UPT-PIB-01/ANI-

Código: Página 1 de 2
CV
Fecha Rev.: 04/05/2017 Núm. Rev.: 1
Jorge Cruz Huerta
Elaboró:
Ericka Santacruz Juárez
Revisó: Academia de Biotecnología
Director de Programa Educativo
Aprobó:
Dr. Saúl Tlecuitl Beristain

“Separación de Aminoácidos por Cromatografía de Capa Fina”

1. Objetivo y Alcance
1.1 Objetivo.
El alumno será capaz de separar Aminoácidos de una mezcla mediante cromatografía en capa
fina.

1.2 Alcance.
“Esta práctica aplica para su realización en el laboratorio Pesado del PE de Ingeniería en
Biotecnología de la Universidad Politécnica de Tlaxcala”.

2. Seguridad y declaraciones
2.1 Indicaciones de seguridad
1 Uso de bata, lentes, guantes y zapatos de seguridad.
2 Las especificadas en el reglamento de seguridad.

2.2 Términos específicos

Cromatografía

2.3 Vigencia
Mayo-Agosto 2017

3. Desarrollo de la práctica
3.1 Equipo necesario para el desarrollo de la práctica
1 Papel filtro 1 Vidrio de reloj grande
1 Vaso de pp de 500 mL Probeta de 50 mL
2 matraces volumétricos de 50 mL Papel Whatman Num. 1 ó 3
1 Espátula Papel parafilm
1 Vaso de pp de 50 mL
1 Vaso de pp de 100 mL
1 Pipeta pasteur
1 Piseta
3 Capilares
1 Tijeras

3.2 Sustancias o insumos

Cant. Reactivo Cant. Reactivo

Alcohol propilico Asparagina

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CV
Fecha Rev.: 04/05/2017 Núm. Rev.: 1
Jorge Cruz Huerta
Elaboró:
Ericka Santacruz Juárez
Revisó: Academia de Biotecnología
Director de Programa Educativo
Aprobó:
Dr. Saúl Tlecuitl Beristain

“Separación de Aminoácidos por Cromatografía de Capa Fina”

Aua destilada Cistina

Ninhidrina Acido Glutámico
Alanina Glicina
Arginina Leucina
Serina Lisina
Triptófano Metionina
Tirosina Sol`n problema de aminoacidos
Valina

3 3.3.1. Fase 1 de la Práctica: Preparación de los disolventes y

Revelador y Muestra de Aminoácidos
“Estudiante”
DISOLVENTE
Alcohol propílico ..................... 7 volumenes
Agua Destilada ..................... 1 volumen

REVELADOR
Ninhidrina …….……………….0.2 g
Agua Destilada………………. 100 mL

AMINOACIDOS
1% (p/v) en Agua Destilada

3.3.2 Fase 2 de la práctica: Realización de Cromatografía en

capa fina

1. Corte un trozo de placa cromatográfica que quepa en el interior

del vaso de precipitados.
2. Con un lápiz, trace una línea, 1 cm arriba del borde del papel.
3. Aplique 3 gotas de muestra a un cm de esquina derecha y
espere a que se seque.
4. Coloque la fase móvil en el interior del vaso de precipitados,
aproximadamente 1 cm.
5. Introduzca el papel y cubra el vaso con el vidrio de reloj.
6. Espere a que eluya el disolvente hasta 2 cm antes de llegar a
la parte superior. Posteriormente saque el papel de la cámara y
dejelo secar.

3.3.3. Fase 3 de la práctica: Revelado de la placa

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Fecha Rev.: 04/05/2017 Núm. Rev.: 1
Jorge Cruz Huerta
Elaboró:
Ericka Santacruz Juárez
Revisó: Academia de Biotecnología
Director de Programa Educativo
Aprobó:
Dr. Saúl Tlecuitl Beristain

“Separación de Aminoácidos por Cromatografía de Capa Fina”

Rociar la placa con una solución de ninhidrina

Secar y calentar suavemente con la secadora de pelo
Calcule el RF para cada uno de los componentes.

Cuestionario

1.- Explique cuál fue el mecanismo de separación cromatográfica

utilizado en esta práctica.

2.- Investigue y explique una aplicación diferente a la de la

práctica de TLC

4. Referencias

4.1) Documentos de referencia

Gary D., Christian. Química Analítica. Sexta edición, Mc Graw Hill. 2009.

5. Anexos
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6. Revisiones
No. Revisión Descripción
1 Revisión del documento.

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