para realizar el cálculo de Rf. Las mediciones se harán para
cada trazado individual razón por la cual debe identificarlos por
separado.

V. DATOS

A. CROMATOGRAMA

(COLOQUE AQUÍ EL RESULTADO DE LA CROMATOGRAFIA)

(USE COMO GUIA EL DOCUMENTO QUE SE ADJUNTA)

B. CALCULOS

CALCULE EL Rf (FACTOR DE CORRELACION) DE CADA BANDA DEL

CROMATOGRAMA SEGÚN SE ILUSTRA EN LA Fig. 1.0.

VI. CONCLUSION:
Cualitativa y Cuantitativa
Basado en la interpretación indique si la tinta era de buena calidad. Escriba
una oración completa. Recuerde si en la mancha se observan cambios de
colores indique cuales eran estos y mencione la calidad de la tinta (uno o
varios colores era de mala calidad, si el color se mantuvo y no cambio era de
buena calidad). Además indique el cálculo del Rf de cada mancha en el
cromatograma.

VII. APLIACIONES:
Menciones 3 usos de la cromatografía.

VIII. BIBLIOGRAFIA:

Copie la(s) direcciones electrónicas que consulto.

IX. APNEDICES
EXPLIQUE O RESUMA BREVEMENTE EL SIGUIENTE VIDEO
https://www.youtube.com/watch?v=iC4tfkbF5hQ