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MANUAL DE PROCEDIMIENTO DE PRÁCTICAS
LABORATORIO DE CIENCIAS DE LA VIDA
PERIODO 63
CARRERA BIOTECNOLOGÍA
SEDE QUITO
4. Fotosíntesis
SEDE QUITO
PRACTICA N° 1
2. OBJETIVOS:
OBJETIVOS ESPECIFICOS:
3. MARCO TEÓRICO
Los tejidos vegetales son un conjunto de células que poseen la misma estructura y que
desempeñ an una determinada funció n, un grupo de células organizadas como una
unidad estructural y funcional. En una primera divisió n se clasifican en Meristemas
(tejidos indiferenciados cuyas células se dividen activamente) y Tejidos adultos. Estos
se clasifican segú n el nú mero de tipos celulares en Simples (con un só lo tipo de células)
y Complejos (con dos o má s tipos distintos de células) (Gó mez, 2014; Izco2004, Gabriel
y Galá n, 2002.).
De entre los tejidos adultos simples (Gó mez, 2014; Carmona, 2007; Izco2004):
Parénquimas: Formados por células isodiamétricas o alargadas, con vacuolas muy
desarrolladas y pared celular delgada. De acuerdo con la funció n que realizan se pueden
clasificar en: clorofílicos, de reserva de distintas sustancias o de agua o aeríferos.
De Sostén: Dan solidez y elasticidad a las plantas y está n formados por células en masa
compactas, con membranas engrosadas en parte (Colénquima) o totalmente
(Esclerénquima).
SEDE QUITO
4. RECURSOS UTILIZADOS
MATERIALES
CANTIDAD
DESCRIPCIÓN
Por curso Por grupo
Equipo de disecció n (tijera, pinzas, bisturí, aguja de disecció n) 10 1
Pisetas con agua destilada 10 1
Placas porta y cubreobjetos 50
Hojas Papel toalla 30 3
Goteros 10 1
Cajas petri 10 1
bandejas para tintura 3
Contenedor para desechar tinturas 1
Vidrio de reloj 10 1
REACTIVOS
CANTIDAD
DESCRIPCIÓN
POR CURSO POR GRUPO
Alcohol 2 atomizadores
Azul de metileno gotero
Violeta de genciana gotero
lugol gotero
Alcohol etílico gotero
glicerol gotero
EQUIPOS
CANTIDAD
DESCRIPCIÓN
POR CURSO POR GRUPO
Microscopio ó ptico 10 1
Estereomicroscopio 10 1
5. PROCEDIMIENTO
SEDE QUITO
1. SISTEMA FUNDAMENTAL
SEDE QUITO
1.3.1 Eslereidas
En pulpa disociada de Pyrus communis (pera), escoja
los grupos má s pequeñ os de esclereidas y vea
puntuaciones ramificadas. Observe la muestra
tinturada con safranina, bajo el microscopio.
Tome semillas de durazno (Prunus pérsica) o capulí
(Prunus serotina), y con un bisturí, desprenda
(raspar) finas capas de la superficie de los cuezcos de
estas semillas. Coloque en la placa portaobjetos con una gota de lugol y cubrir con el
cubreobjetos. Observar al microscopio e identificar las esclereidas presentes así
como su tipo.
1.3.2 Fibras
En Agave foucroydes (Penca) observe fibras en hoja disociada.
SEDE QUITO
ANEXOS.
NA
BIBLIOGRAFÍA
Carmona, T. 2007. Manual de Prá cticas de la experiencia educativa, Biología
Vegetal.
Gabriel y Galá n Moris, J. 2002. Biología Vegetal. 1era. Ed. Editorial Belisco.
Izco, Jesú s. 2004. Botá nica. McGraw- Hill / Interamericana de Españ a, S.A. 2da.
Ed. 1000 pp.
Gó mez, S. 2014. Laboratorio de Biología Vegetal. Disponible en:
http://www.ciens.ucv.ve:8080/generador/sites/labbiolvegetal/plantilla4/
index.htm
SEDE QUITO
PRACTICA N° 2
2. OBJETIVOS
OBJETIVOS ESPECIFICOS:
1. Observar y reconocer los tejidos del sistema dérmico
2. Observar y reconocer los tejidos del sistema vascular
3. MARCO TEÓRICO
Los tejidos vegetales son un conjunto de células que poseen la misma estructura y que
desempeñ an una determinada funció n, un grupo de células organizadas como una
unidad estructural y funcional. En una primera divisió n se clasifican en Meristemas
(tejidos indiferenciados cuyas células se dividen activamente) y Tejidos adultos. Estos
se clasifican segú n el nú mero de tipos celulares en Simples (con un só lo tipo de células)
y Complejos (con dos o má s tipos distintos de células) (Gó mez, 2014; Izco2004, Gabriel
y Galá n, 2002.).
De entre los tejidos adultos complejos (Gó mez, 2014; Carmona, 2007; Izco2004):
SEDE QUITO
ELEMENTOS DE LA EPIDERMIS
Células epidérmicas
Son células alargadas o isodiamétricas, y en corte transversal, rectangulares o elípticas,
pero por lo general la forma depende del ó rgano en que se la encuentre. Son
generalmente vivas y semejantes por su contenido a las células parenquimá ticas, ya que
poseen gran cantidad de vacuolas y los ó rganos normales de toda célula vegetal, con
carencia de cloroplastos, excepto en algunas plantas acuá ticas. Generalmente con pared
primaria, con algunas excepciones en semillas.
Las paredes celulares epidérmicas pueden variar en espesor segú n las distintas especies
y aú n dentro de una misma planta de acuerdo con las condiciones ambientales del
ó rgano estudiado. Normalmente la pared exterior es la má s gruesa, pudiendo, en
algunos casos, llegar a lignificarse. Bá sicamente se observan plasmodesmos en las
paredes interiores y anticlinales. También se los puede hallar en la pared externa,
llamá ndoselos ectodesmos, y por ellos saldrían al exterior la cutina, que formará la
cutícula, las ceras, resinas, etc.
Estomas: Son dispositivos formados por dos células oclusivas que poseen la capacidad
de sufrir un engrosamiento, dando libertad o no al ostiolo, que es un espacio que
Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:
Ivonne Vaca / Diana Calero Consejo de Carrera de Biotecnología
Fecha de Elaboración Fecha de Revisión Número de Resolución Consejo de
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MANUAL DE PROCEDIMIENTO DE PRÁCTICAS
LABORATORIO DE CIENCIAS DE LA VIDA
PERIODO 63
CARRERA BIOTECNOLOGÍA
SEDE QUITO
4. RECURSOS UTILIZADOS
MATERIALES
CANTIDAD
DESCRIPCIÓN
Por curso Por grupo
Equipo de disecció n (tijera, pinzas, bisturí, aguja de disecció n) 10 1
Pisetas con agua destilada 10 1
Placas porta y cubreobjetos 50
Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:
Ivonne Vaca / Diana Calero Consejo de Carrera de Biotecnología
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MANUAL DE PROCEDIMIENTO DE PRÁCTICAS
LABORATORIO DE CIENCIAS DE LA VIDA
PERIODO 63
CARRERA BIOTECNOLOGÍA
SEDE QUITO
REACTIVOS
CANTIDAD
DESCRIPCIÓN
POR CURSO POR GRUPO
Alcohol 2 atomizadores
Azul de metileno gotero
Violeta de genciana gotero
lugol gotero
safranina gotero
glicerol gotero
EQUIPOS
CANTIDAD
DESCRIPCIÓN
POR CURSO POR GRUPO
Microscopio ó ptico 10 1
Estereomicroscopio 10 1
5. PROCEDIMIENTO
2. SISTEMA DÉ RMICO
2.1. EPIDERMIS
2.1.1. Montaje para la observación de pelos epidérmicos (tricomas)
Tome una hoja, con el bisturí raspe la superficie que presente mayor abundancia
de pelos. Deposite el raspado sobre un portaobjetos con agua, cubra y observe.
Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:
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MANUAL DE PROCEDIMIENTO DE PRÁCTICAS
LABORATORIO DE CIENCIAS DE LA VIDA
PERIODO 63
CARRERA BIOTECNOLOGÍA
SEDE QUITO
Identifique los distintos tipos al microscopio. Nota: Limpiar cada vez el material
con el que se raspan los pelos, a fin de evitar posibles mezclas de tricomas de
distintas plantas. (zambo, magnolia, ortiga, kikuyo, coleus y geranio)
3. SISTEMA VASCULAR
3.1. XILEMA Y FLOEMA
3.1.1. Tejidos de conducción
Realizar varios cortes transversales de tallos de monocotiledó neas (cartucho) y
dicotiledó neas (rosa), previamente pigmentados y montarlos con agua en la
placa portaobjetos. Ubicar los haces vasculares e identificar su distribución y
los principales tipos celulares presentes a nivel de xilema y floema.
Tome hojas y cortes transversales de tallo, compá relas. Determine las
diferencias entre monocotiledó neas y dicotiledó neas (Nervaduras en hojas y
distribució n de haces vasculares en tallo).
SEDE QUITO
ANEXOS.
NA
BIBLIOGRAFÍA
Carmona, T. 2007. Manual de Prá cticas de la experiencia educativa, Biología
Vegetal.
Gabriel y Galá n Moris, J. 2002. Biología Vegetal. 1era. Ed. Editorial Belisco.
Izco, Jesú s. 2004. Botá nica. McGraw- Hill / Interamericana de Españ a, S.A. 2da.
Ed. 1000 pp.
SEDE QUITO
SEDE QUITO
PRACTICA N° 3
2. OBJETIVOS
OBJETIVOS ESPECIFICOS:
1. Observar cambios en el potencial hídrico y osmó tico, en tubérculos de papa, a
través de diferencias de densidad.
2. Determinar los efectos de varios factores ambientales sobre la velocidad de
transpiració n.
3. Ilustrar la velocidad de ascenso del agua y el flujo de agua en el xilema.
3. MARCO TEÓRICO
SEDE QUITO
evaporació n del agua desde las paredes de las células del mesó filo y 2) difusió n del
vapor de agua desde los espacios aéreos del interior de la planta hacia el exterior.
PRESIÓ N RADICAL: Es una de las teorías propuesta para explicar el ascenso del agua en
las plantas; consiste en el movimiento osmó tico del agua hacia la estela de la raíz debido
a que las células de ésta excretan iones activamente, que se acumulan en el espacio
apoplá stico generando una concentració n de solutos mayor que en la solució n del suelo;
se presenta entonces un diferencial de potencial osmó tico que hace posible la entrada de
agua a la raíz, lo que trae como resultado final una presió n hidrostá tica en las columnas
del xilema.
4. RECURSOS UTILIZADOS
MATERIALES
Cantidad
Descripción
Por curso Por grupo
Equipo de disecció n (tijera, pinzas, bisturí, aguja de
10 1
disecció n)
Pipeta 10 ml 10 1
Gradilla 10 1
Tubos de ensayo 140
Sacabocados 40 4
Probeta (graduada) de 100 ml o erlenmeyer 5 por cada grupo
(se formará n 3
15
grupos de
trabajo)
Pinzas largas (para tubo de ensayo) 20 2
Pisetas con agua destilada 10 1
Rollo Parafilm 1
Probeta graduada 1
Placas porta y cubreobjetos 20 2
Hojas de Papel toalla 30 3
Pipeta Pasteur o gotero 10 2
Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:
Ivonne Vaca / Diana Calero Consejo de Carrera de Biotecnología
Fecha de Elaboración Fecha de Revisión Número de Resolución Consejo de
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MANUAL DE PROCEDIMIENTO DE PRÁCTICAS
LABORATORIO DE CIENCIAS DE LA VIDA
PERIODO 63
CARRERA BIOTECNOLOGÍA
SEDE QUITO
Pipeta calibrada 30 3
Cajas petri 70 7
REACTIVOS
CANTIDAD
DESCRIPCIÓN
POR CURSO POR GRUPO
Solució n de Azul de metileno al 1% 20 ml 2 ml
Solució n de KCl (0,01 y 0,05N) 1000 ml 100 ml
Solució n de NaCl (saturada) 1000 ml 100 ml
Soluciones de sacarosa de molalidad creciemnte: 300 ml de c/u 20ml de c/u
0.0 (agua destilada), 0.05, 0.1, 0.2, 0.25, 0.3, 0.4,
0.5, 0.6 y 0.7 M
Solució n de fuscina á cida al 0.05 % 1250ml 250 ml para 2
grupos
EQUIPOS
CANTIDAD
DESCRIPCIÓN
POR CURSO POR GRUPO
Microscopio ó ptico 10 1
Bañ o María 2
Calefator / secador 2
balanzas 3 1 (para 3 grupos)
PROCEDIMIENTO
SEDE QUITO
1. Dividir los tubos de ensayo en dos series de 10 tubos cada una. (serie A y serie B).
2. Numerarlos del 1 al 10. Agregar a cada tubo de cada serie 10 ml de cada solució n de
sacarosa de concentració n molal creciente.
3. Serie A. Agregar a cada tubo una gota de la solució n concentrada de azul de metileno
tapar los tubos con parafilm y agitar.
5. Transcurrido este tiempo, retirar cuidadosamente los cilindros con las pinzas y secar
ÚNICAMENTE el exceso de líquido superficial con papel absorbente. Posteriormente,
pesar los cilindros.
SEDE QUITO
B. Transpiración
1. Para analizar el efecto de varios factores ambientales sobre la transpiració n como la
temperatura, la velocidad del viento y la intensidad luminosa hay que tomar 5 tallos de
apio poco pigmentados, 5 probetas (graduadas) que contienen 50 ml de una solució n de
fucsina á cida cada una.
SEDE QUITO
A. Potencial Hídrico
Sacarosa Peso inicial Peso final Incremento
(concentració n) relativo de
peso
0.0 (agua destilada)
0.10 M
0.20 M
0.25 M
0.30 M
0.40 M
0.50 M
0.60 M
0.70 M
B. TRANSPIRACIÓN
1. Desarrolle una tabla con los datos tomados cada 20 minutos, de cada condició n
ambiental, y sustente los resultados obtenidos.
2. Realizar un grá fico que represente el cambio de peso en gramos en cada una de las
condiciones estudiadas. Pesa las hojas de cada uno de los tallos y calcula la pérdida total
de agua por unidad de tiempo (gramos por segundo) en funció n del peso.
SEDE QUITO
ANEXOS.
NA
BIBLIOGRAFÍA
Carmona, T. 2007. Manual de Prá cticas de la experiencia educativa, Biología
Vegetal.
Gabriel y Galá n Moris, J. 2002. Biología Vegetal. 1era. Ed. Editorial Belisco.
Florez, V. Cruz, R. 2004. Guías de laboratorio de fisiología vegetal. Bogotá .
Universidad Nacional de Colombia.
Izco, Jesú s. 2004. Botá nica. McGraw- Hill / Interamericana de Españ a, S.A. 2da.
Ed. 1000 pp.
Gó mez, S. 2014. Laboratorio de Biología Vegetal. Disponible en:
http://www.ciens.ucv.ve:8080/generador/sites/labbiolvegetal/plantilla4/
index.htm
SEDE QUITO
PRACTICA N° 4
1. TEMA: Fotosíntesis
2. OBJETIVOS
OBJETIVOS ESPECIFICOS:
3. MARCO TEÓRICO
Todos los organismos que habitan la biosfera dependen de las plantas como fuente de
energía, debido a su capacidad de fijar dió xido de carbono por medio de la fotosíntesis
para constituir moléculas má s complejas. Entre estas moléculas encontramos la glucosa,
azú car simple precursor de compuestos orgá nicos. La capacidad de las plantas para fijar
carbono a través del proceso fotosintético depende en gran medida de la cantidad de
radiació n disponible.
SEDE QUITO
Plantas C3
Una planta "normal" —que no tiene adaptaciones fotosintéticas para reducir la
fotorrespiració n— se llama planta C3. El primer paso del ciclo de Calvin es la fijació n de
dió xido de carbono mediante la rubisco, y las plantas que utilizan solo este mecanismo
"está ndar" de fijació n de carbono se llaman plantas C3 el compuesto de tres carbonos
(3-PGA) que produce la reacció n. Casi 85% de las especies de plantas del planeta son C3,
como arroz, trigo, soya y todos los á rboles.
Plantas C4
En las plantas C4, las reacciones dependientes de la luz y el ciclo de Calvin está n
separadas físicamente: las reacciones dependientes de la luz se producen en las células
del mesó filo (tejido esponjoso en el centro de la hoja) y el ciclo de Calvin ocurre en
células especiales alrededor de las venas de la hoja. Estas células se llaman células del
haz vascular.
Un ejemplo de la fotosíntesis C4 en acció n: Primero, CO2 atmosférico se fija en las
células del mesó filo para formar un á cido orgá nico simple de 4 carbonos (oxaloacetato).
Este paso se lleva a cabo mediante una enzima no rubisco, PEP carboxilasa, que no
tiende a unirse al O2. Después, el oxaloacetato se convierte en una molécula similar,
malato, que puede transportarse hacia las células del haz vascular. Dentro de estas, el
SEDE QUITO
malato se descompone y libera una molécula de CO2. Luego, la rubisco fija el CO2 y lo
convierte en azú cares a través del ciclo de Calvin, exactamente como en la
fotosíntesis C3.
Este proceso tiene su precio energético: se debe gastar ATP para que la molécula de tres
carbonos “ferry” regrese a la célula del haz vascular y quede lista para recoger otra
molécula de CO2 atmosférico. Sin embargo, dado que las células del mesó filo
constantemente bombean CO2 hacia las células del haz vascular vecinas en forma de
malato, siempre hay una alta concentració n de CO2 en comparació n con O2 alrededor de
la rubisco. Esta estrategia reduce al mínimo la fotorrespiració n.
La vía C4 se utiliza en cerca del 3%, de todas las plantas vasculares; algunos ejemplos
son cañ a de azú car y maíz. Las plantas C4 son comunes en há bitats cá lidos, pero son
menos abundantes en zonas má s frescas. En condiciones cá lidas, los beneficios de una
menor fotorrespiració n probablemente superan el costo en ATP de pasar CO2 de la
célula del mesó filo a las células del haz vascular.
Plantas CAM
Algunas plantas adaptadas a ambientes secos, como las cactá ceas y piñ as, utilizan la vía
del metabolismo ácido de las crasuláceas (CAM) para reducir al mínimo la
fotorrespiració n. Este nombre proviene de la familia de las plantas crasulá ceas en las
cuales los científicos descubrieron por primera vez esta vía.
En vez de separar las reacciones dependientes de la luz y el uso de CO2 en el ciclo de
Calvin en el espacio, las plantas CAM separan estos procesos en el tiempo. Por la noche,
abren sus estomas para que el CO2 se difunda en las hojas. Este CO2 se fija en el
oxaloacetato mediante la PEP carboxilasa (el mismo paso que usan las plantas C4), que
luego se convierte en malato o un á cido orgá nico de otro tipo.
El á cido orgá nico se almacena dentro de vacuolas hasta el día siguiente. Durante el día,
las plantas CAM no abren sus estomas, pero todavía pueden llevar a cabo la fotosíntesis.
Eso se debe a que los á cidos orgá nicos se transportan fuera de las vacuolas y se
descomponen para liberar CO2, que entra en el ciclo de Calvin. Esta liberació n
controlada mantiene una alta concentració n de CO2 alrededor de la rubisco.
SEDE QUITO
La vía CAM necesita ATP en varios pasos (no se muestran), así que, al igual que la
fotosíntesis C4 no es un "regalo" energético. Sin embargo, las especies de plantas que
usan la fotosíntesis CAM no solo evitan la fotorrespiració n, sino que también usan el
agua de forma muy eficiente. Sus estomas solo se abren por la noche, cuando la
humedad tiende a subir y la temperatura a bajar, y ambos factores reducen la pérdida de
agua de las hojas. Las plantas CAM suelen predominar en zonas muy cá lidas y secas,
como los desiertos.
4. RECURSOS UTILIZADOS
MATERIALES
CANTIDAD
DESCRIPCION POR CURSO POR GRUPO
Mortero y pistilo 10 1
Probeta (100 ml) 10 1
Embudo de decantació n 10 1
Pipeta (20 ml) 20 2
Cubeta cromatográ fica 1
Soporte universal 10 1
Erlenmeyer 10 1
Pinzas para sostener el embudo al soporte universal 10 1
Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:
Ivonne Vaca / Diana Calero Consejo de Carrera de Biotecnología
Fecha de Elaboración Fecha de Revisión Número de Resolución Consejo de
20 de marzo del 2018 Carrera:
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MANUAL DE PROCEDIMIENTO DE PRÁCTICAS
LABORATORIO DE CIENCIAS DE LA VIDA
PERIODO 63
CARRERA BIOTECNOLOGÍA
SEDE QUITO
REACTIVOS
CANTIDAD
DESCRIPCION
POR CURSO POR GRUPO
acetona al 80% 300 ml 30 ml
É ter de petró leo 150 ml 15 ml
Carbonato de calcio 1.0 g 0.1 g
Cloruro de sodio (10%) 1200 ml 120 ml
Tetracloruro de carbono (fase mó vil) 60 ml
SAFRANINA GOTERO
ETANOL AL 70% PICETA
MEZCLA AGUA-GLICERINA (1:3) 20 ml
Agua destilada 700 mL
Alcohol etílico 500 mL
Lugol
EQUIPOS
SEDE QUITO
CANTIDAD
DESCRIPCIÓN
POR CURSO POR GRUPO
Balanza 3 1 para 3 grupos
Lá mpara UV 1
MICROSCOPIO Ó PTICO 10 1
ESPETEROMICROSCOPIO 10 1
5. PROCEDIMIENTO
SEDE QUITO
almacenamiento gruesos y con mucílagos, los tejidos fotosintéticos (mesó filo) son
delgados y externos.
SEDE QUITO
SEDE QUITO
Apunte los resultados en una tabla para convertir la tramitancia en densidad ó ptica o
absorció n. Consulte la tabla de conversió n (tabla 3).
D. Cromatografía en papel
Prepare una tira de papel cromatográ fico de 15x4 cm, aplique la muestra en forma
de gota y realice la corrida con tetracloruro de carbono como fase mó vil en una
cubeta cromatográ fica.
E. Cantidad de clorofila
Calibre el fotocolorímetro utilizando acetona al 80% como blanco de calibració n.
Tome la densidad ó ptica del extracto de clorofila con el fotocolorímetro, ajustando el
aparato a longitudes de onda entre 663 y 645 nm para cada medida. Si el extracto
está muy concentrado, haga una dilució n 1:10 con acetona al 80%.
Donde:
D = densidad ó ptica
V =volumen del extracto utilizado en la determinació n de la densidad ó ptica
W = masa de material inicial (3 g de tejido foliar)
Primera sesión
A. Aplicación del tratamiento a la planta de geranio: (por la duración del proceso,
esta parte se realizará como PREPRÁCTICA)
SEDE QUITO
1. A la planta de geranio, se le cubrirá n las hojas (haz y envés) con papel aluminio,
cubriendo SOLAMENTE la mitad de la hoja. Sujetar con un clip el aluminio puesto en
cada una de las hojas.
2. Colocar la planta en condiciones de luz durante 7 días.
Segunda sesión
Metodología Control positivo (método de detección de almidón):
1. Colocar en un vaso de precipitados de 100 ml, una cucharada pequeñ a de fécula de
maíz (almidó n de maíz).
2. Adicionar agua destilada y agitar hasta que se disuelva la fécula de maíz.
3. Agregar 5 gotas de lugol.
4. Observar el color que toma la muestra y anotar.
SEDE QUITO
- Presente los cá lculos de las cantidades de clorofila (a, b y total) en mg/g de tejido.
- Haga un grá fico del espectro de absorció n de la clorofila, colocando las lecturas de
densidad ó ptica sobre las ordenadas y las longitudes de onda sobre las abscisas.
- Compare la grá fica obtenida con la del espectro de absorció n de la clorofila que se
encuentra en los libros, tenga en cuenta el solvente utilizado. Por qué se utilizó acetona
al 80%?.
SEDE QUITO
- Calcule la tasa de flujo (Rf) de los pigmentos separados a partir del punto de aplicació n
de la muestra.
- Discutir los resultados obtenidos con base al cambio de coloració n observado en las
hojas de geranio.
BIBLIOGRAFÍA
Carmona, T. 2007. Manual de Prá cticas de la experiencia educativa, Biología Vegetal.
Díaz de Leó n, F. Manual de Laboratorio de Fisiología y Bioquímica Vegetal. Universidad
Autó noma Metropolitana.
Gabriel y Galá n Moris, J. 2002. Biología Vegetal. 1era. Ed. Editorial Belisco.
Gó mez, S. 2014. Laboratorio de Biología Vegetal. Disponible en:
http://www.ciens.ucv.ve:8080/generador/sites/labbiolvegetal/plantilla4/
index.htmManual de prá cticas
SEDE QUITO
ANEXOS.
Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:
Ivonne Vaca / Diana Calero Consejo de Carrera de Biotecnología
Fecha de Elaboración Fecha de Revisión Número de Resolución Consejo de
20 de marzo del 2018 Carrera:
Página 1 de
REVISION 2.0
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MANUAL DE PROCEDIMIENTO DE PRÁCTICAS
LABORATORIO DE CIENCIAS DE LA VIDA
PERIODO 63
CARRERA BIOTECNOLOGÍA
SEDE QUITO
PRACTICA N° 5
2. OBJETIVOS
OBJETIVOS ESPECIFICOS:
4. MARCO TEÓRICO
SEDE QUITO
AUXINAS
El á cido indol-3-acético (AIA) es la principal auxina en la mayoría de las plantas. Algunos
compuestos precursores de AIA, como el indol acetaldehído, también pueden presentar
actividad auxínica. Ciertas plantas poseen otros compuestos estructuralmente similares
al AIA y que provocan respuestas iguales, como el á cido fenilacético (AFA), menos activo
que el AI; el á cido 4-cloro indolacético (4-Cl-AIA), reportado en semillas jó venes de
varias leguminosas y el á c. Indolbutírico (AIB), de má s reciente descubrimiento.
CITOQUININAS
Las mejores definiciones de senescencia son imprecisas, la má s comú n es que la
senescencia comprende una serie de cambios deteriorativos que terminan finalmente
con la muerte de un ó rgano o un organismo completo. La senescencia de las hojas puede
ser inducida por separació n de las mismas de la planta o por la obscuridad.
Los cambios bioquímicos que ocurren en las hojas senescentes han sido caracterizados,
los má s importantes son un descenso en proteínas y á cidos nucleicos y amarillamiento
irreversible, debido a un descenso en clorofila. El catabolismo excede el anabolismo, y
hay una masiva exportació n e metabolitos solubles desde la hoja senescente a otras
partes de la planta.
La kinetina, y otras citoquininas sintéticas, retrasan la senescencia tanto en hojas
completas separadas como en secciones de las mismas en diversas especies.
GIBERELINAS
Desde el punto de vita hormonal existe una compleja interacció n de hormonas que son
responsables de la germinació n o latencia de la semilla. El proceso de la germinació n se
inicia en presencia de giberelinas ya que se conoce que esta hormona se desplaza desde
SEDE QUITO
las células embrionarias, donde se sintetiza a la capa de aleurona (capa que rodea al
endosperma). En las células de aleurona las giberelinas inducen la producció n de alfa
amilasa que es segregada al endospermo donde convierte el almidó n en azú car que se
transloca a los puntos de crecimientos del embrió n
4. RECURSOS UTILIZADOS
MATERIALES
CANTIDAD
DESCRIPCION POR CURSO POR GRUPO
Vasos de precipitació n 50 ml 5 1 para 2 grupos
Vasos de precipitació n 20 ml 30 3
Frascos de vidrio de 200 ml 30 3
Placas Petri con Agar-Almidó n 20 2
Pisetas con agua destilada 5 1 para 2 grupos
Bisturí 40 4
Cajas Petri con DOBLE papel filtro 20 2
GOTEROS graduados 10 1
Sustrato inerte: cascajo, vermiculita o cascarilla 1000 g (lo
de arroz. (estudiantes) necesario para
llenar 30
frascos de 200
ml)
Pipetas de 2 ml 10 1
Pipetas de 1 ml 20 2
Parafilm rollo 1
Vasos de precipitació n de 25 ml 10 1
Matraces volumétricos de 100 mL 9 Este
Matraces Erlenmeyer de 100 mL 9 requerimiento
Vasos de precipitados de 10 mL 9 es para 3
Pipeta Pasteur 3 grupos de
SEDE QUITO
REACTIVOS
CANTIDAD
DESCRIPCION
POR CURSO POR GRUPO
Soluciones de AIB: 0.1 mg/l AIB, 0.5 mg/l AIB y 400 ml de cada 100 ml de cada
1.0 mg/l AIB solució n solució n
EQUIPOS
CANTIDAD
DESCRIPCION POR CURSO POR GRUPO
Estufa (al final de la prá ctica) 1
Balanza (al final de la prá ctica) 1
SEDE QUITO
5. PROCEDIMIENTO
1. Preparar 100 ml de las siguientes concentraciones de AIB: 0 (testigo sin auxinas) 0.1
mg/l AIB, 0.5 mg/l AIB y 1.0 mg/l AIB
Preparar solución patrón. Agregar NAOH 1N gota a gota a 1mg de AIB hasta disolver,
inmediatamente se agrega agua destilada y aforar a 100 ml.
Colocar 25ml de solució n de AIB en una probeta y aforar a 250ml, verter en un frasco
de 250 ml limpio. Repetir con 12.5 Ml y 2.5 Ml de solució n patró n de AIB para otros dos
frascos, ademá s de 250 ml de agua para el frasco patró n.
2. Lavar cuidadosamente las ramas de hiedra con agua jabonosa y enjuagar con una
solució n de hipoclorito de sodio al 1.5% P/v, volver a enjuagar con agua destilada.
3. Cortar las hojas de la base de cada una de las ramas con una navaja.
4. Colocar 5 ramas en cada uno de los frascos envueltos con papel aluminio.
5. Revisar cada semana durante dos semanas, para observar el desarrollo de raíces,
contar y medir las que se hayan formado. Registrar los resultados en los cuadros 1 y 2.
B. CITOQUININAS
SEDE QUITO
C. GIBERELINAS
1. En placa de agar –almidó n testigo poner 1 ml de agua destilada
2. En la placa problema (agar - almidó n) poner 1 ml de GA3 (10ml/L)
3. Poner 5 semillas de cebada sin embrión en cada una de las placas
4. Sellar las placas con parafilm
5. Poner las placas en la estufa a 25C durante 2-3 días
6. Al cabo de esos días añ adir 1 ml de lugol en cada placa.
SEDE QUITO
A. reporte los datos obtenidos en cuanto al nú mero, longitud y masa seca de la raíz
en cada uno de los tratamientos (VER AEXOS). Analice los resultados obtenidos.
B. Comentar los resultados obtenidos; Indicar qué relació n existe entre la
benciladenina y la senescencia de las hojas.
C. Dibuje y describa los resultados obtenidos
a. Anote los observado en cada tratamiento
ANEXOS.
BIBLIOGRAFÍA
Carmona, T. 2007. Manual de Prá cticas de la experiencia educativa, Biología
Vegetal.
Gabriel y Galá n Moris, J. 2002. Biología Vegetal. 1era. Ed. Editorial Belisco.
Izco, Jesú s. 2004. Botá nica. McGraw- Hill / Interamericana de Españ a, S.A. 2da.
Ed. 1000 pp.
Gó mez, S. 2014. Laboratorio de Biología Vegetal. Disponible en:
http://www.ciens.ucv.ve:8080/generador/sites/labbiolvegetal/plantilla4/
index.htm
SEDE QUITO
PRACTICA N° 6
2. OBJETIVOS:
OBJETIVO GENERAL
Identificar los principales cambios morfoló gicos que se visualizan a partir de una semilla
en germinació n.
OBJETIVOS ESPECIFICOS
Reconocer el origen estructural de hojas, tallos raíces a partir de estructuras
seminales.
Determinar el efecto de la impermeabilidad de las cubiertas en la latencia de las
semillas.
Determinar el efecto del estrés por calor en el vigor de granos de maíz mediante la
prueba de tetrazolio.
3. MARCO TEÓRICO
SEDE QUITO
4. RECURSOS UTILIZADOS
MATERIALES
CANTIDAD
DESCRIPCION POR CURSO POR GRUPO
REACTIVOS
SEDE QUITO
CANTIDAD
DESCRIPCION
POR CURSO POR GRUPO
Tetrazolium 2% 25 ml 2.5 ml
Lejía al 5% 200 ml 20ml
Sol. de H2SO4 al 50% 20 ml
solució n de hipoclorito de sodio al 1.5 % p/v
Agua destilada 2000 mL
EQUIPOS
CANTIDAD
DESCRIPCION
POR CURSO POR GRUPO
Estufa a 25°C 1
Estereomicroscopio 1
5. PROCEDIMIENTO
B) LATENCIA
Desinfectar las semillas de falsa acacia con lejía al 5% durante 3 minutos.
Tomar 3 lotes de 10 semillas y tratarlas del siguiente modo:
o Lote 1 (testigo): semillas intactas
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MANUAL DE PROCEDIMIENTO DE PRÁCTICAS
LABORATORIO DE CIENCIAS DE LA VIDA
PERIODO 63
CARRERA BIOTECNOLOGÍA
SEDE QUITO
Dejar germinar a temperatura ambiente, añ adiendo perió dicamente agua para que
el papel filtro no se seque.
Después de una semana determinar el porcentaje de semillas germinadas en cada
uno de los tres lotes, y comparar la efectividad de los tratamientos.
2. Se separará n cuatro lotes de 25 granos cada uno. El lote 1 (T0) será el testigo, a los
tres lotes restantes se les aplicará n los siguientes tratamientos de envejecimiento:
SEDE QUITO
3. Sembrar cada lote (15 granos por lote) entre hojas de toalla absorbente humedecidas
(técnica con papel, envolviendo en forma de “taco”), etiquetar y dejar en la estufa a 25
°C.
Curva de germinación.
1. Observar los granos sembrados cada 6 h a partir de las 12 h de iniciada la embibició n
hasta alcanzar las 72 h. Contar el nú mero de granos que han germinado en cada tiempo.
Calcular el porcentaje de germinació n en cada observació n mediante la siguiente
fó rmula:
Germinació n (%) = (Nú mero de granos germinados/ total de granos utilizados) x 100.
2. Tabular y graficar los datos.
SEDE QUITO
Prueba de tetrazolio
1. Seleccionar 10 granos de maíz de cada uno de los lotes de tratamientos previamente
utilizados (T0, T1,T2 y T3).
2. Cortar los granos de cada uno de los lotes (T0, T1,T2 y T3) longitudinalmente con la
navaja de costilla, asegurá ndose de dejar expuesto el embrió n (Ver Fig. 1).
A) Anotar los cambios que se registran cada 48 horas. Describir los principales cambios
morfoló gicos que observa, principalmente en relació n a: No. días al aparecimiento del
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LABORATORIO DE CIENCIAS DE LA VIDA
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CARRERA BIOTECNOLOGÍA
SEDE QUITO
Porcentaje de
Tratamiento
germinación
Testigo
Físico
Químico
Construir una curva de germinació n para todos los lotes graficando el porcentaje de
granos germinados (y) contra el tiempo de imbibició n en horas (x).
Graficar la longitud de la radícula (mm) contra el tiempo de germinació n (h) para cada
lote.
Comparar los resultados de los pará metros de vigor (curva de germinació n y velocidad
de crecimiento de la radícula), con los resultados de la prueba de tetrazolio.
SEDE QUITO
ANEXOS.
SEDE QUITO
BIBLIOGRAFÍA
Carmona, T. 2007. Manual de Prá cticas de la experiencia educativa, Biología
Vegetal.
Díaz de Leó n, F. Manual de Laboratorio de Fisiología y Bioquímica Vegetal.
Universidad Autó noma Metropolitana.
Gabriel y Galá n Moris, J. 2002. Biología Vegetal. 1era. Ed. Editorial Belisco.
Izco, Jesú s. 2004. Botá nica. McGraw- Hill / Interamericana de Españ a, S.A. 2da.
Ed. 1000 pp.
Gó mez, S. 2014. Laboratorio de Biología Vegetal. Disponible en:
http://www.ciens.ucv.ve:8080/generador/sites/labbiolvegetal/plantilla4/
index.htm
SEDE QUITO
PRÁCTICA N° 7
2. OBJETIVOS:
OBJETIVO GENERAL
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
3. MARCO TEÓRICO
BRIOFITAS
En el ambiente terrestre, con cerca de 20,000 especies, las briofitas son el segundo
grupo má s importante de plantas verdes. Generalmente son pequeñ as y habitan en
ambientes muy variados, desde cerca del nivel del mar hasta las elevaciones má s altas,
en las selvas o en los desiertos, pero su vida siempre está íntimamente ligada al agua en
estado líquido. Su ciclo de vida incluye dos fases el gametofito y el esporofito. Cada una
de ellas tiene atributos morfoló gicos y bioló gicos que señ alan a las briofitas como un
grupo excepcional y muy importante en la evolució n del reino vegetal. Tradicionalmente
se les divide en tres grupos a saber: Antocerotes, Hepáticas yMusgos.
Las briofitas tienen un ciclo de vida heteromó rfico. El gametofito o fase haploide es la
dominante en las briofitas; es la má s conspicua y la que tiene mayor duració n. En
comparació n, el esporofito o fase diploide es pequeñ o y de duració n corta. En la fase del
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CARRERA BIOTECNOLOGÍA
SEDE QUITO
gametofito, las plantas verdes pueden tener formas taloides o foliosas que derivan de la
divisió n de una sola célula apical. Durante la etapa reproductiva, el gametofito produce
ó rganos sexuales masculinos (anteridios) o femeninos (arquegonios); las células
sexuales masculinas o anterozoides son biflagelados y, por lo tanto, necesitan un
ambiente acuoso para desplazarse. Los anterozoides y la oosfera (célula sexual
femenina) se producen por mitosis pues se forman en gametofitos haploides.
PTERIDOFITAS
Las pteridofitas son plantas que se han adaptado al medio terrestre, aunque de forma
incompleta. Han desarrollado un tejido epidérmico con cutícula y estomas, lo que evita
la desecació n y controla el intercambio de gases. Presentan tejidos conductores que
transportan agua, sales y sustancias elaboradas por la planta, lo que permite su
distribució n. Gracias a estas adaptaciones, la planta puede alcanzar mayor tamañ o que
las Briofitas.
Al igual que el resto de las plantas, presentan un ciclo bioló gico haplodiplonte en el que
se alternan la fase de gametofito y esporofito. El gametofito, denominado prótalo,
crece muy poco, só lo unos centímetros, y es subterrá neo. En él se desarrollan
anteridios y arquegonios, encargados de formar gametos masculinos y femeninos
respectivamente. La fecundació n de gametos origina una célula que forma el esporofito.
É ste puede alcanzar un tamañ o arbustivo. Se conocen pteridofitas fó siles que alcanzaron
un porte arborescente (Lepidodendron, Sigillaria).
SEDE QUITO
El esporofito presenta un gran desarrollo, formado por raíz, tallo subterrá neo,
denominado rizoma, y hojas llamadas frondes. Todas las plantas que presentan esta
estructura se denominan cormofitas.
Las Pteridofitas se desarrollan en lugares muy hú medos. Esto es debido a que su
fecundació n só lo es posible en agua, para que el anterozoide pueda nadar hasta la
ovocélula. En épocas de sequía el fronde se seca, mientras que el rizoma (tallo
subterrá neo) se mantiene vivo si en el suelo hay humedad.
GIMNOSPERMAS
Las gimnospermas son todas leñ osas (pero pueden ser á rboles, arbustos o lianas), y no
poseen verdaderas acuá ticas y só lo unas pocas epífitas. Estas plantas crecen en todo el
mundo, de los 72 grados al norte a los 55 grados al sur, y son la vegetació n dominante en
muchas regiones frías y á rticas. Muchas son familiares como ornamentales para madera
de alta calidad. Entre las gimnospermas se encuentran los individuos má s altos y de má s
larga vida de las plantas.
SEDE QUITO
4. RECURSOS UTILIZADOS
MATERIALES
CANTIDAD
DESCRIPCIÓN
Por curso Por grupo
Portaobjetos 18 3
Cubreobjetos 18 3
Equipo de disecció n (tijera, pinzas, bisturí, aguja
6 1
de disecció n)
lupa 6 1
Vidrio de reloj 6 1
Picetas pequeñ as con agua destilada 6 1
gotero 6 1
Hojas de Papel absorbente 18 3
Ejemplares de musgo, hepá tica, helecho y cola de
caballo; ramas y conos masculinos y femeninos
de pino (provistos por los alumnos)
SEDE QUITO
REACTIVOS
CANTIDAD
DESCRIPCIÓN
Por curso Por grupo
Solució n de Azul de metileno 15 ml
Solució n de lugol 15 ml
EQUIPOS
CANTIDAD
DESCRIPCIÓN
Por curso Por grupo
Estereomicroscopio 6 1
Microscopio ó ptico 6 1
5. PROCEDIMIENTO
A. BRIOFITAS
En cada uno de los ejemplares de musgo y hepá tica, con la ayuda de la lupa y los
microscopios, identifique su gametofito y esporofito.
En el gametofito, identifique el tipo estructural al que corresponde (taloide/folioso).
En el gametofito de la hepá tica ubique los arquegonióforos,a nteridióforos y
conceptáculos.
En el esporofito del musgo, distinga la cá psula, pedicelo y pie.
B. PTERIDOFITAS
En cada uno de los ejemplares de helecho y equiseto, con la ayuda de la lupa y los
microscopios:
Distinga sus estructuras vegetativas: raíz, tallo/hojas, descríbalos
Establezca la ubicació n, estructura y disposició n de los esporangios
Identifique sus esporas
C. GIMNOSPERMAS
En los conos masculinos y femeninos de pino, con la ayuda de la lupa y
estereomicroscopios:
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SEDE QUITO
SEDE QUITO
7. CUESTIONARIO.
8. BIBLIOGRAFÍA
https://www.aulados.net/Botanica/Curso_Botanica/Briofitos/
https://www.aulados.net/Botanica/Curso_Botanica/Pteridofitos/
https://www.aulados.net/Botanica/Curso_Botanica/Gimnospermas/
https://www.youtube.com/watch?v=3TgTv4x4wHk
https://www.youtube.com/watch?v=IVt4rM0HhdM
SEDE QUITO
PRÁCTICA N° 8
2. OBJETIVOS
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
1. Reconocer las principales características morfoló gicas del grupo de las
Monocotiledó neas.
2. Identificar las principales familias y géneros del grupo Monocotiledó neas.
3. Reconocer las principales características morfoló gicas del grupo de las
Eudicotiledó neas: subclados Ró sides y Astérides.
4. Identificar las principales familias y géneros del subclado Ró sides.
5. Identificar las principales familias y géneros del subclado Astérides.
3. MARCO TEÓRICO
ANGIOSPERMAS
SEDE QUITO
CLADO MAGNOLIIDE: Este grupo o clado es monofilético y está formado por los
ó rdenes Magnoliales, Laurales, Canellales y Piperales y muchos de sus representantes
presentan características encontradas tanto en muchas monocotiledó neas (e.g. flores
trímeras, haces vasculares dispersos en el tallo) como en el antiguo grupo de las
dicotiledó neas (e.g. hojas con nervaduras reticuladas, semillas de 2 cotiledones).
Ademá s, muchas de las familias en este grupo tienen aceites esenciales y sus flores
tienen carpelos libres, estambres sin distinció n entre filamento y antera; o
alternativamente tienen flores unisexuales sin perianto (e.g. algunas Piperales).
SEDE QUITO
EUDICOTILEDÓNEAS
Los límites y las relaciones de las ró sidas no son claros (Soltis et al., 2005; Jansen et al.,
2006; Bausher at al., 2006). Soltis et al. (2003) encuentran un 79% de sustento para el
clado, pero las ró sidas también incluirían a Vitales y Saxifragales, éste ú ltimo clado
siendo hermano del resto del grupo, aunque con débil sustento.
SEDE QUITO
denominado por Reveal como Fá bidas, luego de publicado el aporte del APG II
(2003).
•Eurosides II: con los ó rdenes Brassicales, Malvales y Sapindales. Este subclado fue
denominado por Reveal como Má lvidas, luego de publicado el aporte del APG II
(2003).
Las Asterideas comprenden cerca de 1/3 de las plantas con flores, con
aproximadamente 80.000 especies, cerca de 4.700 géneros y 114 familias. La mayoría de
lo taxones incluidos en este grupo tienen los siguientes caracteres en comú n: flores
gamopétalas (excepto Apiales, que probamente hayan derivado de un ancestro con
pétalos unidos), ó vulos tenuinucelados (excepto Cornales, el grupo má s basal),
unitégmicos (excepto Primulaceae y pocos géneros de Cornales) y presencia de
compuestos secundarios terpenioideos de tipo iridoide o bien compuestos
alcaloides (Freire Fierro, 2004).
Este grupo de plantas, ademá s de los caracteres morfoló gicos y químicos antes
mencionados, presentan tubos cribosos, generalmente con plastidios tipo s. Las hojas
son mayormente simples, con bordes enteros, dentadas o lobuladas; compuestas,
palmaticompuestas con los bordes aserrados; de disposició n alterna, verticiladas,
decusadas, arrosetadas. Las flores son vistosas bien desarrolladas, perfectas, por lo
general pentá meras. Androceo es isó mero, usualmente unido al tubo corolino y los
estambres son alternos a los ló bulos de la corola. Gineceo gamocarpelar con 2 a 5
cá rpelos, con ovario sú pero o ínfero. Frutos variados: bayas, cá psulas, cariopses, drupas
y pixidios (Cronquist, 1981; Judd et al. 1999, 2002).
SEDE QUITO
4. RECURSOS UTILIZADOS
MATERIALES
CANTIDAD
DESCRIPCIÓN
Por curso Por grupo
Portaobjetos 18 3
Cubreobjetos 18 3
Equipo de disecció n (tijera, pinzas, bisturí, aguja de
6 1
disecció n)
lupa 6 1
Vidrio de reloj 6 1
Picetas pequeñ as con agua destilada 6 1
gotero 6 1
Hojas de Papel absorbente 18 3
REACTIVOS
CANTIDAD
DESCRIPCIÓN
Por curso Por grupo
Solució n de Azul de metileno 15 ml
Solució n de lugol 15 ml
EQUIPOS
CANTIDAD
DESCRIPCIÓN
Por curso Por grupo
Estereomicroscopio 6 1
Microscopio ó ptico 6 1
SEDE QUITO
6. PROCEDIMIENTO
Identifique el tipo de raíz, tallo y hoja que posee; analice el tipo de nervació n.
Identifique el tipo de flor en cuanto al nú mero de elementos en cada verticilo
floral, la presencia o no de tépalos, fusió n o no de los elementos del perianto.
Con la ayuda del microscopio ó ptico, trate de observar granos de polen de al
menos una especie de cada uno de los dos grupo en estudio.
Escoja una especie de cada uno de los dos grupos en observació n, realice el
corte transversal a nivel del ovario e identifique el tipo de placentació n.
Recolecte la informació n necesaria para realizar el diagrama floral y la
fó rmula floral de una de las especies de cada uno de los grupos en estudio.
SEDE QUITO
7. CUESTIONARIO
SEDE QUITO
8. BIBLIOGRAFÍA
http://exa.unne.edu.ar/biologia/diversidadv/documentos/ANGIOSPERMAS/
Ceratophyllales%20y%20Eudicotiledoneas%20Basales/Eudicotiled%F3neas-
Filogenia.pdf
http://exa.unne.edu.ar/biologia/diversidadv/descripcion-angiospermas-
monocotiledoneas.htm
http://exa.unne.edu.ar/biologia/diversidadv/descripcion-angiospermas-
asterideas.htm
http://exa.unne.edu.ar/biologia/diversidadv/descripcion-angiospermas-
rosideas.htm
http://www.mobot.org/MOBOT/research/APweb/ (Angiosperm Phylogeny
Website-Missouri Botanical Garden)